Quantitation of 6 Nitrosamines in Losartan API by LC-MS/MS system as per the proposed USP General Chapter <1469>

Význam tématu

Nitrosaminy jsou známé mutagenní a karcinogenní nečistoty, které se mohou tvořit v přítomnosti amínů a nitrátných solí za kyselých podmínek.
Regulační orgány, včetně USP, stanovily přísné limity pro jejich obsah v léčivých látkách, což vyžaduje robustní analytické metody s velmi nízkými limity kvantifikace.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo vyvinout a aplikovat LC-MS/MS metodu pro kvantifikaci šesti vybraných nitrosaminů v Losartan API v souladu s návrhem obecné kapitoly USP <1469> (postup 3).
Metoda měla zajistit lineární odezvu v širokém rozmezí koncentrací, nízké LOQ a reprodukovatelnost vhodnou pro kontrolu kvality.

Použitá metodika a instrumentace

• Chromatografie: UHPLC systém Nexera XS se sloupcem Raptor ARC-18 (150mm×3,0mm×2,7μm) nebo Shim-pack velox SP-C18 (ekvivalentní), trubka na 60 °C.
• Mobilní fáze: 0,1 % kyselina mravenčí ve vodě a 0,1 % kyselina mravenčí v methanolu, gradientní program od 3 % do 95 % methanolu při průtoku 0,5 mL/min.
• Sestava: LCMS-8045 triple kvadrupól, APCI ionizace, rozhraní 270 °C, DSI 220 °C, plyny: 3 L/min pro nebulizační a sušící plyn.
• Příprava vzorků: 80 mg Losartan API rozpuštěno ve formiátovém pufru, přídavek interních standardů, vortex a centrifugace, filtrace 0,22 μm PTFE, injekce 20 μL.
• MRM přechody pro šest nitrosaminů a čtyři deuterované interní standardy byly optimalizovány pro pozitivní ionizaci.

Hlavní výsledky a diskuse

Byly připraveny devítibodové kalibrační křivky pro každou látku s vynikající linearitou (R² > 0,997).
Mez kvantifikace (LOQ) se pohybovala od 0,66 do 15,66 ppb v závislosti na analytu, s poměrem signál/šum dostatečným pro spolehlivé stanovení.
Opakovatelnost v LOQ úrovni vykázala %RSD < 25 % (n = 6).
Recovery studie v systému Losartan API prokázala návratnost v rozmezí 70 až 130 %, vyhovující požadavkům USP <1469>.
Chromatogramy a překryvy linearity standardů potvrdily selektivitu a citlivost metody.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda splňuje kritéria navržené obecné kapitoly USP <1469>, čímž zajišťuje robustní kontrolu kvality Losartan API.
Vysoká citlivost a rychlá analýza umožňují efektivní rutinní monitoring nitrosaminů v průmyslových podmínkách.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další výzkum může rozšířit metodu na detekci širšího spektra nitrosaminů a aplikaci v dalších API.
Integrace automatizovaných přípravných systémů a pokročilých ionizačních technik může zvýšit propustnost a spolehlivost analýz.
Využití umělé inteligence pro zpracování dat a prediktivní modelování může zefektivnit interpretaci výsledků.

Závěr

Navržená LC-MS/MS metoda na systému Nexera XS a LCMS-8045 prokázala vysokou citlivost, linearitu a reprodukovatelnost při stanovení šesti nitrosaminů v Losartan API.
Metoda je plně v souladu s požadavky USP <1469> a nabízí praktický nástroj pro zajištění kvality a bezpečnosti farmaceutických produktů.