Determination of lean meat powder in pork by UFLC-triple quadrupole mass spectrometry

Význam tématu

Detekce a kvantifikace β-receptorových agonistů (clenbuterol, ractopamine, salbutamol) v mase prasat je klíčová pro zajištění bezpečnosti potravin a splnění přísných regulačních limitů. Takové látky, známé jako "lean meat powder", lze zneužít ke zrychlení růstu svaloviny, ale zanechávají zbytky, které ohrožují lidské zdraví.

Cíle a přehled studie / článku

Předložená studie popisuje vývoj a validaci rychlé analytické metody pro stanovení clenbuterolu, ractopaminu a salbutamolu v mase prasat. Metoda využívá vysokotlakou kapalinovou chromatografii UHPLC (UFLC) v kombinaci s tandemovou hmotnostní spektrometrií (MS/MS) na instrumentaci Shimadzu a splňuje požadavky čínského standardu SNT 1924-2007 a japonského systému s limitem 0,05 µg/kg.

Použitá instrumentace

Experimentální uspořádání zahrnovalo:

• Shimadzu LC-30A UHPLC se dvěma pumpami LC-30AD, online odplyňovačem DGU-20A5, autosamplerem SIL-30AC, kolonnou Shim-pack XR-ODSIII (2.0 × 50 mm, 1.6 µm) řízenou v 40 °C.
• Shimadzu LCMS-8030 triple quadrupole MS s elektrosprayovou ionizací v pozitivním módu (ESI+), napětím +4.5 kV, dusíkem jako nebulizačním a sušícím plynem, argonem jako kolizním plynem, režim MRM.
• Softwarová platforma LabSolutions ver. 5.41 pro řízení přístrojů a zpracování dat.
• Použitá mobilní fáze: 0.1 % kyselina mravenčí ve vodě (A) vs. 0.1 % kyselina mravenčí v acetonitrilu (B), gradientní program s rychlou separací do 1,8 minuty, tok 0,4 mL/min.
• Příprava standardů: multilátkové standardy v metanolu a vodě v koncentracích 0.05–100 ng/mL, včetně izotopově značených interních standardů.
• Předúprava vzorků: extrakce z 5 g homogenátu masa dle SNT 1924-2007 s konečným objemem 1 mL.

Hlavní výsledky a diskuse

• Lineární rozsah kalibračních křivek od 0.05 do 100 ng/mL pro všechny tři látky, koeficienty r > 0.999.
• Opakovatelnost (n = 6) měření retence a oblasti vrcholu: %RSD retence < 0.18 %, %RSD oblasti < 5.5 %.
• LOQ: 0.5 µg/kg pro ractopamine a salbutamol, 0.05 µg/kg pro clenbuterol (odpovídá čínskému a japonskému požadavku).
• MRM chromatogramy pro jednotlivé látky potvrdily vysokou selektivitu, retence 0.47–0.91 min.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí vysokou rychlost analýzy (< 2 min), velmi nízké detekční limity, špičkovou preciznost a spolehlivost pro rutinní kontrolu importovaného i exportovaného masa. Lze ji nasadit v kontrolních laboratořích, veterinárních ústavech a potravinářských závodech pro zabezpečení souladu s mezinárodními normami.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření metodiky na další mastné tkáně a vedlejší produkty, integrace s high resolution MS pro potvrzující analýzu a automatizace předúpravy vzorků. Další směr představuje multiplexní screening více než desetiny veterinárních látek v jediné analýze.

Závěr

Popsaná metoda UHPLC–MS/MS na přístrojích Shimadzu splňuje přísné limity pro stanovení β-agonistů v mase prasat a poskytuje efektivní řešení pro vysokopropustné testování v potravinářské bezpečnosti.

Reference

• SNT 1924-2007: Determination of Clenbuterol, Ractopamine, Salbutamol residues in Animal Derived Food for Import and Export HPLC-MS/MS Method.
• Catalog of Drugs Prohibited from Use in Feed or Drinking Water for Animals (Čína, 2002).
• Positive List System (Japan): Maximum Residue Limit for Clenbuterol 0.05 µg/kg.