The Agilent 1260 Infinity Analytical SFC System with Time-of-Flight Mass Spectrometric Detection

Význam tématu

Separační schopnosti achiral superkritické fluidní chromatografie (SFC) přinášejí vysokou účinnost a rychlost analýzy širokého spektra organických sloučenin. Kombinace SFC s hmotnostní spektrometrií s časem letu (TOF MS) zajišťuje citlivou a přesnou detekci farmaceutických látek.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo demonstrovat automatizovaný vývoj achirální SFC metody pro separaci šesti farmaceutických sloučenin pomocí Agilent ChemStation Method Scouting Wizard. Testovaný workflow zahrnoval screening 4 stacionárních fází a 10 složení mobilní fáze, celkem 40 různých kombinací, které byly během přibližně 11 hodin vyhodnoceny pomocí softwaru MassHunter Profinder.

Použitá metodika a postup

Analýza proběhla na Agilent 1260 Infinity Analytical SFC systému s generickým gradientním programem o délce 8 minut, konstantním průtokem 2 mL/min, pod tlakem 100 bar a teplotou kolony 60 °C. Mobilní fázi tvořilo superkritické CO₂ a organický modifier (metanol nebo isopropanol) s různými přísadami (voda, formová kyselina, diethylamin, ammonium acetát). Detekce TOF MS probíhala v pozitivním ionizačním režimu.

Použitá instrumentace

• Agilent 1260 Infinity SFC II Control Module
• Agilent 1260 Infinity SFC Binary Pump
• Agilent 1260 Infinity II SFC Multisampler
• Agilent 1260 Infinity Diode Array Detector
• Agilent 1290 Infinity Thermostatted Column Compartment
• Agilent 1290 Infinity Valve Drive s Quick Change ventily
• Agilent 6230 accurate-mass TOF LC/MS s Jet Stream ESI
• Agilent 1260 Infinity Isocratic Pump pro kontinuální kalibraci

Hlavní výsledky a diskuse

Nejlepší separace všech šesti sloučenin (primidon, karbamazepin, fenofibrát, nafcilin, dekokvinát, kloxacilin) byla dosažena na kolonách InfinityLab Poroshell 120 HILIC s 1 % vody v metanolu a ZORBAX Rx-SIL s čistým nebo 1 % vodným metanolem. Tyto podmínky umožnily kompletní oddělení během méně než 3 minut s garantovanou rozlišovací schopností, symetrickými píky a přesností lepší než 10 ppm. Přidání vody zlepšilo tvar píku zejména u ionizovatelných sloučenin.

Přínosy a praktické využití metody

Automatizovaný software Scouting Wizard významně zrychluje vývoj SFC metod a minimalizuje manuální zásahy. Přístup je vhodný pro QA/QC laboratoře, farmaceutický výzkum a rychlý screening neznámých vzorků v životním prostředí.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření umělé inteligence a strojového učení pro predikci optimálních podmínek, další integrace multi-detekčních technik a miniaturizace SFC systémů pro zvýšení propustnosti analýz a průmyslovou automatizaci.

Závěr

Studie prokázala efektivitu automatizovaného screeningu metod v SFC/TOF MS pro vývoj robustních protokolů separace farmaceutických látek. Vybrané kombinace kolon a přísad v mobilní fázi zkracují dobu vývoje a zvyšují spolehlivost analýz.

Reference

• Bieber S. et al. RRLC-HILIC and SFC with Mass Spectrometry: Polarity Extended Organic Molecule Screening in Environmental (Water) Samples. Analytical Chemistry 2017;89(15):7907-7914.
• Strategies for Column and Mobile Phase Selection with the Agilent 1260 Infinity SFC System. Agilent Technologies Application Note 5990-7147EN.
• Supercritical Fluid Chromatography with Flexible Injection Volumes at Highest Precision – Performance of the Agilent 1260 Infinity II SFC Multisampler. Agilent Technologies Technical Overview 5991-7623EN.
• Optimization of Jet Stream ESI Parameters When Coupling Agilent 1260 Infinity Analytical SFC System with Agilent 6230 TOF LC/MS. Agilent Technologies Technical Overview 5991-4510EN.