Exploring Extra Sensitivity Using ionKey/MS with the Xevo G2-XS QTof HRMS for Small Molecule Pharmaceutical Analysis in Human Plasma
Aplikace | 2016 | WatersInstrumentace
Vysoká citlivost a přesnost kvantifikace malých farmaceutických molekul v biologických matricích je zásadní pro vývoj nových léčiv a monitorování farmakokinetiky. Spojení mikrofluidní separace s vysokorozlišovací hmotnostní spektrometrií (HRMS) umožňuje snížit spotřebu rozpouštědel, zlepšit poměr signál/šum a podpořit rutinní bioanalytické workflow.
Článek popisuje hodnocení platformy ionKey/MS kombinované s Xevo G2-XS QTof HRMS pro malomolekulární analýzu v lidské plazmě. Studie zahrnuje tři režimy: přímou injekci s Tof-MRM, jednostupňové trap-and-elute a dvoupumpové trap-and-elute, s cílem maximalizovat citlivost, rozšířit dynamický rozsah a ochránit separační zařízení.
Platformu tvořily:
Direct injection (1 µL) s Tof-MRM dosáhla LOQ 0,8–3 pg/mL (0,8–3 fg on-column), R2 > 0,99 a S/N 9–79. Jednostupňové trap-and-elute odstranilo fronting u raně elujících látek při injekcích 5 µL. Dvoupumpové řešení umožnilo bezproblémové injekce až 20 µL, s lineární odezvou (R2 > 0,995) a ochranou iKey Separation Device díky odvádění lipofilních matrikových složek do odpadu.
Platforma nabízí:
Další směřování zahrnuje rozšíření aplikací v DMPK, metabolomice a toxikologie, integraci s online automatizací vzorků, rozvoj mikrofluidických separací s vyšším rozlišením a adaptaci na rostoucí požadavky high-throughput screening.
ionKey/MS v kombinaci s Xevo G2-XS QTof HRMS představuje robustní a citlivou platformu pro rutinní bioanalýzu malých molekul v plazmě. Technologie nabízí vynikající limity detekce, široký dynamický rozsah, značné úspory rozpouštědel a ochranu separačního zařízení.
LC/TOF, LC/HRMS, LC/MS, LC/MS/MS
ZaměřeníKlinická analýza
VýrobceWaters
Souhrn
Význam tématu
Vysoká citlivost a přesnost kvantifikace malých farmaceutických molekul v biologických matricích je zásadní pro vývoj nových léčiv a monitorování farmakokinetiky. Spojení mikrofluidní separace s vysokorozlišovací hmotnostní spektrometrií (HRMS) umožňuje snížit spotřebu rozpouštědel, zlepšit poměr signál/šum a podpořit rutinní bioanalytické workflow.
Cíle a přehled studie / článku
Článek popisuje hodnocení platformy ionKey/MS kombinované s Xevo G2-XS QTof HRMS pro malomolekulární analýzu v lidské plazmě. Studie zahrnuje tři režimy: přímou injekci s Tof-MRM, jednostupňové trap-and-elute a dvoupumpové trap-and-elute, s cílem maximalizovat citlivost, rozšířit dynamický rozsah a ochránit separační zařízení.
Použitá metodika a instrumentace
Platformu tvořily:
- ACQUITY UPLC M-Class System
- ionKey/MS System s iKey HSS T3 Separation Device (150 µm × 50 mm, 1.8 µm)
- Trapovací kolona ACQUITY UPLC M-Class HSS T3 (300 µm × 50 mm, 5 µm)
- Xevo G2-XS QTof HRMS s ESI+ módem (50–1 200 m/z, 30 000 FWHM)
- MassLynx v.4.1 s TargetLynx Application Manager
Hlavní výsledky a diskuse
Direct injection (1 µL) s Tof-MRM dosáhla LOQ 0,8–3 pg/mL (0,8–3 fg on-column), R2 > 0,99 a S/N 9–79. Jednostupňové trap-and-elute odstranilo fronting u raně elujících látek při injekcích 5 µL. Dvoupumpové řešení umožnilo bezproblémové injekce až 20 µL, s lineární odezvou (R2 > 0,995) a ochranou iKey Separation Device díky odvádění lipofilních matrikových složek do odpadu.
