Separace biologicky významných polymerů se v dnešní době těší stále větší pozornosti a umožňují zásadní průlomy v mnoha oborech, zejména v oblasti klinické biochemie. Oligonukleotidy nejčastěji najdeme ve formě krátkých sekvencí, primerů či sond, a jsou nenahraditelnými složkami pro řadu molekulárních metod (PCR, DNA sekvenování apod.). Příprava dokonale přesných a čistých oligonukleotidů bývá často zcela zásadní pro úspěšnost těchto metod, proto velmi záleží na účinnosti izolace cílové sekvence od neúplných produktů syntézy či dalších nechtěných příměsí. Současné postupy zahrnují mimo jiné i preparativní chromatografii, avšak nezřídka kdy mívají standardně používané postupy nedostatečné rozlišení. Koncept recyklační chromatografie, kdy jsou analyty po výstupu z kolony navráceny zpět pro opakovaný průchod kolonou, a tím je zlepšeno jejich rozlišení, je znám od 60 let. V poslední době byl však představen zcela nový koncept, tzv. systému Repetto, kdy jsou segmenty separované směsi sekvenčně vraceny zpět na kolonu bez nutnosti průchodu pumpou snižující účinnost separace a s možností detekce mezi cykly, kdy na detektor nepůsobí vysoký zpětný tlak (jako např. při alternativní metodě tzv. přehazování mezi dvěma kolonami). Hlavním cílem předložené práce byla optimalizace podmínek pro separaci směsi oligonukleotidů lišících se délkou sekvence či obsahem vysoko-tajících G a C bází a následné prokázání výrazného zlepšení rozlišení jejich separace pomocí výše zmíněného přístupu recyklační chromatografie.<blockquote>✒️ Barbora Fišerová (1), Milan Minárik (2), Michal Náhunek (2), Roman Kysilka (2) a Marek Minárik (1,2)🏢 1)Katedra analytické chemie, Přírodovědecká fakulta, Univerzita Karlova, Praha 2) HPLC laboratoř, Watrex Praha, s.r.o., Praha 6</blockquote><h3>HPLC systém pro optimalizaci metody a po zapojení Repetto</h3>Z důvodu komerčního využití metod pro separaci a purifikaci oligonukleotidů a nedostupného „know-how“ se fáze optimalizace metody pro isokratický mód stala velkou výzvou. Pro využití modulu Repetto bylo zásadní zapojení robustního systému poskytujícího málo rozmyté píky o stálých retenčních časech. Na obrázku Obr 1 je schéma systému HPLC po zapojení modulu Repetto. Zásadní inovací bylo zapojení přepínacího ventilu pro třetí zásobník mobilní fáze v rámci vysokotlakého gradientu, umožňující oplach kolony čistým acetonitrilem, aby nedocházelo k jejímu zanášení, a také využití prostorné skříně termostatu plynového chromatografu pro zapojení Repetto, které nám umožnilo teplotní kontrolu nad celou částí systému, kde se pohyboval vzorek.<figure class="image"><img style="aspect-ratio:1432/539;" src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Watrex_Vyvoj_a_optimalizace_separace_oligonukleotidu_s_vyuzitim_noveho_pristupu_recyklacni_HPLC_282de50e41.jpg" alt="Obr 1: Schéma systému po zapojení recyklačního modulu Repetto. (1) Zásobníky mobilní fáze. (2) Degasser. (3) Přepínací ventil pro selekci zásobníků mobilní fáze. (4), (5) Čerpadla mobilní fáze. (6) Směšovač mobilní fáze. (7) Chlazený autosampler. (8) Plynový chromatograf. (9) Kolona. (10) Repetto. (11) UV Detektor. (12) Datastanice." srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Watrex_Vyvoj_a_optimalizace_separace_oligonukleotidu_s_vyuzitim_noveho_pristupu_recyklacni_HPLC_282de50e41.jpg 