A Simple Cleanup Protocol Using a Novel SPE Device for UPLC-MS/MS Analysis of Multi-Residue Veterinary Drugs in Milk
Aplikace | 2015 | WatersInstrumentace
Analýza reziduí veterinárních léčiv v mléce je klíčová pro zabezpečení potravinové bezpečnosti a ochranu spotřebitelů před alergickými reakcemi a rozvojem mikrobiální rezistence. Multi-reziduální přístup umožňuje současné sledování širokého spektra látek, čímž se zvyšuje efektivita a spolehlivost kontrol v potravinářských laboratořích.
Cílem bylo vyvinout rychlou a reprodukovatelnou metodu pro současnou extrakci, čištění a UPLC-MS/MS stanovení 72 veterinárních léčiv z devíti tříd (sulfonamidy, fluoroquinolony, β-agonisté, makrolidy, glukokortikoidy, amfenikoly, β-laktamy, cefalosporiny, tetracykliny) v mléce. Klíčovým prvkem byla aplikace nového SPE zařízení Oasis PRiME HLB ke kompletnímu odstranění tuků a fosfolipidů.
Pro odběr 1 mL mléka byl použit poměr 4:1 ml mléka vůči 0,2 % formiátu v acetonitrilu pro efektivní vysrážení proteinů. Po odstředění se supernatant upravil průtokem přes Oasis PRiME HLB cartridge, odpařil a rekonstituoval v 5 % metanolu.
Metoda dosáhla průměrných procentuálních návratností 50–130 % se střední relativní odchylkou RSD <20 % (n=5) ve všech třech testovaných koncentracích (0,1–10 µg/mL). Optimalizace poměru organického rozpouštědla a obsahu formiové kyseliny vedla k lepšímu srážení proteinů a současně minimalizaci ztráty bazických látek. SPE čištění účinně eliminovalo
matriciální interferenci fosfolipidů a tuků, což prodloužilo životnost kolony i přístroje.
Metoda je jednoduchá, rychlá a vhodná pro rutinní analýzu velkého počtu vzorků mléka. Kombinace proteinové precipitace a pass-through SPE výrazně snižuje čas a náročnost údržby UPLC-MS/MS aparatury. Využití databáze Quanpedia zkracuje vývoj metody a minimalizuje chyby.
Očekává se další automatizace SPE kroků pomocí 96-well formátů, rozšíření metody na další potravinové matice (maso, vejce) a integrace vysokorychlostních UPLC kolonek. Vývoj nových sorbentů a zlepšení databází metod posílí univerzálnost a robustnost multi-reziduálních postupů.
Navržený protokol využívající Oasis PRiME HLB a UPLC-MS/MS umožňuje spolehlivou stanovení širokého spektra veterinárních léčiv v mléce s vynikajícím poměrem rychlosti, přesnosti a jednoduchosti obsluhy. Metoda splňuje požadavky rutinních laboratoří na efektivitu i ekonomičnost.
DeFeng Huang, Kim Van Tran, Michael S. Young (2015) A Simple Cleanup Protocol Using a Novel SPE Device for UPLC-MS/MS Analysis of Multi-Residue Veterinary Drugs in Milk, Waters Application Note 720005414EN
Příprava vzorků, Spotřební materiál, LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
ZaměřeníPotraviny a zemědělství
VýrobceWaters
Souhrn
Význam tématu
Analýza reziduí veterinárních léčiv v mléce je klíčová pro zabezpečení potravinové bezpečnosti a ochranu spotřebitelů před alergickými reakcemi a rozvojem mikrobiální rezistence. Multi-reziduální přístup umožňuje současné sledování širokého spektra látek, čímž se zvyšuje efektivita a spolehlivost kontrol v potravinářských laboratořích.
Cíle a přehled studie / článku
Cílem bylo vyvinout rychlou a reprodukovatelnou metodu pro současnou extrakci, čištění a UPLC-MS/MS stanovení 72 veterinárních léčiv z devíti tříd (sulfonamidy, fluoroquinolony, β-agonisté, makrolidy, glukokortikoidy, amfenikoly, β-laktamy, cefalosporiny, tetracykliny) v mléce. Klíčovým prvkem byla aplikace nového SPE zařízení Oasis PRiME HLB ke kompletnímu odstranění tuků a fosfolipidů.
Použitá metodika a instrumentace
Pro odběr 1 mL mléka byl použit poměr 4:1 ml mléka vůči 0,2 % formiátu v acetonitrilu pro efektivní vysrážení proteinů. Po odstředění se supernatant upravil průtokem přes Oasis PRiME HLB cartridge, odpařil a rekonstituoval v 5 % metanolu.
- UPLC systém: ACQUITY UPLC I-Class s kolonkou BEH C18 1,7 µm, 2,1×100 mm, režim gradientu (2–99 % B).
- MS/MS: Xevo TQ-S, ESI+ a ESI–, optimalizované MRM přechody pro 72 analytů.
- Software: MassLynx v4.1 s databází Quanpedia pro rychlé získání metodických parametrů.
