The Use of the ACQUITY QDa Detector for a Selective, Sensitive, and Robust Quantitative Method for a Potential Genotoxic Impurity

Význam tématu

Genotoxické nečistoty mohou měnit DNA a představují riziko vzniku karcinomu. Časná a spolehlivá detekce těchto sloučenin v léčebných látkách je klíčová pro bezpečnost pacientů a dodržení přísných limitů, stanovených na 1,5 µg na den (cca 1 ppm). Standardní LC-UV nebo GC-FID často nedosahují požadované citlivosti, proto je nezbytné využít hmotnostní detekci.

Cíle a přehled studie / článku

Článek představuje kvantitativní metodu pro stanovení potenciální genotoxické nečistoty 1-fenylpiperazinu v aktivní farmaceutické látce (API) s mezí kvantifikace 0,5 ppm pomocí ACQUITY QDa detektoru v kombinaci s UPLC.

Použitá metodika a instrumentace

• UPLC systém: ACQUITY UPLC H-Class s Column Managerem
• Kolona: ACQUITY UPLC HSS C18, 1,8 µm, 2,1×50 mm, teplota 40 °C
• Mobilní fáze: A – 0,05 % kyseliny mravenčí ve vodě; B – 0,05 % kyseliny mravenčí v acetonitrilu; gradient 5→95 % B v 1,5 min; tok 0,5 ml/min; doba analýzy 3 min.
• MS detekce: ACQUITY QDa, ESI pozitivní, SIR m/z 163,1 [M+H]+, kapilární napětí 0,8 kV, teplota sondy 600 °C, kuželové napětí 10 V.
• Software: MassLynx nebo Empower pro řízení a zpracování dat.
• Přepínání toku: pomocí Column Manageru odvádění eluujících API na odpad před detekcí.
• Příprava vzorků: standardy 0,1–10 ppm 1-fenylpiperazinu ve 1 mg/ml API ve 10 % acetonitrilu/90 % vodě.

Hlavní výsledky a diskuse

• Čas retence 1-fenylpiperazinu 1,2 min, API 1,5 min; odpadní tok nastaven na 1,3 min.
• Zkouška matrice: potlačení signálu ~28 % v přítomnosti API.
• Lineárnost kalibrace v rozsahu 0,1–10 ppm, R2 = 0,9986.
• RSD plošných integrálů všech standardů < 4 %.
• Mez kvantifikace LOQ 0,5 ppm (S/N > 10) a mez detekce LOD 0,1 ppm (S/N > 3).
• Analýza tří šarží API prokázala obsah genotoxické nečistoty pod 0,5 ppm.

Přínosy a praktické využití metody

• Vysoká selektivita a citlivost díky SIR na QDa detektoru.
• Rychlá analýza s dobou běhu 3 min pro vysokou propustnost laboratoře.
• Ochrana MS zdroje před kontaminací přepínáním toku.
• Reprodukovatelné výsledky s nízkou variabilitou.
• Kompatibilita s rutiními kancelářskými systémy MassLynx nebo Empower.

Budoucí trendy a možnosti využití

Metoda lze rozšířit na další genotoxické nečistoty, adaptovat pro analýzu hotových lékových forem, integrovat do on-line monitoringu výrobních procesů a využít v automatizovaných QC laboratořích. Kombinace s vysoce rozlišujícími MS technikami může dále zlepšit identifikaci stopových látek.

Závěr

Kombinace ACQUITY UPLC H-Class a QDa detektoru umožňuje robustní, selektivní a citlivou kvantifikaci 1-fenylpiperazinu v API s LOQ 0,5 ppm, což podporuje dodržení přísných limitů genotoxických nečistot v průběhu celého životního cyklu vývoje léčiva.

Reference

není uvedena