Chromatographic Assay of Tolbutamide Using the ACQUITY UPC2 System

Význam tématu

Metoda vysokovýkonné kapalinové chromatografie (HPLC) v normální fázi se dlouhodobě používá k vyšetřování a stanovení farmaceutické látky tolbutamidu. Přechod na superkritickou tekutinovou chromatografii (SFC) přináší významné úspory organických rozpouštědel, zkracuje dobu analýz a podporuje environmentálně šetrné laboratorní postupy. SFC, zejména technologie UPC2, umožňuje zachovat kvalitu dat při výrazném snížení nákladů na analýzu a splnit požadavky farmakopejních metod.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo převést stávající USP kompendiální metodu normální fáze HPLC pro stanovení tolbutamidu na metodu superkritické tekutinové chromatografie pomocí systému ACQUITY UPC2. Hlavními požadavky byly zachování nebo zlepšení kvality analytických výsledků, desetkrát rychlejší doba analýzy a podstatné snížení spotřeby organických rozpouštědel.

Použitá metodika a instrumentace

Analýzy proběhly na systému Waters ACQUITY UPC2 s kolonkou BEH 3,0 × 100 mm, 1,7 µm. Parametry metody:

• Teplota kolony: 50 °C
• Mobilní fáze: 95 % superkritický CO2 a 5 % metanol/IPA (1:1) s 0,2 % TFA
• Průtok: 2,5 mL/min
• Provozní tlak: 120 bar (1740 psi)
• Detekce: UV/PDA při 254 nm

Vzorky obsahovaly tolbutamid a interní standard tolazamid podle USP metodiky.

Hlavní výsledky a diskuse

Nová UPC2 metoda splnila požadavky USP na opakovatelnost retenčních časů (RSD 1,2 % pro tolbutamid, 0,9 % pro tolazamid) a plošnou přesnost (RSD < 0,9 %, n=6). Rozlišení obou látek dosáhlo R ≈ 15. Doba analýzy klesla z ~20 minut (HPLC) na 2 minuty (UPC2). Tvar špiček interního standardu se zlepšil (tailing faktor 1,2 vs. 1,65). UPC2 prokázalo vyšší separační efektivitu odhalením dodatečných malých složek v matrici. Spotřeba rozpouštědel se snížila z ~29 mL hexanu a THFu na 0,5 mL metanol/IPA, což přineslo 140násobnou úsporu nákladů na jeden běh (z 1,40 USD na 0,01 USD).

Přínosy a praktické využití metody

Implementace UPC2 technologie v analytických laboratořích umožňuje:

• Výrazné zkrácení doby analýzy a zvýšení laboratorní produktivity
• Snížení spotřeby a nákladů na organická rozpouštědla
• Splnění farmakopejních kritérií při vyšší separační účinnosti
• Podporu ekologických a bezpečnostních standardů v laboratořích

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozvoj SFC a UPC2 metodiky otevírá nové směry v analytické chemii:

• Rozšíření konverze dalších kompendiálních metod HPLC na SFC
• Integrace s hmotnostní spektrometrií pro vyšší citlivost a selektivitu
• Automatizace a vysokopropustná analýza v QC a výzkumu
• Další snižování environmentálního dopadu laboratoří

Závěr

Studie prokázala, že převod normální fáze HPLC metody pro tolbutamid na UPC2 systém zachovává nebo zlepšuje kvalitu analytických výsledků, zkracuje dobu analýzy desetkrát a minimalizuje spotřebu organických rozpouštědel. Technologie ACQUITY UPC2 tak představuje efektivní, ekonomické a ekologické řešení pro farmaceutické a průmyslové laboratoře.

Reference

1. United States Pharmacopeia. Monograph Tolbutamide, USP.
2. Waters Corporation. Chromatographic Assay of Tolbutamide Using the ACQUITY UPC2 System. Milford, MA, 2012.