Quantitation of 6 Nitrosamines in 5 Sartans by LC-MS/MS system as per the proposed USP General Chapter <1469>

Význam tématu

Nitrosaminy patří mezi vysoce mutagenní a potenciálně karcinogenní látky, u kterých je klíčové zajistit hladiny pod akceptovatelnými limity (0,03 ppm) stanovenými v navrhované USP kapitole <1469>.
Jejich výskyt v sartanových léčivech vyvolal významná regulační opatření a poptávku po citlivých analytických metodách.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout a ověřit jednorunovou metodiku pro kvantifikaci šesti nitrosaminů (NDMA, NMBA, NDEA, NEIPA, NDIPA, NDBA) v pěti sartanových API (Olmesartan, Telmisartan, Irbesartan, Losartan, Valsartan) pomocí LC-MS/MS podle navrhované USP kapitoly <1469> (Procedura 3).

Použitá metodika a instrumentace

Metoda kombinovala ultra vysokotlakou kapalinovou chromatografii s triple kvadrupólovým hmotnostním spektrometrem:

• UHPLC systém: Shimadzu Nexera XS
• Kolona: Raptor ARC-18, 150 × 3,0 mm, 2,7 µm, 60 °C
• Mobilní fáze: A – 0,1 % kyselina mravenčí ve vodě, B – 0,1 % kyselina mravenčí v methanolu
• Gradient: 3 %→95 % fáze B v 9,2 min, návrat na 3 % do 12,1 min
• Objem injekce: 20 µL, průtok: 0,5 mL/min
• MS detekce: Shimadzu LCMS-8045 s APCI interfaced, MRM režim, polarity switching

Hlavní výsledky a diskuse

Linearita každého analyzu byla potvrzena v rozsahu 0,66–90 ppb (R² > 0,998). Mez stanovení (LOQ) se pohybovala od 0,66 ppb (NDEA) do 15,66 ppb (NMBA) s %RSD < 25 %. Recovery studie provedené při LOQ (0,03 ppm pro většinu nitrosaminů, 0,014 ppm pro NDEA) ukázaly 71–118 % splňující kritéria 70–130 %. Použití divert ventilu zajistilo ochranu MS před významnými matricovými interferencemi API.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• Jednoduchou, rychlou analýzu šesti nitrosaminů v jednom běhu
• Vysokou citlivost a selektivitu s MRM detekcí
• Plné vyhovění navrhovaným limitům USP <1469>
• Možnost integrace do rutinních QA/QC laboratoří

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metodiky na další skupiny API a nové nitrosaminové kontaminanty
• Automatizace a miniaturizace pro vyšší průtok vzorků
• Využití vyspělých ionizačních technik a HRMS pro identifikaci nových neznámých aditivních látek
• Implementace do on-line procesního monitorování

Závěr

Vyvinutá LC-MS/MS metoda na systému Shimadzu LCMS-8045 pro šest nitrosaminů v sartanových API splňuje požadavky navrhované USP kapitoly <1469>. Metoda prokázala vysokou linearitu, nízké LOQ, reprodukovatelnost a spolehlivé recovery, čímž se stává vhodným nástrojem pro kontrolu kvality a bezpečnosti léčiv.

Reference

• Shailendra Rane, Devika Tupe, Deepti Bhandarkar, S. Saravanan a B. Karthikeyan. Quantitation of 6 Nitrosamines in 5 Sartans by LC-MS/MS system as per the proposed USP General Chapter <1469>. Shimadzu Analytical (India) Pvt. Ltd. a Spinco Biotech Pvt. Ltd., First Edition: April 2021.