Agilent MassHunter BioConfirm software - Protein Characterization Made Routine and Secure

Význam tématu

Charakterizace intact bílkovin, mapování peptidů a profilování uvolněných glykosidických modifikací (glykanů) jsou základem pro vývoj a kontrolu kvality biopharmaceutik. Rychlé a spolehlivé určení molekulových hmotností, posttranslačních modifikací a sekvenčního pokrytí usnadňuje rozhodování v průběhu výzkumu, výroby i validace procesů.

Cíle a přehled studie / článku

Předložený dokument představuje softwarové řešení Agilent MassHunter BioConfirm, které zajišťuje komplexní analýzu intact proteinů, peptidové mapování a profilování glykanů s přehledným reportováním a plnou připraveností na regulační požadavky (21 CFR Part 11, Annex 11).

Použitá metodika a instrumentace

Analytický workflow kombinuje následující kroky:

• Příprava vzorku: AssayMAP Bravo pro automatizované čištění a frakcionaci proteinů.
• Separace: AdvanceBio kolony na systému Agilent 1290 Infinity II Bio LC.
• Detekce: MS a MS/MS na přístroji Agilent 6545XT AdvanceBio LC/Q-TOF.
• Softwarová analýza: MassHunter BioConfirm pro rychlou dekonvoluci a identifikaci PTM, mapování disulfidických můstků a sledování glykoform.

Hlavní výsledky a diskuse

Intact protein workflow umožňuje automatickou dekonvoluci spekter, kvantifikaci hlavních glykoform a sledování disulfidických vazeb. Peptidové mapování zkracuje dobu ruční verifikace díky sekvenčnímu pokrytí zobrazenému v mapě a histogramových grafech PTM. Uvolněné glykany lze citlivě profilovat chemickým označením a databází glykanů rozšiřitelnou uživatelem. Výsledky ukazují vysokou reprodukovatelnost, přesnost stanovení molekulových hmotností a robustnost při různých vzorových podmínkách.

Přínosy a praktické využití metody

Implementace BioConfirm v laboratoři přináší:

• Urychlení analytických kroků a snížení manuálních zásahů.
• Jasné vizualizace a interpretaci dat pro QA/QC a výzkum.
• Plnou shodu s předpisy díky auditním stopám, kontrolám přístupu a generování přizpůsobitelných reportů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj v oblasti strojového učení pro automatizovanou interpretaci komplexních PTM, rozšíření databází glykosidických struktur a integrace do centralizovaných lab informatik systémů (LIMS). Zvýšený důraz na vysokopropustné workflow a miniaturizaci přípravných postupů povede k dalšímu zrychlení biopharma analýz.

Závěr

Agilent MassHunter BioConfirm představuje všestranné řešení pro charakterizaci intact proteinů, peptidové mapování a glykanová profilování s důrazem na přesnost, rychlost a regulatorní shodu. Díky modulární architektuře se snadno přizpůsobí potřebám výzkumu i výrobních laboratoří.

Reference

• Agilent Technologies. Protein Characterization Made Routine and Secure; publikace č. 5991-8466EN, 2021.