Hlavní výsledky a diskuse
Metoda dosáhla průměrných procentuálních návratností 50–130 % se střední relativní odchylkou RSD <20 % (n=5) ve všech třech testovaných koncentracích (0,1–10 µg/mL). Optimalizace poměru organického rozpouštědla a obsahu formiové kyseliny vedla k lepšímu srážení proteinů a současně minimalizaci ztráty bazických látek. SPE čištění účinně eliminovalo
matriciální interferenci fosfolipidů a tuků, což prodloužilo životnost kolony i přístroje.
Přínosy a praktické využití metody
Metoda je jednoduchá, rychlá a vhodná pro rutinní analýzu velkého počtu vzorků mléka. Kombinace proteinové precipitace a pass-through SPE výrazně snižuje čas a náročnost údržby UPLC-MS/MS aparatury. Využití databáze Quanpedia zkracuje vývoj metody a minimalizuje chyby.
Budoucí trendy a možnosti využití
Očekává se další automatizace SPE kroků pomocí 96-well formátů, rozšíření metody na další potravinové matice (maso, vejce) a integrace vysokorychlostních UPLC kolonek. Vývoj nových sorbentů a zlepšení databází metod posílí univerzálnost a robustnost multi-reziduálních postupů.
Závěr
Navržený protokol využívající Oasis PRiME HLB a UPLC-MS/MS umožňuje spolehlivou stanovení širokého spektra veterinárních léčiv v mléce s vynikajícím poměrem rychlosti, přesnosti a jednoduchosti obsluhy. Metoda splňuje požadavky rutinních laboratoří na efektivitu i ekonomičnost.
Reference
DeFeng Huang, Kim Van Tran, Michael S. Young (2015) A Simple Cleanup Protocol Using a Novel SPE Device for UPLC-MS/MS Analysis of Multi-Residue Veterinary Drugs in Milk, Waters Application Note 720005414EN
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
Podobná PDF
Oasis PRiME HLB Food Applications Notebook
2017|Waters|Příručky
Oasis PRiME HLB Food Applications Notebook SCIENTIST BIOS Michael S. Young, Ph.D. Principal Applications Chemist Waters Corporation Dr. Young is a Principal Chemist and Applications Manager in the Scientific Operations division of Waters Corporation. He and his team of chemists…
Klíčová slova
hlb, hlboasis, oasisesi, esiprime, primecleanup, cleanupveterinary, veterinaryuplc, uplccartridge, cartridgecartridges, cartridgesquechers, quecherspass, passeffective, effectiveextracts, extractsdrugs, drugsspe
Rapid, Simple, and Effective Cleanup of Seafood Extracts Prior to UPLC-MS/MS Multiresidue Veterinary Drugs Analysis
2015|Waters|Aplikace
Rapid, Simple, and Effective Cleanup of Seafood Extracts Prior to UPLC-MS/MS Multiresidue Veterinary Drugs Analysis Michael S Young and Kim Van Tran Waters Corporation, Milford, MA, USA A P P L I C AT I O N B E N…
Klíčová slova
bloq, bloqcleanup, cleanuphlb, hlbshrimp, shrimpveterinary, veterinaryprime, primesalmon, salmonchloramphenicol, chloramphenicolceftiofur, ceftiofurthru, thrucarbadox, carbadoxoxacillin, oxacillinractopamine, ractopamineoasis, oasissalbutamol
Oasis PRiME HLB Cartridge for Cleanup of Infant Formula Extracts Prior to UPLC-MS/MS Multiresidue Veterinary Drugs Analysis
2016|Waters|Aplikace
[ APPLICATION NOTE ] Oasis PRiME HLB Cartridge for Cleanup of Infant Formula Extracts Prior to UPLC-MS/MS Multiresidue Veterinary Drugs Analysis Michael S Young and Kim Van Tran Waters Corporation, Milford, MA, USA APPLICATION BENEFITS ■■ ■■ Efficient, timesaving multiclass/…
Klíčová slova
hlb, hlboasis, oasisprime, primecleanup, cleanupcartridge, cartridgeextracts, extractsinfant, infantveterinary, veterinaryformula, formulaceftiofur, ceftiofurthru, thruuplc, uplccarbadox, carbadoxpass, passmultiresidue
Rapid, Simple, and Effective Clean-up of Bovine Liver Samples Prior to UPLC-MS/MS Multiresidue Veterinary Drugs Analysis
2017|Waters|Aplikace
[ APPLICATION NOTE ] Rapid, Simple, and Effective Clean-up of Bovine Liver Samples Prior to UPLC-MS/MS Multiresidue Veterinary Drugs Analysis Michael S. Young and Kim Van Tran Waters Corporation, Milford, MA, USA APPLICATION BENEFITS ■■ ■■ Efficient, timesaving multiclass/ In…
Klíčová slova
veterinary, veterinaryoasis, oasisprime, primeclean, cleanhlb, hlbuplc, uplcphospholipids, phospholipidsliver, liverdrugs, drugstissue, tissueextracts, extractsacquity, acquitynote, notemultiresidue, multiresidueapplication
