Efficient Extraction of Quetiapine in Plasma Using Oasis PRiME MCX

Význam tématu

Analýza quetiapinu v lidské plasmě je klíčová pro farmakokinetické studie, monitorování léčby a vývoj nových antipsychotik. Přesná extrakce a odstranění interferentů, zejména fosfolipidů, umožňuje spolehlivou detekci pomocí LC–MS/MS.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo porovnat tři způsoby přípravy vzorku: proteinovou precipitaci, klasickou Oasis MCX SPE a novou tříkrokovou metodu Oasis PRiME MCX µElution. Studie hodnotila výtěžnost extrakce, vliv matrice a efektivitu odstranění fosfolipidů.

Použitá metodika a instrumentace

• Vzorky: lidská plazma s quetiapinem v rozmezí 2,5–100 ng/ml, QC na úrovních 7,5, 30 a 75 ng/ml.
• Proteinová precipitace: 100 µl plazmy, 300 µl methanolu, centrifugace.
• Oasis MCX: 1:1 4% kyselina fosforečná, kondice SPE, 2 kroky mýtí, eluční 5 % NH4OH v methanolu.
• Oasis PRiME MCX: 1:1 200 mM amonium formiát s 4% H3PO4, 1 krok mýtí, eluční 5 % NH4OH v methanolu, µElution format.

• LC–MS/MS: ACQUITY UPLC I-Class, CSH C18 2,1×100 mm, 1,7 µm, gradientní eluce, Xevo TQD, ESI+ režim, MRM detekce.

Použitá instrumentace

• Oasis PRiME MCX µElution Plate (Waters)
• Oasis MCX µElution Plate
• ACQUITY UPLC I-Class System (FTN)
• ACQUITY UPLC CSH C18 Column, 1,7 µm, 2,1×100 mm
• Xevo TQD Mass Spectrometer
• MassLynx v4.1 s TargetLynx

Hlavní výsledky a diskuse

• Recovery: PPT ~28 %, MCX ~94,5 %, PRiME MCX ~94 %; SPE metody dosahují vysoké výtěžnosti.
• Matrix efekty: PPT – silná iontová suprese (~–58 %), MCX i PRiME MCX ~0 %; PRiME MCX zajišťuje minimální rušení signálu.
• Odstranění fosfolipidů: PRiME MCX odstraňuje až 98 % fosfolipidů oproti PPT, což vede k čistším extraktům.
• Protokol PRiME MCX je rychlejší díky zrušení kondic a ekvilibrací, přímé µElution umožňuje vstřik bez odpařování a rekonstituce.

Přínosy a praktické využití metody

• Zkrácená příprava vzorku a snížené náklady na chemikálie.
• Vysoká reprodukovatelnost a robustnost metody vhodná pro vysoce propustná bioanalytická pracoviště.
• Jednoduchá automatizace na pipetovacích robotech, minimální riziko chyb a sledovatelnost vzorků.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Aplikace PRiME MCX pro jiné kationtové farmaka a metabolity v biomedicínském výzkumu.
• Integrace mikroeluce do multi-matrikových metod pro komplexní klinické a toxikologické studie.
• Vývoj nových sorbentů pro širší spektrum interferentů a ještě vyšší čistotu extraktů.

Závěr

Metoda Oasis PRiME MCX µElution představuje efektivní, rychlou a robustní cestu k extrakci quetiapinu z plazmy s vysokou výtěžností, nízkými matrix efekty a významným odstraněním fosfolipidů. Protokol je vhodný pro automatizované vysokopropustné aplikace v bioanalýze.

Reference

Moeini M.M., El Beqqali A., Abdel-Rehim M. Bioanalytical method development and validation: Critical concepts and strategies. J Chromatogr B. 2017;1043:3–11.