245w," sizes="100vw" width="1432" height="539"></figure><h3>Recyklační chromatografie - Repetto</h3>Recyklační modul Repetto byl v nedávné době vyvinut jako nový přístup recyklační chromatografie. Na rozdíl od všech ostatních přístupů je v tomto zapojení detektor umístěn v bezpečné části systému a není vystavován vysokému tlaku. Recyklace probíhá relativně rychlým přepínáním ventilů (1 přepnutí za 2 vteřiny), které tvoří uzavřenou smyčku. Nejprve je vzorek vpuštěn na kolonu a poté putuje na detektor. Jakmile se spustí recyklace, je vzorek po velmi malých segmentech vracen na začátek separační kolony. Na obrázku Obr 2 je schéma zapojení tohoto modulu v obou polohách přepínacích ventilů (A a B).<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Watrex_Vyvoj_a_optimalizace_separace_oligonukleotidu_s_vyuzitim_noveho_pristupu_recyklacni_HPLC_2_0bc7b22b7d.jpg" alt="Obr 2: Schematické zapojení recyklačního modulu Repetto. (A) Pozice 1. (B) Pozice 2" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Watrex_Vyvoj_a_optimalizace_separace_oligonukleotidu_s_vyuzitim_noveho_pristupu_recyklacni_HPLC_2_0bc7b22b7d.jpg 245w," sizes="100vw" width="1132" height="402"><h3>Optimalizace metody</h3>Úvodní pokusy s dělením oligonukleotidů se od počátku potýkaly s variabilitou v elučních časech a rozmytím píků. Kromě standardních optimalizací podmínek jako jsou průtok, teplota separace a zastoupení organické složky v mobilní fázi bylo experimentálně zjištěno, že lze nežádoucí jevy píků zmírnit zchlazením vzorku před nástřikem na kolonu. Domníváme se, že by tento efekt mohl být způsoben adsorpcí oligonukleotidů na kovový povrch frit v koloně. Chromatogramy popisující tento experiment jsou znázorněny na Obr 3. Dalším důležitým bodem optimalizace bylo sestrojení Van Deemterových křivek, které potvrdily, že příčinu rozmývání píků musíme hledat v mezimolekulové interakci neboli „mass-transfer“ a také že zvýšená teplota této interakci napomáhá. Z tohoto poznatku vycházela nutnost termostatovat celý systém HPLC včetně modulu Repetto. Lineární část Van Deemterovy křivky je znázorněna na Obr 4.<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Watrex_Vyvoj_a_optimalizace_separace_oligonukleotidu_s_vyuzitim_noveho_pristupu_recyklacni_HPLC_4_06b2664884.jpg" alt="Obr 3: Efekt chlazení vzorku a Obr 4: Van Deemterova křivka" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Watrex_Vyvoj_a_optimalizace_separace_oligonukleotidu_s_vyuzitim_noveho_pristupu_recyklacni_HPLC_4_06b2664884.jpg 245w," sizes="100vw" width="2848" height="847"><h3>Efekt recyklační chromatografie na rozlišení píků a účinnost separace</h3>Hlavním účelem využití recyklační chromatografie je zlepšení rozlišení separace. To znamená možnos rozdělit analyty, které bez recyklace (i přes optimalizaci metody) zůstaly nerozdělené a také zvýšit účinnost separace. Na Obr 5 a 6 jsou znázorněny grafy závislosti parametrů separace (rozlišení a počtu pater kolony na metr) na počtu cyklů při recyklaci. Pro ověření funkčnosti recyklace byla změřena směs acenaftenu a antracenu, které mají velmi blízké eluční časy, ale separace probíhá pomocí reverzní HPLC bez iontově párového módu. Poté byly průběhy výše zmíněných závislostí porovnány s hodnotami z iontově párového systému separace oligonukleotidů. V obou systémech bylo patrné zlepšení rozlišení píků i účinnosti separaci.