Determination of Chlorogenic Acid in Coffee Products According to DIN 10767

Význam tématu

Chlorogenní kyseliny jsou klíčovou složkou kávy a ovlivňují jak kvalitu chuti, tak zdravotní vlastnosti nápoje. Přesná analýza obsahu těchto polyfenolů je důležitá pro kontrolu kvality, dodržení norem a hodnocení antioxidantního potenciálu kávových výrobků.

Cíle a přehled studie / článku

Studie popisuje stanovení chlorogenní kyseliny v pražené kávě podle normy DIN 10767. Cílem bylo ověřit linearitu, přesnost retence i plochy, detekční limity a vliv různých chromatografických kolon na výkon metody.

Použitá metodika a instrumentace

• Instrumentace: Agilent 1260 Infinity LC System s binárním čerpadlem, degaserem, autosamplerem s termostatem, termostatovanou kolónou a diodovým detektorem DAD.
• Kolony: ZORBAX Eclipse Plus C18 (4,6×150 mm, 5 μm), Poroshell 120 EC-C18 (3,0×150 mm a 3,0×50 mm, 2,7 μm).
• Mobilní fáze: voda s 1 % kyseliny fosforečné (A) a acetonitril (B), gradientní eluce, různé průtokové režimy (1,0, 0,43–1,72 mL/min).
• Příprava vzorku: extrakce 2 g mleté kávy směsí methanol/voda (50:50) v Soxhletově extraktoru, filtrace a ředění.

Hlavní výsledky a diskuse

• Lineární kalibrace 0,156–20 mg/L pro 3-O-cafeylchinovou kyselinu s korelačním koeficientem ≥0,99998.
• LOD 0,03 mg/L, LOQ 0,09 mg/L pro standardní kolonu; při použití solvent saver kolony LOD 0,015 mg/L, LOQ 0,05 mg/L.
• Přesnost retence <0,3 % RSD, přesnost plochy <0,3 % RSD, přesnost koncentrace 0,12 % a 0,21 % RSD (12 mg/L).
• Žádný carry-over po špičkové koncentraci 20 mg/L.
• Reálný vzorek: obsah n-chlorogenické kyseliny 1,19 g/100 g, celkový obsah všech izomerů 2,61 g/100 g kávy.
• Zkrácení kolony na 50 mm a zvýšení průtoku umožnilo snížit dobu analýzy až na 3,25 min při zachování separačního výkonu.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda poskytuje spolehlivou kvantifikaci chlorogenních kyselin v souladu s normou DIN 10767. Nízké detekční limity a možnost snížení spotřeby rozpouštědel usnadňují rutinní kontrolu kvality kávy v laboratoři.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další zkracování času analýzy zavedením rychlých kol s ultračistými fázemi a vyššími průtoky. Integrace hmotnostní detekce a automatizovaných workflow podpoří rozsáhlé screeningové studie a monitorování environmentálních a zdravotních aspektů.

Závěr

Potvrzená metoda podle DIN 10767 pro stanovení chlorogenní kyseliny v kávě ukazuje vynikající linearitu, přesnost i citlivost. Volba solvent saver kolony s nižší vnitřní kapilárou umožňuje úsporu rozpouštědel bez ztráty výkonu. Modernizované chromatografické přístupy zvyšují produktivitu analýzy.

Reference

1. European Food Safety Authority Scientific opinion of the substantiation of health claims related to coffee including chlorogenic acids from coffee EFSA Journal 2011 9(4)2057
2. Wikipedia Chlorogenic acid entry
3. DIN 10767 Coffee and coffee products Determination of chlorogenic acids by HPLC 1992
4. DIN ISO 20481 Coffee and coffee products Determination of caffeine content by HPLC 2008
5. Agilent Application Note 5991-2851EN Determination of chlorogenic acid
6. DIN 10779 Coffee and coffee products Determination of 16-O-methyl cafestol content by HPLC 2011
7. Agilent Application Note 5991-2853EN Analysis of cafestol isomers
8. DIN EN 14132 Foodstuffs Determination of ochratoxin A by HPLC with immunoaffinity cleanup 2009
9. Agilent Application Note 5991-2854EN Mycotoxin analysis in coffee
10. Herrmann K Fortschritte der Chemie organischer Naturstoffe Bd 35 Springer 1978 73–132