Comprehensive Two-Dimensional Analysis of Polyphenols in Red Wine Using Nexera-e Coupled with SPD-M30A

Význam tématu

Analýza polyfenolů v červeném víně je klíčová vzhledem k antioxidačním vlastnostem těchto látek a jejich pozitivnímu vlivu na lidské zdraví. Jednorozměrná HPLC často nedokáže dostatečně oddělit široké spektrum koexistujících fenolických sloučenin, což omezuje přesnost kvantifikace. Komplexní dvourozměrná chromatografie nabízí efektivní řešení pro oddělení a analýzu těchto metabolitů v komplexních matricích, jako je víno.

Cíle a přehled studie / článku

Studie se zaměřila na vývoj a optimalizaci metody komprehensivní dvourozměrné kapalinové chromatografie (2D-LC) pro souběžné stanovení ethylgalátu, tyrosolu a rutinu v červeném víně. Využit byl systém Nexera-e spojený s detektorem SPD-M30A (PDA), který umožňuje volbu optimálních vlnových délek pro jednotlivé analyty.

Použitá metodika

První dimenze: reverzní fází na sloupci Shim-pack XR-ODS II (100×1,5 mm, 2,2 μm) za neutrálního pufru (pH 6,8). Gradientní eluce s acetonitrilem (5–90 % B) při průtoku 0,05 mL/min.
Druhá dimenze: rychlá gradientní eluce na sloupci Kinetex XB-C18 (50×3 mm, 2,6 μm) v kyselém pufru (pH 2,6) při průtoku 2 mL/min; modulace každou minutu.
Kalibrační křivky byly sestaveny pro koncentrace 5–250 mg/L.

Použitá instrumentace

• Chromatografický systém Nexera-e
• Sloupce: Shim-pack XR-ODS II, Kinetex XB-C18
• Detektor SPD-M30A photodiode array (vlnové délky: 270 nm, 278 nm, 354 nm)
• Software ChromSquare pro generování 2D konturových grafů

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla téměř úplného rozlišení sledovaných polyfenolů v rámci 2D chromatogramu. Opakovatelnost zadržovacích časů měla relativní standardní odchylku (RSD) 0,7 % pro total time a 0,16–0,52 % pro 2D dimenzi. Celkové R2 kalibračních křivek překročily 0,9988. Koncentrace analyzovaných vzorků: tyrosol ~101,5 mg/L, ethylgalát ~15,1 mg/L, rutin ~14,2 mg/L.

Přínosy a praktické využití metody

• Vysoká selektivita a citlivost pro komplexní vzorky
• Možnost simultánního stanovení více polyfenolů v jediném běhu
• Rychlá analýza díky automatické modulaci a optimalizaci gradientu
• Uplatnění v potravinářském výzkumu, QC laboratořích a zdravotnických studiích

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se integrace 2D-LC s hmotnostní spektrometrií pro identifikaci dosud neznámých polyfenolů, vývoj rychlejších modulací a miniaturizovaných sloupců. Dále se předpokládá automatizace přípravy vzorků a online vzorkovací systémy pro vysokou propustnost analýz.

Závěr

Komprehensivní dvourozměrná kapalinová chromatografie na systému Nexera-e s detektorem SPD-M30A prokázala vynikající schopnost separace a kvantifikace klíčových polyfenolů v červeném víně. Metoda poskytuje vysokou opakovatelnost, linearitu a je vhodná pro rutinní i výzkumné aplikace.

Reference

V textu nebyly explicitně uvedeny literární zdroje.