<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Watrex_Vyvoj_a_optimalizace_separace_oligonukleotidu_s_vyuzitim_noveho_pristupu_recyklacni_HPLC_6_e91961a207.jpg" alt="Obr 5: Zlepšení rozlišení píků po recyklaci a Obr 6: Zlepšení účinnosti separace po recyklaci" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Watrex_Vyvoj_a_optimalizace_separace_oligonukleotidu_s_vyuzitim_noveho_pristupu_recyklacni_HPLC_6_e91961a207.jpg 245w," sizes="100vw" width="1690" height="661"><h3>Recyklace směsi oligonukleotidů&nbsp;</h3>Nejlepších výsledků recyklace směsí oligonukleotidů bylo dosaženo na koloně od společnost Waters s označením Xterra C18 o rozměrech 50 x 4,6 mm s velikostí částic 2,5 μm. Na Obr 7 je znázorněn chromatogram recyklace směsi oligonukleotidů o délce 54, 55 a 56—mer se zastoupením GC v řetězci asi 40%. Recyklace prokázala možnost snadno odstranit nečistoty eluující před píky analytů a tyto nečistoty již nejsou po recyklaci na chromatogramu přítomny. Po recyklaci došlo ke zlepšení separace píků (2) a (3). Navyšující se základní linie je důsledkem zanášení kolony aminovými zbytky z iontově párového činidla, protože nebylo možné dělat oplachy 100% ACN.<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Watrex_Vyvoj_a_optimalizace_separace_oligonukleotidu_s_vyuzitim_noveho_pristupu_recyklacni_HPLC_3_8d4e87a860.jpg" alt="Obr 7: Chromatogram směsi dlouhých oligonukleotidů (~40 % GC) po recyklaci na koloně Waters XTerra C18. Experimentální podmínky: kolona Waters XTerra C18, 50x4,6 mm, 100 Å, 2,5 μm, mobilní fáze A (5% ACN v 0,1 mol/dm3 TEAA, pH 7), B (15% ACN v 0,1 mol/dm3 TEAA, pH7), C (100% ACN), A:B (50:50, v/v, 10 % ACN), 0,4 ml/min, oplach C 3 min (1 ml/min), ekvilibrace kolony 5 min (2 ml/min), teplota separace 60 °C, nástřik vzorku 20 μl, UV detekce při 260 nm." srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Watrex_Vyvoj_a_optimalizace_separace_oligonukleotidu_s_vyuzitim_noveho_pristupu_recyklacni_HPLC_3_8d4e87a860.jpg 245w," sizes="100vw" width="1192" height="697"><h3>Závěr</h3>Využití recyklačního přístupu umožnilo významné zlepšení separace oligonukleotidů. Efekt je obzvlášť patrný pro analýzu dlouhých oligonukleotidů, kde separace standardními metodami v podstatě není možná – viz Obr. 6 první segment, kde píky 2 a 3 nejsou rozdělené. Tento výsledek je tak nejvýznamnějším dosaženým v tomto projektu. Na jeho základě lze předpokládat i brzké zavedení do průmyslové praxe.

Vývoj a optimalizace separace oligonukleotidů s využitím nového přístupu recyklační HPLC

<h3>1. Úvod</h3><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=1&amp;search=PFAS">Per- a polyfluoralkylové látky (PFAS)</a> se široce používají v různých oblastech a průmyslových odvětvích. Vzhledem ke své strukturální stabilitě a odolnosti vůči rozkladu se však hromadí v životním prostředí a jsou podezřelé z negativních účinků na lidské zdraví. PFAS přítomné v půdě se mohou akumulovat v lidském těle prostřednictvím zemědělských produktů, a proto je nezbytné vyvinout citlivé a robustní analytické metody pro detekci PFAS v půdě se složitými matricemi.¹Tato studie prezentuje hodnocení robustnosti metody spočívající v přidání 30 PFAS do půdní matrice a následném měření těchto látek pomocí přístroje <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/1147">LCMS-8060RX</a> v 500 po sobě jdoucích analýzách.