Přínosy a praktické využití metody
Platforma nabízí:
- Sub-fg citlivost a široký lineární dynamický rozsah
- Úsporu rozpouštědel >90 % oproti analytické LC
- Modulární konfigurace pro různé režimy analýzy
- Zvýšenou propustnost a ochranu separačního systému
- Jednoduché přepínání mezi kvalifikativními a kvantitativními módy
Budoucí trendy a možnosti využití
Další směřování zahrnuje rozšíření aplikací v DMPK, metabolomice a toxikologie, integraci s online automatizací vzorků, rozvoj mikrofluidických separací s vyšším rozlišením a adaptaci na rostoucí požadavky high-throughput screening.
Závěr
ionKey/MS v kombinaci s Xevo G2-XS QTof HRMS představuje robustní a citlivou platformu pro rutinní bioanalýzu malých molekul v plazmě. Technologie nabízí vynikající limity detekce, široký dynamický rozsah, značné úspory rozpouštědel a ochranu separačního zařízení.
Reference
- Yun W. Alelyunas, M. D. Wrona, J. Murphy, et al. Quantitation by High Resolution Mass Spectrometry Using Target Enhancement and Tof-MRM in Human Plasma. Waters Application Note 720005182EN, 2014
- L. R. Snyder, J. W. Dolan. High-Performance Gradient Elution: The Practical Application of the Linear-Solvent-Strength Model. Wiley, 2006
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
Podobná PDF
High Sensitivity Bioanalysis for Small Drug-Like Compounds in Human Plasma using Microflow LC and High Resolution Mass Spectrometry
2015|Waters|Postery
High Sensitivity Bioanalysis for Small Drug-Like Compounds in Human Plasma using Microflow LC and High Resolution Mass Spectrometry Yun Wang Alelyunas, Mark Wrona, Jim Murphy, Kelly Doering Waters Corporation, Milford, Massachusetts, USA Abstract Introduction. Bioanalysis to support PK-PD studies and…
Klíčová slova
microflow, microflowclopidogrel, clopidogrelmicrofluidics, microfluidicsbuspirone, buspironeionkey, ionkeyplasma, plasmahuman, humanleft, leftelute, elutepropranolol, propranololclopi, clopitrap, trapdiagram, diagramhrms, hrmspump
ionkey/MS - APPLICATION COMPENDIUM
2016|Waters|Příručky
[ ion key / MS ] APPLICATION COMPENDIUM Dear Colleague, The 2014 introduction of the ionKey/MS System was a turning point for LC-MS. The promise of increased levels of sensitivity from smaller sample sizes was finally a reality. We were…
Klíčová slova
ionkey, ionkeyikey, ikeyuplc, uplcsystem, systemplasma, plasmasensitivity, sensitivityion, ionhuman, humanusing, usingmobility, mobilityarea, areaseparation, separationassay, assaydevice, devicequantification
PEPTIDE AND PROTEIN BIOANALYSIS
2016|Waters|Příručky
[ APPLICATION NOTEBOOK ] PEPTIDE AND PROTEIN BIOANALYSIS [ OUR SCIENTISTS ] Yun Alelyunas, PhD Before coming to Waters in 2012, Yun Alelyunas was a principal scientist and team leader at AstraZeneca for 20 years where she was involved in…
Klíčová slova
ionkey, ionkeypeptide, peptideplasma, plasmaquantification, quantificationhuman, humanarea, areaxevo, xevoinsulin, insulinuplc, uplcprotein, proteinmrm, mrmpeptides, peptidesproteinworks, proteinworksantibody, antibodyusing
Determination of Mass Resolution, Sensitivity, and Linear Dynamic Range of Small Molecules in Human Plasma Using ACQUITY UPLC I-Class and Xevo G2-S QTof
2013|Waters|Aplikace
Determination of Mass Resolution, Sensitivity, and Linear Dynamic Range of Small Molecules in Human Plasma Using ACQUITY UPLC I-Class and Xevo G2-S QTof Yun Alelyunas, Craig Dorschel, Mark Wrona, and Paul Rainville G OA L The sensitivity of the high…
Klíčová slova
buspirone, buspironetqs, tqslinear, linearclopidogrel, clopidogreluplc, uplcdynamic, dynamiclod, loddeviation, deviationacquity, acquityrange, rangeqqq, qqqclass, classxevo, xevoseven, sevenduplication
