Rapid Detection of 7 Illegal Veterinary Additives in Animal Feed Using Oasis PRiME HLB Clean-up and UPLC-MS/MS

Význam tématu

Nelegální přidávání veterinárních léčiv do krmiv hrálo dlouhodobě významnou roli při skandálech z hlediska veřejného zdraví a potravinové bezpečnosti. Substituty clenbuterolu, jako olaquindox, neomycin sulfát nebo sulfaquinoxalin, mohou podporovat růst zvířat, ale zároveň se hromadí v tkáních a představují riziko pro spotřebitele.

Cíle a přehled studie / článku

Výzkum si kladl za cíl vyvinout rychlou, citlivou a jednoduše implementovatelnou metodiku pro simultánní detekci sedmi zakázaných veterinárních látek v krmivu:

• Olaquindox
• Sulfaquinoxalin
• Trimethoprim
• Aminophyllin
• Diprophyllin
• Dexamethason
• Atropin

Studie představuje protokol extrakce a čistění založený na rychlém průtoku SPE kartridže Oasis PRiME HLB a kvantifikaci pomocí UPLC-MS/MS.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda kombinuje následující kroky:

• Vážená vzorka (1 g) krmiva extrahována 10 mL směsi 80 % acetonitril / 20 % vody, odstředění.
• Pass-through SPE clean-up pomocí Oasis PRiME HLB kartridže: odpad první frakce, sběr druhé, ředění 1:3 vodou.
• Analýza UPLC-MS/MS: 2 µL injekce, kolona HSS T3 (2.1×100 mm, 1.8 µm), gradientní eluce (0.1 % kyselina mravenčí ve vodě vs. methanolu), ESI+ a MRM sledování specifických přechodů iontů.

Použitá instrumentace

• Waters ACQUITY UPLC I-Class System
• Waters Xevo TQ-S micro Mass Spectrometer
• Oasis PRiME HLB 6 cc, 200 mg kartridže

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala:

• Obnovy 70,6 až 112 % pro všechny analyty na třech úrovních nasycení.
• Preciznost (RSD) do 8,8 % u nízkých koncentrací a do 4,2 % u středních a vysokých.
• Lineární rozsahy s korelačními koeficienty R2 ≥ 0,9991.
• Maticové efekty v rozmezí ±16 %, kompenzované maticově korelovanou kalibrací.
• Detekce olaquindoxu v reálných vzorcích drůbežího a vepřového krmiva v koncentracích 1,9–18 mg/kg.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• Rychlou a jednoduchou přípravu vzorku bez nutnosti kondicionace SPE kartridže.
• Vysokou citlivost a robustnost UPLC-MS/MS analýzy.
• Splnění regulačních požadavků na limity detekce a kvantifikace.
• Možnost širokého nasazení v kontrolních laboratořích potravinové bezpečnosti i v průmyslových QA/QC provozech.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření metody na další skupiny kontaminantů (například farmaka, pesticidy a mykotoxiny), automatizace přípravy vzorků, miniaturizace SPE postupů a integrace do vysokopropustných platforem pro komplexní monitorování krmiv a potravin.

Závěr

Vyvinutá metodika založená na Oasis PRiME HLB clean-up a UPLC-MS/MS nabízí vyvážený poměr rychlosti, citlivosti a spolehlivosti pro detekci sedmi nelegálních veterinárních aditiv v krmivech. Splňuje přísné požadavky regulatorních norem a je vhodná pro rutinní aplikaci.

Reference

1. Announcement No. 2086-5-2014 Ministry of Agriculture of the People’s Republic of China: Determination of carbadox, mequindox, quinocetone and olaquindox in feeds – liquid chromatography – tandem mass spectrometry.