<h3>2. Metody</h3>Pro tuto analýzu byl použit systém LC-MS/MS vybavený nově navrženým ionizačním zdrojem ESI. Mezi směšovač a autosampler byla zařazena zpožďovací kolona, aby se minimalizoval vliv kontaminace PFAS z LC systému.Byly vytvořeny šestibodové kalibrační křivky a každý kalibrační bod byl měřen třikrát. Vzorek půdy byl připraven podle části postupů publikovaných Národní organizací pro zemědělský a potravinářský výzkum.²Do vzorku půdy bylo po předúpravě přidáno 30 sloučenin PFAS v koncentraci 0,1 µg/l a následně bylo provedeno 500 analýz tohoto vzorku pro účely hodnocení robustnosti. Vzorek obsahoval více než 90 % půdní matrice. Kontrolní vzorky (QC) byly navíc analyzovány po každých 20 injekcích vzorku půdy.<h4>Tabulka 1. Analytické podmínky</h4><h5>UHPLC (<a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/151">systém Nexera™ X3</a>)</h5><ul><li>Analytická kolona: Shim-pack Scepter™ C18-120 (100 mm × 2,1 mm I.D., 1,9 µm, P/N: 227-30102-05)</li><li>Zpožďovací kolona: PFAS delay column (GL Science, P/N 5020-00005)</li><li>Mobilní fáze A: 2 mM octan amonný v reagenční vodě</li><li>Mobilní fáze B: methanol</li><li>Gradient: B 1 % → 95 % (0,0–2,0 min) → 100 % (11,0–15,0 min) → 1 % (15,1–20,0 min)</li><li>Průtok: 0,3 ml/min</li><li>Teplota kolony: 40 °C</li><li>Objem injekce: 5 µl</li><li>Doba analýzy: 20 min</li></ul><h5>LCMS (LCMS™-8060RX)</h5><ul><li>Ionizace: ESI (negativní režim)</li><li>Rozprašovací plyn: 3 l/min</li><li>Sušící plyn: 10 l/min</li><li>Ohřívací plyn: 10 l/min</li><li>Teplota rozhraní: 300 °C</li><li>Teplota DL: 250 °C</li><li>Teplota vyhřívacího bloku: 400 °C</li><li>Kolizní plyn: argon</li><li>Režim MRM: 2 přechody na sloučeninu</li><li>Přepínání polarity: VYPNUTO</li></ul><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_LCMS_8060_beb6231901/Shimadzu-LCMS-8060.jpg" alt="Shimadzu: Hodnocení robustnosti analýzy PFAS v půdě pomocí LC-MS/MS: Obr. 1 LCMS - 8060RX" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_LCMS_8060_beb6231901/thumbnail_Shimadzu-LCMS-8060.jpg 245w," sizes="100vw" width="780" height="390"><h3>3. Analýza standardů</h3>Třicet PFAS, včetně pěti hlavních zástupců (PFOA, PFOS, PFHxS, PFNA a HFPO-DA), bylo úspěšně separováno za přibližně 12 minut s dobrým tvarem píků (obr. 2). Korelační koeficienty kalibrační křivky byly u většiny sloučenin v koncentračním rozmezí 0,01–10 µg/l vyšší než 0,996. Přesnost se pohybovala v rozmezí 70–130 % a relativní směrodatná odchylka plochy píku (%RSD) byla nižší než 20 % ve všech koncentracích v rámci kalibračního rozsahu (obr. 3).<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Hodnoceni_robustnosti_analyzy_PFAS_v_pude_pomoci_LC_MS_MS_1086672ae9.jpg" alt="Shimadzu: Hodnocení robustnosti analýzy PFAS v půdě pomocí LC-MS/MS: Obr. 2: MRM chromatogramy pro 0,05 µg/l" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Hodnoceni_robustnosti_analyzy_PFAS_v_pude_pomoci_LC_MS_MS_1086672ae9.jpg 245w," sizes="100vw" width="1099" height="514"><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Hodnoceni_robustnosti_analyzy_PFAS_v_pude_pomoci_LC_MS_MS_2_d01a4822bf.jpg" alt="Shimadzu: Hodnocení robustnosti analýzy PFAS v půdě pomocí LC-MS/MS: Obr. 3: Kalibrační