Improve Your European Pharmacopoeia (Ph. Eur.) and United States (USP) Monographs

Význam tématu

V oblasti farmaceutické kontroly jakosti je klíčové rychlé a spolehlivé stanovení obsahu účinných látek a jejich nečistot podle monografií Evropské farmakopeje (Ph. Eur.) a United States Pharmacopeia (USP). S tím, jak roste potřeba vysokopropustných laboratoří a testování generických léčiv, se zvyšuje tlak na zkrácení analytických časů bez kompromisů v kvalitě separace a splnění přísných systémových kritérií.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo demonstrovat, jak lze využít moderní keramikou obalené (core–shell) kapalinové chromatografické sloupce Kinetex® k optimalizaci stávajících monografií Ph. Eur. a USP. Studie uvádí srovnání původních metod z monografií s modifikovanými postupy, které:

• zkracují dobu analýzy až o 50 % či více,
• zvyšují chromatografické rozlišení (Rs) klíčových nečistot,
• zůstávají v rámci povolených úprav dle Ph. Eur. kap. 2.2.46 a USP <621>.

Použitá metodika a instrumentace

Ve všech případech byla zachována základní fáze pufr–organický rozpouštěč dle monografií. Pro rychlejší a ostřejší separace byly zkoušeny následující sloupce: Kinetex® Core–Shell C18, C8 a XB-C18 s částicemi 2.6 až 5 µm. Typická instrumentace zahrnovala:

• HPLC systém s UV/Vis detektorem (nastaveným na 205–295 nm dle látky),
• Automatický inokulátor s objemem injekce 1–50 µL,
• Kromatografická kolona v rozměrech 100–250 × 2.1–4.6 mm,
• Mobilní fáze podle Ph. Eur. a USP, přizpůsobené v rámci povolených ±10–30 % úprav pH a složení.

Hlavní výsledky a diskuse

Při použití keramikou obalených částic se u testovaných monografií dosáhlo:

• Allopurinol: zkrácení doby eluce z ~10 min na ~5 min při nárůstu rozlišení Rs z 1.4 na ~3.7;
• Amlodipin: snížení run time o více než 4 min s rozlišením mezipíků Rs >13;
• Atenolol: zkrácení z 33 min na ~12 min, zvýšení Rs z 2.0 na 3.7;
• Ostatní látky (Carvedilol, Clarithromycin, Fluconazole, atd.): obdobné zkrácení až o desítky minut a významné zvýšení rozlišení.

Přínosy a praktické využití metody

Nasazení core–shell sloupců přináší:

• Výrazné zvýšení laboratorní propustnosti a snížení nákladů na rozpouštědla,
• Zachování nebo zlepšení splnění systémových kritérií (rozlišení, opakovatelnost),
• Kompatibilitu s existujícími farmakopejními metodami bez nutnosti měnit základní detektory či přidávat složitá zařízení.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj v oblasti UHPLC, integrace víceřadých (multiplexních) sloupců, rozšíření využití zelených rozpouštědel a pokročilá softwarová optimalizace metod pomocí strojového učení. Vzhledem k rostoucím požadavkům na rychlost a efektivitu budou core–shell technologie a multimodální stacionární fáze hrát klíčovou roli i v dalších farmaceutických analýzách.

Závěr

Studie ukázala, že keramikou obalené (core–shell) chromatografické sloupce Kinetex® umožňují podstatné zkrácení doby analýzy a zvýšení rozlišení při zachování plné shody s požadavky Ph. Eur. a USP monografií. Tento přístup nabízí efektivní řešení pro laboratoře, které kladou důraz na vysokou propustnost a spolehlivost výsledků.

Reference