Separation of 10 Green Tea Components on an Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18, 1.9 μm Column

Význam tématu

Analýza katechinů v zeleném čaji má klíčový význam pro posouzení kvality, chuti a zdravotních účinků tohoto nápoje. Polyfenoly, zejména epigallocatechin gallát (EGCG), ovlivňují barvu, hořkost a antioxidační vlastnosti extraktů z Camellia sinensis. Rychlé a spolehlivé rozlišení těchto sloučenin je nezbytné pro potravinářský průmysl, výzkum zdraví a kontrolu kvality.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo ověřit výkon UHPLC kolony Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 (2,1 × 50 mm, 1,9 µm) pro separaci 10 typických komponent zeleného čaje včetně osmi katechinů (čtyři isomerní páry), galové kyseliny a kofeinu. Studie se zaměřila na dosažení úplného baseline rozlišení během co nejkratší doby analýzy.

Použitá metodika a instrumentace

Pro separaci byl použit systém Agilent 1290 Infinity LC upravený na nízkou vnitřní dispozici:

• Binary Pump, autosampler a termoúpravna kolony s ultranízkou disperzí
• Detekce pomocí diode array detektoru při 240 nm
• Kolona Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18, 2,1 × 50 mm, 1,9 µm
• Mobilní fáze A: 0,2 % kyseliny mravenčí ve vodě; B: acetonitril
• Gradient 5–16 % B během 7 min
  Průtok: 0,5 mL/min, teplota kolony 30 °C, injekční objem 1 µL, vzorky 0,06 mg/mL každé sloučeniny

Hlavní výsledky a diskuse

Ve stanovených podmínkách došlo ke kvalitnímu baseline rozlišení všech deseti analytů během 7 min s minimálním rozlišením 2,2. Výkonná superficially porous částice o velikosti 1,9 µm poskytla vysokou efektivitu i při krátké kolonce 50 mm, což umožnilo rozlišení čtyř isomerních párů katechinů navzdory jejich strukturální podobnosti. Maximální provozní tlak dosahoval až 436 bar.

Přínosy a praktické využití metody

Rychlá UHPLC metoda nabízí:

• Významné zkrácení doby analýzy, vhodné pro rutinní kontroly kvality
• Vysokou separační sílu pro složité polyfenolové vzorky
• Možnost integrace do kontrolních pracovišť v potravinářském i farmaceutickém průmyslu

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření této metody o:

• spojení s hmotnostní spektrometrií pro identifikaci neznámých profilů polyfenolů
• miniaturizaci a mikrofluidní systémy pro snížení spotřeby rozpouštědel
• automatizovanou přípravu vzorků pro vysokovýkonnou rutinní analýzu

Závěr

Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 (1,9 µm) prokázala výjimečnou účinnost a selektivitu pro separaci deseti klíčových zeleno­čajových komponent během pouhých 7 min. Metoda je ideální pro rychlou kontrolu kvality a výzkumné aplikace zaměřené na polyfenoly.

Reference

• 1. A. Mack, W. Long. Rapid Tea Analysis on Poroshell 120 SB-C18 with LC/MS. Agilent Technologies Application Note, publication number 5990-7824EN, 2011.
• 2. T. Yoshida, R. Majors, H. Kumagai. High-Speed Analysis using Rapid Resolution Liquid Chromatography on ZORBAX column packed 1.8 µm Particles. J. Sep. Sci. 2006, 29(16), 2421-2432.