křivky pro HFPO-DA, PFOA, PFHxS, PFNA a PFOS" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Hodnoceni_robustnosti_analyzy_PFAS_v_pude_pomoci_LC_MS_MS_2_d01a4822bf.jpg 238w," sizes="100vw" width="1012" height="664"><h3>4. Hodnocení robustnosti s půdní matricí</h3>Obr. 4 ukazuje normalizované plochy píků pěti hlavních sloučenin (HFPO-DA, PFOA, PFHxS, PFNA a PFOS) v obohaceném vzorku půdy, přičemž opakovatelnost ploch píků byla dobrá. Dobré tvary píků byly dosaženy jak na začátku, tak na konci 500 analýz (obr. 5). Tabulka 2 uvádí hodnoty %RSD a detekční limity v půdní matrici (na základě 500 po sobě jdoucích nástřiků) pro všech 30 cílových PFAS. Opakovatelnost ploch píků byla dobrá, s %RSD pod 8,5 u všech cílových sloučenin. Výtěžnost z kontrolních vzorků (QC) se pohybovala v rozmezí 80 až 120 % u všech cílových sloučenin po celou dobu 500 po sobě jdoucích injekcí (obr. 6).<h4><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Hodnoceni_robustnosti_analyzy_PFAS_v_pude_pomoci_LC_MS_MS_3_d86a30445f.jpg" alt="Shimadzu: Hodnocení robustnosti analýzy PFAS v půdě pomocí LC-MS/MS: Obr. 4: Opakovatelnost plochy píku (n = 500) pro půdní vzorek obohacený na 0,1 µg/l (koncentrace v roztoku)" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Hodnoceni_robustnosti_analyzy_PFAS_v_pude_pomoci_LC_MS_MS_3_d86a30445f.jpg 245w," sizes="100vw" width="1015" height="522"></h4><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Hodnoceni_robustnosti_analyzy_PFAS_v_pude_pomoci_LC_MS_MS_4_0e03b6d56c.jpg" alt="Shimadzu: Hodnocení robustnosti analýzy PFAS v půdě pomocí LC-MS/MS: Obr. 5: MRM chromatogramy první a pětisté analýzy půdního vzorku obohaceného na 0,1 μg/l (koncentrace v roztoku)" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Hodnoceni_robustnosti_analyzy_PFAS_v_pude_pomoci_LC_MS_MS_4_0e03b6d56c.jpg 245w," sizes="100vw" width="1061" height="397"><h4>Tabulka 2: Relativní směrodatná odchylka plochy píku (%RSD), detekční limit a průměrná výtěžnost pro půdní vzorek obohacený na 0,1 μg/l (koncentrace v roztoku)</h4><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Hodnoceni_robustnosti_analyzy_PFAS_v_pude_pomoci_LC_MS_MS_5_50b8f83c26.jpg" alt="Shimadzu: Hodnocení robustnosti analýzy PFAS v půdě pomocí LC-MS/MS" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Hodnoceni_robustnosti_analyzy_PFAS_v_pude_pomoci_LC_MS_MS_5_50b8f83c26.jpg 245w," sizes="100vw" width="970" height="473"><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Hodnoceni_robustnosti_analyzy_PFAS_v_pude_pomoci_LC_MS_MS_6_94bbb2e21f.jpg" alt="Shimadzu: Hodnocení robustnosti analýzy PFAS v půdě pomocí LC-MS/MS: Obr. 6: Průměrná výtěžnost z QC vzorků při 0,1 µg/l (koncentrace v roztoku) (n = 3)" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Hodnoceni_robustnosti_analyzy_PFAS_v_pude_pomoci_LC_MS_MS_6_94bbb2e21f.jpg 245w," sizes="100vw" width="963" height="455"><h3>5. Závěr</h3>Přístroj <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/1147">LCMS-8060RX</a> provedl 500 po sobě jdoucích měření 30 PFAS přidaných do vzorku půdní matrice. Výsledky prokázaly dobrou opakovatelnost plochy píků, dobrý tvar píků a vysokou výtěžnost. Nově navržený zdroj ESI vykázal vynikající robustnost a stabilní analýzu bylo možné udržet po dlouhou dobu, a to i u vzorků se složitými matricemi.

