Method Transfer from an Agilent 1260 Infinity LC to an Agilent 1260 Infinity II LC

Význam tématu

Instrument-to-instrument přenos metod je zásadní pro udržení validovaných analytických postupů v laboratorních provozech. Přechod na novější chromatografické systémy vyžaduje ověření shodného chování analýzy, zejména v regulovaných odvětvích, jako je farmaceutický průmysl, kde je nutné zajistit konzistentní kvalitu a bezpečnost léčiv.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo demonstrovat beze změn přenos analytické metody pro stanovení paracetamolu a jeho nečistot z Agilent 1260 Infinity LC na Agilent 1260 Infinity II LC a prokázat ekvivalenci výsledků v retenčních časech, rozlišení a přesnosti. Dalším záměrem bylo ukázat možnosti zkrácení doby analýzy pomocí vyššího průtoku.

Použitá metodika a instrumentace

• Agilent 1260 Infinity LC a Agilent 1260 Infinity II LC: quaternární pumpy, autosamplery s chlazením, termostatické sloupcové komory, DAD detektory
• Kolona: InfinityLab Poroshell 120 EC-C18, 4,6 × 100 mm, 2,7 µm
• Mobilní fáze A: voda s 0,1 % TFA; B: acetonitril s 0,09 % TFA
• Gradient: 5 % B → 70 % B v 16 min (následná prodleva 6,7 min); při zvýšeném průtoku na 2,5 mL/min zkráceno na 9,6 min (prodleva 4 min)
• Průtok 1,5 mL/min při 30 °C (zvýšený režim 2,5 mL/min), detekce při 270 nm (referenční 395 nm)
• Vzorky: směs paracetamolu a nečistot A, B, F, H, I, J, K (50 µg/mL) v roztoku voda/acetonitril (95:5) s 0,1 % TFA

Hlavní výsledky a diskuse

• Retenční časy obou systémů se lišily o méně než 1 % (RSD 0,01–0,05 %) a rozlišení mezi vrcholy zůstalo srovnatelné (R 3,9–38)
• Přesnost výpočtu plochy vrcholů byla u 1260 Infinity II LC o 10–25 % lepší než u původního systému
• Zvýšení průtoku na 2,5 mL/min vedlo ke zkrácení doby analýzy o 40 % za mírného poklesu rozlišení, přičemž retenční pořadí nečistot zůstalo zachováno

Přínosy a praktické využití metody

Důkaz ekvivalence metod usnadňuje upgrade instrumentace bez nutnosti rozsáhlé re-validace, což šetří čas i náklady v QA/QC laboratořích. Vysoký průtok přináší úsporu rozpouštědel a urychlení rutinních analýz při zachování analytické kvality dat.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření UHPLC separací s vyššími tlaky pro ještě rychlejší a selektivnější analýzy
• Integrace pokročilého softwaru pro automatizované vyhodnocení a správu metod
• Využití strojového učení k optimalizaci parametrů separace
• Možnost přenosu metod na další generace chromatografů a multimodální platformy

Závěr

Studie potvrdila, že přenos metody pro analýzu paracetamolu a jeho nečistot mezi Agilent 1260 Infinity LC a Agilent 1260 Infinity II LC je bezproblémový. Ekvivalence retenčních časů, rozlišení i přesnosti umožňuje efektivní upgrade laboratoří, přičemž vyšší průtok poskytuje další výhodu v podobě rychlejších analýz.

Reference

1. Agilent Technologies. Agilent 1290 Infinity with ISET, Uživatelský manuál, G4220-90314, 2015
2. International Conference on Harmonization. ICH Q3A(R2): Impurities in New Drug Substances, 2006
3. Bosch R. et al. Determination of paracetamol: Historical evolution, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 42 (2006), 291–321