Analysis of Unstable Compounds Using Online SFE-SFC

Význam tématu

Superkritické kapaliny, zejména CO2, nabízejí unikátní vlastnosti nízké viskozity, vysoké difuzivity a rozpustnosti. Online propojení superkritické extrakce (SFE) a superkritické fluidní chromatografie (SFC) umožňuje automatizovanou, uzavřenou analýzu látek citlivých na oxidaci, světlo či vlhkost. Tato metoda významně zkracuje dobu přípravy vzorku a zvyšuje citlivost díky eliminaci ředění vzorku.

Cíle a přehled studie

Cílem článku je představit systém Nexera UC pro online SFE-SFC analýzu nestabilních sloučenin a demonstrovat jeho výhody na modelové aplikaci stanovení redukované koenzymu Q10 v doplňcích stravy. Studie porovnává klasickou extrakci rozpouštědlem následovanou SFC s integrovaným online přístupem.

Použitá metodika a instrumentace

Online SFE-SFC kombinuje dvě fáze:

• Statická extrakce: extrakční kapalina přiváděna do uzavřené komory, vzorek se nasycuje při zastaveném průtoku.
• Dynamická extrakce: kontinuální průtok superkritického CO2 s modifikátorem (MeOH) skrz vzorek.

Pro separaci a detekci se používá SFC kolona Shim-pack UC-RP (150×4,6 mm, 3 μm), teplota 40 °C, mobilní fáze CO2/MeOH, detekce UV-VIS při 220 nm.

Hlavní výsledky a diskuse

Klasická extrakce ethanolem následovaná SFC prokázala částečnou oxidaci redukované koenzymu Q10. Naproti tomu online SFE-SFC zachovala koenzym Q10 v redukované formě po celou dobu extrakce, separace i detekce. Chromatogramy ukázaly jasné vrcholy redukované a oxidované formy bez vzájemné interference.

Přínosy a praktické využití metody

• Minimální manipulace se vzorkem a uzavřený systém zabraňující oxidaci a degradaci.
• Zrychlení analytického procesu díky automatizaci a integraci extrakce s chromatografií.
• Vysoká citlivost díky eliminaci ředění a přímému přenosu extraktu do kolony.

Budoucí trendy a možnosti využití

Online SFE-SFC otevírá možnosti pro analýzu dalších nestabilních bioaktivních sloučenin, jako jsou karotenoidy, vitaminy či farmaceutické deriváty. Dalším krokem je rozšíření modulů detekce (MS, FLD) pro zvýšení selektivity a citlivosti. Integrace s robotizovanými systémy umožní vyšší průchodnost a škálovatelnost analýz.

Závěr

Systém Nexera UC pro online SFE-SFC nabízí robustní řešení pro analýzu látek náchylných k oxidaci a hydrolytickému štěpení. Integrace extrakce a chromatografie v jednom uzavřeném workflow minimalizuje ztráty analytu a zkracuje dobu analýzy, což představuje významný pokrok v oblasti analytické chemie.

Reference

1. Application No. L496 “Analysis of Unstable Compounds Using Online SFE-SFC”, Shimadzu Corporation, First Edition Oct. 2015.