HPLC to UHPLC Transfer of USP Method for Amlodipine Besylate Using the Agilent 1290 Infinity II LC

Význam tématu

Efektivní a spolehlivé stanovení léčivých látek je klíčové pro zajištění kvality generických i originálních farmaceutik. Přechod z konvenční HPLC na ultrarychlé UHPLC umožňuje zkrácení doby analýzy, snížení spotřeby mobilní fáze a zvýšení laboratorní produktivity bez nutnosti rozsáhlé revalidace.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo přenést oficiální USP metodiku pro stanovení amlodipinu besylátu z HPLC na technologii UHPLC na přístroji Agilent 1290 Infinity II. Změny ve velikosti kolony, průtoku a dalších parametrech byly provedeny v souladu s USP pokyny tak, aby nebylo nutné provádět kompletní revalidaci metody. Nové podmínky byly porovnány s původními USP HPLC parametry.

Použitá metodika

Analýza probíhala izokraticky na reverzní fázi s mobilní fází methanol–acetonitril–fosfátový pufr (35/15/50, pH 3,0). Pufr se připravuje přidáním 7 mL triethylaminu do vody, úpravou na pH 3,0 fosforečnou kyselinou a doplněním na objem. Standardní a vzorkové roztoky obsahují amlodipin v koncentraci 0,02 mg/mL. Vzorek se připravuje rozpuštěním tablety v mobilní fázi a filtrací.

Použitá instrumentace

• Agilent 1290 Infinity II High-Speed Pump (G7120A) s ultralow dispersion kitem
• Agilent 1290 Infinity Multisampler (G7167B)
• Agilent 1290 Infinity II Multicolumn Thermostat (G7116B)
• Agilent 1290 Infinity II Diode Array Detector (G7117B), 237 nm
• Kolony Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 3×150 mm, 5 µm a RRHD 2.1×50 mm, 1.8 µm

Hlavní výsledky a diskuse

Obě metody splnily systémové kritérium selektivity i opakovatelnosti: rozlišení nad 9,7, symetrie vrcholu pod 1,4 a RSD plochy menší než 0,1 %. HPLC analýza trvala 23 min při průtoku 0,6 mL/min, UHPLC pouze 3,1 min při 0,8 mL/min. Spotřeba mobilní fáze se snížila z 13,8 mL na 2,5 mL na analýzu. Lineární závislost ukázala R² 0,99999 pro obě metody. Stabilita UHPLC byla potvrzena 160 opakovanými injekcemi se stálým tlakem 730–740 bar.

Přínosy a praktické využití metody

Díky výraznému zkrácení doby analýzy a úspoře rozpouštědel se laboratorní kapacity mohou zvýšit více než pětinásobně. Metoda je vhodná pro rutinní kontrolu kvality generických tablet s amlodipinem a další farmaceutické aplikace, kde je klíčová vysoká propustnost.

Budoucí trendy a možnosti využití

Dalším krokem je adaptace dalších kompendiálních metod na UHPLC, využití superficially porous částic pro optimalizaci separace a zavádění online automatizace pro kontinuální monitoring kvality. Vývoj nových detektorů a modulů pro ještě vyšší frekvenci dat může dále zlepšit výkon a flexibilitu analytických laboratoří.

Závěr

Přenos USP HPLC metody pro amlodipin besylát na UHPLC na přístroji Agilent 1290 Infinity II byl proveden rychle a v souladu s kompendiálními předpisy. Nová UHPLC metoda dosahuje srovnatelné kvality výsledků s výrazně vyšší efektivitou a úsporou nákladů.

Reference

• USP Monograph, Amlodipine Besylate Tablets, The United States Pharmacopeial Convention, February 1, 2011.
• First Supplement to USP 37–NF 32, The United States Pharmacopeial Convention, August 1, 2014.