A Stress Testing Study of Glimepiride Drug Substance Utilizing UPLC/MS Methodology

Význam tématu

Forced degradation neboli stresové testování je klíčové pro určení stability léčivé látky glimepiridu a identifikaci jejího rozkladného profilu. Použití UPLC/MS technologie umožňuje detekci nízkých hladin degradantů s vysokou chromatografickou rozlišovací schopností a specifikou hmotnostní detekce.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo provést nucenou degradaci glimepiridu za různých podmínek (kyselé, zásadité, oxidační a tepelné), kvantifikovat rychlost rozkladu a charakterizovat vzniklé degradanty pomocí UPLC spojené se single quadrupole MS detektorem.

Použitá metodika a instrumentace

• Příprava roztoků: glimepirid v metanolu (500 µg/mL), následné ředění na 250 µg/mL.
• Stresové podmínky: 0,5 N HCl, 0,5 N NaOH, 4% H₂O₂ a teplota 90 °C.
• Odběry vzorků v časech 0, 30, 60, 90, 120 a 180 minut, ředění na 125 µg/mL.
• UPLC podmínky: ACQUITY UPLC BEH C18 (2,1×50 mm, 1,7 µm), teplota 30 °C, průtok 800 µL/min, gradient 5–95 % acetonitrilu v 5 minutách.
• MS detekce: ACQUITY SQ Detector, ESI+ režim, rozmezí 100–600 m/z.

Hlavní výsledky a diskuse

• System suitability: RSD oblasti 0,9 % a RSD retenční doby 0,0 % pro standard 125 µg/mL.
• Lineární odezva: korelační koeficient R² = 0,99982 v rozsahu 25–250 µg/mL.
• Kinetika rozkladu: acidita k = 1,1×10⁻³ min⁻¹, oxidace k = 1,2×10⁻³ min⁻¹, teplo k = 2,9×10⁻³ min⁻¹, zásaditost k = 4,3×10⁻³ min⁻¹; lineární závislost log % zbývající látky vs. čas.
• Chromatografické profily: nejvíce degradantů za zásaditých podmínek, významné píky A–F; koeluce ve špičce B pro m/z 352,1 a 390,1 Da, potvrzeno z analýzy MS spekter.

Přínosy a praktické využití metody

• Zrychlení analytického workflow díky UPLC separaci a rychlé MS detekci.
• Vysoká citlivost a specifita vedou k důkladné charakterizaci degradantů i v nízkých koncentracích.
• Výsledky usnadní budoucí vývoj stabilitních metod a volbu optimálních podmínek pro kontrolu kvality.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Nasazení vysokorozlišující hmotnostní spektrometrie pro detailnější identifikaci degradantů.
• Automatizace stresových testů a propojení s chemoinformatickými nástroji pro predikci rozkladných drah.
• Integrace metod do přístupu QbD (Quality by Design) pro robustní vývoj analytických postupů.

Závěr

Generic UPLC/MS metoda pro stresové testování glimepiridu prokázala vynikající linearitu, opakovatelnost a schopnost detekovat a charakterizovat široké spektrum degradantů. Data poskytují pevný základ pro další vývoj stabilitních a validačních analytických metod.

Reference

1. Jones MD, Wheaton J, Wojtusik MJ, Plumb RS. A Stress Testing Study of Glimepiride Drug Substance Utilizing UPLC/MS Methodology. Waters Corporation; 2008.