Agilent MassHunter BioConfirm software - Enabling Routine Characterization of Proteins

Význam tématu

Charakterizace proteinů a jejich modifikací je klíčová pro vývoj a kvalitu biologických léčiv. Spolehlivá analýza post-translačních modifikací, sekvenční pokrytí a kvantifikace parametrů jako DAR (drug-to-antibody ratio) urychluje vývoj monoklonálních protilátek, konjugátů a vakcín.

Cíle a přehled studie / článku

Text prezentuje software Agilent MassHunter BioConfirm jako centrální nástroj pro biopharma procesy. Popisuje pět hlavních aplikací:

• Intakt proteinová analýza a určování molekulové hmotnosti s detekcí PTM
• Peptidové mapování a sekvenční potvrzení s využitím MS/MS
• Profilování uvolněných glykosidických modifikací
• Automatizovaná kalkulace DAR pro ADC
• Generování uživatelsky přizpůsobených reportů a walk-up prostředí pro netechnické uživatele

Použitá metodika a instrumentace

Pro každou aplikaci je definován pracovní postup:

• Sample prep: automatizace pomocí AssayMAP Bravo
• Separation: AdvanceBio kolony a 1290 Infinity II UHPLC
• Detekce: 6545XT AdvanceBio LC/Q-TOF
• Analýza dat: MassHunter BioConfirm software včetně modulů pro DAR kalkulaci a glykanový databázový nástroj
• Reportování: PDF Report Builder a Walkup Software pro distribuované workflow

Hlavní výsledky a diskuse

Intaktní analýza umožňuje rychlou dekonvoluci spekter a kvantifikaci glycoform pomocí histogramů. Peptidové mapování nabízí automatické vyhledání peptide fragmentů a přehled sekvenčního pokrytí pro více vzorků. Workflow pro uvolněné glykany usnadňuje identifikaci glykosidických struktur a jejich izotopového profilu. DAR kalkulátor zjednodušuje výpočet poměru lék/protilátka pro intaktní i redukované vzorky. Všechny výsledky lze přehledně sestavit do přizpůsobených reportů.

Diskuse se zaměřuje na vysokou citlivost, reprodukovatelnost a zkrácení času od přípravy vzorku po finální report.

Přínosy a praktické využití metody

BioConfirm poskytuje:

• Automatizaci analýzy, redukci manuální práce
• Integrované workflow od přípravy až po reportování
• Rychlou detekci PTM a glykoform pro kontrolu kvality
• Snadné porovnání variant vzorků a optimalizaci procesů
• Uživatelsky přívětivé rozhraní vhodné i pro netechnické pracovníky

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další integrace umělé inteligence pro automatizovanou interpretaci spekter, rozšíření databáze PTM a glykan, propojení s LIMS a cloudovými platformami pro vzdálený přístup a sledování kvality v reálném čase. Implementace prediktivní analýzy může dále zkrátit vývojový cyklus biologických léčiv.

Závěr

Agilent MassHunter BioConfirm představuje robustní a komplexní řešení pro rutinní charakterizaci proteinových léčiv. Díky modulárnímu přístupu pokrývá celý řetězec od přípravy vzorku, přes analýzu až po reporting a podporuje rychlé rozhodování v biotechnologickém vývoji.