Reliable Quantitative Results for Main and Trace Compounds in Complex Matrixes Using the Agilent 1200 Infinity Series HDR-DAD Impurity Analyzer System

Význam tématu

Analytická kvantifikace hlavních a stopových sloučenin v komplexních matricích je klíčová pro průmyslovou kontrolu kvality, výzkum a vývoj i bezpečnost potravin či farmaceutik. Tradiční detekční systémy často vyžadují samostatná měření pro různé koncentrace nebo manuální zásahy při integraci šumem ovlivněných stopových signálů, což snižuje efektivitu a reprodukovatelnost výsledků.

Cíle a přehled studie

Studie představuje technický přehled detekčního systému Agilent 1200 Infinity Series HDR-DAD Impurity Analyzer, který kombinuje dva diodové pole s odlišnými délkami optické dráhy. Cílem bylo demonstrovat možnost simultánní detekce a kvantifikace sloučenin v širokém dynamickém rozsahu v jediné chromatografické injekci bez překročení lineární oblasti detektoru.

Použitá metodika

Pro separaci komplexního vzorku byly optimalizovány chromatografické podmínky:

• Sorbent: sub-2 µm částice (sloupec dodán zákazníkem)
• Teplota kolony: 40 °C
• Mobilní fáze: A – 10 mM chlorid amonný, B – acetonitril, C – metanol
• Průtok: 0,5 mL/min
• Gradient: B z 24 % na 76 % a C z 6 % na 19 % během 17 minut
• Detekce: 250 nm/4 nm, referenční pásmo 450/80 nm, rychlost 20 Hz

Použitá instrumentace

Pro měření byl použit Agilent 1200 Infinity Series HDR-DAD Impurity Analyzer System doplněný o:

• Agilent 1290 Infinity DAD s 60 mm Max-Light flow cell
• Agilent 1290 Infinity DAD s 3,7 mm Max-Light flow cell
• High Dynamic Range DAD Kit (G2199A)
• Agilent 1290 Infinity termostatovaná kolona (G1316C)
• Autosampler a termostat (G4226A, G1330B)
• Agilent 1290 Infinity kvaternární pumpa (G4204A)
• Software OpenLAB CDS ChemStation Rev. C.01.05

Hlavní výsledky a diskuse

Systém HDR-DAD dosahuje až 30násobně širší lineární oblasti než standardní DAD detektory. Kombinací signálů z detektorů s různou optickou drahou lze sledovat hlavní sloučeninu s výškou píku ~5 700 mAU současně se stopovou sloučeninou tvořící pouhých 0,04 % výšky hlavního píku v jediné analýze. Čtyřikrát opakované měření vedlo k RSD plochy stopové složky 3,68 % a hlavní složky 0,55 %. Precize retenční doby byla rovněž excelentní (0,064 % RSD pro stopovou a 0,004 % RSD pro hlavní sloučeninu).

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje:

• Zrychlené a efektivní měření bez nutnosti vícenásobných injekcí
• Automatizovanou integraci bez manuálních zásahů
• Vyšší spolehlivost a reprodukovatelnost kvantifikace v komplexních matricích

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření HDR-DAD technologií ve farmaceutickém a potravinářském průmyslu pro rychlou kontrolu čistoty a stability výrobků. Integrace s hmotnostní spektrometrií, pokročilá datová analýza a rozšíření dynamického rozsahu pro biologické a environmentální vzorky posílí univerzálnost metody.

Závěr

Agilent 1200 Infinity Series HDR-DAD Impurity Analyzer prokázal schopnost kvantifikace hlavních i stopových složek v jediné analýze s vysokou přesností a širokým dynamickým rozsahem. Odpadá nutnost opakovaných měření či manuální integrace, což výrazně zvyšuje efektivitu a kvalitu výsledků.

Reference

1. Huesgen A.G. Comparison of Sensitivity and Linearity of the Agilent 1200 Infinity Series High dynamic Range Diode Array Detector Solution and the Conventional Agilent 1290 Infinity DAD. Agilent Technologies Technical Overview, publication number 5991-3877EN, 2014.