Agilent 1200 Infinity Series HDR‑DAD Impurity Analyzer System for the Quantification of Trace Level of Genotoxic Impurity

Význam tématu

Oxidační degradace farmaceutických látek může vést ke vzniku genotoxických impurit, které představují riziko pro pacienty a vyžadují citlivou analýzu při stopových hladinách. Spojení vysokodynamického rozsahu (HDR) s diodovým polem detektorem (DAD) umožňuje zvládnout jak nízké koncentrace nežádoucích látek, tak saturaci hlavního analytu při vyšších objemech injekce.

Cíle a přehled studie/článku

Cílem studie bylo demonstrovat kvantifikaci stopové aromatické N-oxidové genotoxické impurity vzniklé degradací omeprazolu pomocí Agilent 1200 Infinity Series HDR-DAD Impurity Analyzer System. Jako modelový systém bylo použito léčivo omeprazol vystavené různým koncentracím H2O2, následně byla stanovená impurita proti standardní křivce.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky omeprazolu byly degradovány 1–4% roztoky peroxidu vodíku, po odpaření a filtraci byly supernatanty odeslány do LC. Systém HDR-DAD kombinoval dvě DAD s buňkami o dráze 60 mm a 3,7 mm, jejichž signál byl normalizován na efektivní dráhu 10 mm. Chromatografie probíhala na C8 kolonu (4,6×150 mm, 3,5 µm) s mobilní fází fosfátový pufr:acetonitril 3:1, při 25 °C a průtoku 0,8 mL/min, detekce na 280 nm.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda s HDR umožnila injektovat 20 µL bez saturace hlavního píku a integraci impurity (0,009 %). Ve srovnání se standardní DAD se snížil šum až o 88 % a zlepšil poměr signál/šum. Linearity pro N-oxid dosáhla R2 > 0,9989 v rozsahu 0,1–2 ppm. Při degradaci 1–4% H2O2 byly zjištěny impurity 0,43–1,32 ppm, všechny hodnoty byly v rámci lineárního rozsahu.

Přínosy a praktické využití metody

Vysoká citlivost a široký dynamický rozsah umožňují rutinní stanovení genotoxických impurit v QA/QC laboratořích bez nutnosti komplikovaných úprav metodiky. Automatická integrace HDR signálu zvyšuje přesnost a reprodukovatelnost dat.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozšíření HDR-DAD do dalších farmaceutických a environmentálních aplikací, adaptace pro vícekanálovou detekci genotoxických sloučenin a kombinace s hmotnostní analýzou pro identifikaci neznámých degradantů.

Závěr

Agilent 1200 Infinity Series HDR-DAD Impurity Analyzer System efektivně kvantifikoval stopovou aromatickou N-oxidovou genotoxickou impuritu v omeprazolu. Metoda nabízí robustní kvantifikaci, vynikající lineární rozsah a vysokou citlivost.

Použitá instrumentace

• Agilent 1290 Infinity Binary Pump (G4220A)
• Agilent 1290 Infinity Autosampler (G4226A)
• Agilent 1290 Thermostatted Column Compartment (G1316C)
• Agilent 1290 DAD1 60 mm flow cell (G4212A)
• Agilent 1290 DAD2 3.7 mm flow cell (G4212A)
• Agilent 1200 HDR-DAD Solution Kit (G2199AA)

Reference

1. Seshadri R.K. et al. Scientia Pharmaceutica 2013, 81, 437–458
2. Benigni R., Bossa C. Curr. Comput.-Aided Drug Des. 2006, 2(2), 169–176
3. Huesgen A.G. Agilent Technologies Technical Overview, 2013, publ. 5991-1409EN
4. USP29-NF24, Omeprazole Method, 2007, p. 1577
5. Agilent 1200 HDR-DAD User Manual, 2014, publ. G2199-90000