HPLC Enantiomeric Separations of Pharmaceuticals Using Polar Organic Mobile Phases

Význam tématu

Polar organic mobile phases rozšiřují možnosti enantiomerní separace léků, zejména polarních a ionizovatelných sloučenin. Použití organických rozpouštědel (acetonitril, methanol) doplněných kyselými a zásaditými aditivy zlepšuje selektivitu, snižuje základní šum v UV detekci a umožňuje přímou kompatibilitu s LC-MS

Cíle a přehled studie

Cílem je porovnat polar organic mode (POM) a polar ionic mode (PIM) na různých chiralních stacionárních fázích (cyklodextriny, makrocyklické glykopeptidy, polysacharidy) a optimalizovat separační podmínky pro modelová farmaka (warfarin, mianserin, Trögerova báze)

Použitá metodika a instrumentace

• Chiralní stacionární fáze: Astec CYCLOBOND, CHIROBIOTIC® (V, V2, T), P-CAP, P-CAP-DP, Cyclofructans, Cellulose DMP
• Mobilní fáze: CH₃CN/MeOH s aditivy HOAc, TEA, NH₄ formát, NH₄ acetát, TFA
• HPLC systém s UV detekcí (230–278 nm) a kompatibilitou s LC-MS
• Průtoky 0,5–1,0 mL/min, kolony 15–25 cm × 4,6 mm, teplota 25 °C

Hlavní výsledky a diskuse

• POM zlepšuje selektivitu a rozlišení enantiomerů (např. warfarin: R s S, resoluce až 3,7; mianserin, Trögerova báze)
• Polysacharidové fáze (Cellulose DMP) dosahují vysoké účinnosti (N_eff až 16 000) a rychlé ekvilibrace bez paměťového efektu
• Nastavení poměru kyselina/základna a typu soli (formát vs. acetát) významně ovlivňuje retenční faktory a selektivitu
• PIM zajišťuje silné iontové interakce pro ionizovatelné sloučeniny, POM využívá multipomocné vazby a dipólové interakce

Přínosy a praktické využití metody

• Snadná příprava vzorku a rychlé přechody mezi módy bez paměťových efektů
• Kompatibilita s LC-MS usnadňuje analýzu biologických a farmaceutických matric
• Možnost škálování metodik pro preparativní chromatografii

Budoucí trendy a možnosti využití

• Vývoj nových derivátů polysacharidových a imobilizovaných CSP
• Aplikace cyklofruktanů, alkaloidových iontových výměnných fází a dalších multipomocných selektorů
• Integrace s UHPLC systémy a automatizovaná optimalizace podmínek pomocí strojového učení

Závěr

Polar organic a polar ionic módy rozšiřují klasické přístupy a poskytují vysoce selektivní, citlivé a LC-MS kompatibilní metody pro enantiomerní analýzu farmaceutik. Díky flexibilnímu nastavení aditiv lze rychle a reprodukovatelně optimalizovat separace bez časově náročné přípravy

Reference

• Lee J.T., Campbell W. HPLC Enantiomeric Separations of Pharmaceuticals Using Polar Organic Mobile Phases. Supelco, Sigma-Aldrich, Bellefonte, PA