Analysis of Genotoxic Impurities of Imatinib Mesylate by LC-MS from Early Development to Routine Monitoring

Význam tématu

Genotoxické nečistoty jsou vysoce reaktivní sloučeniny schopné poškodit DNA a způsobit mutace s možným karcinogenním účinkem. Jejich přesná identifikace a kontrola v léčivých látkách je zásadní pro zajištění kvality produktu a bezpečnosti pacientů podle zásady ALARP.

Cíle a přehled studie

Studie se zaměřuje na vývoj a validaci citlivé a selektivní metody UPLC-MS pro kvantitativní stanovení dvou potenciálních genotoxických nečistot imatinibu mesylátu (MPBA, PNMP) v raných fázích vývoje a pro rutinní monitoring ve fázi QC.

Použitá metodika a instrumentace

• Chromatografie: ACQUITY UPLC H-Class s kolonkou HSS PFP (1,8 µm, 2,1×50 mm), gradient 2,5 mM formiátu amonného v pH 3,0 a acetonitril, 40 °C, 0,7 mL/min.
• Tandem MS: Xevo TQ-S micro, ESI+, MRM s RADAR, IntelliStart pro automatické ladění parametrů.
• Single MS: ACQUITY QDa, ESI+, SIR režim (235,2 a 278,2 Da) pro rutinní měření.
• Softwarové prostředí: MassLynx 4.1 s TargetLynx, Empower 3 pro řízení zařízení a zpracování dat.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda s Xevo TQ-S micro dosahuje LOQ 0,015 ng/mL pro MPBA a 0,1 ng/mL pro PNMP, linearita do 10 ng/mL (r2 ≥ 0,999). Recoveries v rozmezí 90–115 %. QDa metoda vykazuje LOQ 0,26 ng/mL (MPBA) a 1,0 ng/mL (PNMP), linearitu do 100 ng/mL (r2 ≥ 0,997) a recoveries 87–115 %. Režim RADAR dovoluje simultánní záznam full scan pro ověření absence interferencí.

Přínosy a praktické využití metody

Navržené metody umožňují ultracitlivý monitoring genotoxických nečistot v raném vývoji i robustní rutinní kontrolu ve výrobě. Podporují požadavky ICH M7, zajišťují sledování purge levels a dokumentují stabilní splnění limitů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozšíření MS-friendly workflow, integrace automatizovaných a kompliant-ready řešení pro QC, aplikace na další API a vývoj multiplexních metod pro komplexní impurity profiling.

Závěr

Vyvinuté LC-MS postupy nabízejí vysoce citlivé a selektivní stanovení genotoxických nečistot imatinibu mesylátu. Tandemový Xevo TQ-S micro je vhodný pro ultra-nízké koncentrace v raných fázích a ACQUITY QDa pro robustní rutinní analýzu ve QC laboratořích, čímž se zajišťuje kvalita a bezpečnost API.

Reference

1. Liu D.Q., Sun M., Kord A.S. Recent Advances in Trace Analysis of Pharmaceutical Genotoxic Impurities. J Pharm Biomed Anal. 2010;51(5):999–1014.
2. Arava V.R. et al. LC-MS/MS Method for Determination of Potential Genotoxic Impurities in Imatinib Mesylate. Scholars Research Library. 2013;5(6):47–52.
3. Madireddy V., Babu K.S., Narayanareddy P. Stability-indicating, Validated, Fast HPLC Method for Quantification of Two Genotoxic Impurities in Imatinib Mesylate. Glob J Anal Chem. 2011;2(5):198–206.
4. ICH M7 Assessment and Control of DNA Reactive (Mutagenic) Impurities in Pharmaceuticals. ICH, 2014.
5. Waters Corporation. IntelliStart Tutorial. 2017.