Hodnocení robustnosti analýzy PFAS v půdě pomocí LC-MS/MS

<a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=1&amp;search=PFAS">Per- a polyfluoralkylové látky (PFAS)</a> jsou perzistentní environmentální kontaminanty, které mají negativní dopad na lidské zdraví a životní prostředí. Vysoké koncentrace PFAS v testovaných vzorcích mohou způsobit kontaminaci citlivých LC-MS/MS přístrojů, což vyžaduje rozsáhlé dekontaminační postupy, které vedou k významným prostojům a nákladným zpožděním při zpracování vzorků. Představujeme vývoj jednoduché a nákladově efektivní metody pro rychlý screening vzorků <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/library?instrumentationItems=29-31&amp;mainauthorItems=1&amp;search=PFAS">PFAS pomocí jednoduchého hmotnostního spektrometru MALDI-TOF</a>, který identifikuje vzorky s vysokými koncentracemi předtím, než vstoupí do analytického workflow.<h4>Metody</h4>Standardy PFOA a PFOS byly zakoupeny od společnosti Merck, Velká Británie. Základní roztoky (1 ppm připravené v acetonitrilu) byly zředěny vodou na požadované koncentrace.Vzorky byly testovány s různými MALDI matricemi (CHCA, DHB, DHAP, DAN, NRM a TMGN), přičemž jako nejvíce vhodné se jevily norharman (NRM) a 1,8-bis(tetramethylguanidino)-naftalen (TMGN). Zředěné vzorky byly smíchány s NRM (1 mg/ml) nebo TMGN (5 mg/ml) v poměru 70:30 acetonitril:voda. Byly připraveny slepé vzorky UHP vody, aby se zajistilo, že nedošlo ke kontaminaci. 1 µl směsi byl nanesen na sklíčko FlexiMassSR48 a vzorky byly analyzovány pomocí hmotnostního spektrometru <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/library?instrumentationItems=25&amp;manufacturerItems=3&amp;search=MALDI-8030">MALDI-8030 MALDI-TOF</a> (Shimadzu). Podmínky analýzy jsou uvedeny na obr. 1. Pro PFOA a PFOS byly sledovány píky při m/z 314,2 a m/z 499,2. Jako interní standard pro vzorky PFOS s konečnou koncentrací vzorku 6,25 ng/ml byl použit 13C8PFOS (m/z 507) (viz obr. 2). K posouzení homogenity spotů byla použita <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/library?instrumentationItems=25-26&amp;manufacturerItems=3">MALDI-MSI </a>a byly stanoveny mezní hodnoty detekce.<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Obr_2_K_analyze_je_zapotrebi_pouze_pridani_interniho_standardu_a_matrice_4ba1c111d4.jpg" alt="Shimadzu: Obr. 2 K analýze je zapotřebí pouze přidání interního standardu a matrice" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Obr_2_K_analyze_je_zapotrebi_pouze_pridani_interniho_standardu_a_matrice_4ba1c111d4.jpg 245w," sizes="100vw" width="927" height="483">Následně byly zakoupeny standardy PFHxA a PFBS od společnosti Merck, Velká Británie, a analyzovány stejnou metodou<h5>Analytické podmínky pro analýzu PFAS pomocí MALDI-8030</h5><ul><li>Systém: <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/library?instrumentationItems=25&amp;manufacturerItems=3&amp;search=MALDI-8030">MALDI-8030</a>&nbsp;</li><li>Polarita: záporná&nbsp;</li><li>Hmotnostní rozsah: m/z 100–1000&nbsp;</li><li>Akvizice: 980 snímků při 200 Hz&nbsp;</li><li>Blanking: 200&nbsp;</li><li>Pulzní extrakce: 400</li></ul><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_MALDI_8030_c8fc06c76e.jpg" alt="Shimadzu: MALDI-8030" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_MALDI_8030_c8fc06c76e.jpg 95w," sizes="100vw" width="249" height="407"><h4>Výsledky</h4>U norharmanu i TMGN byly PFOS a PFOA detekovány v koncentracích vhodných pro předběžný screening, aby se zabránilo kontaminaci systémů LC-MS/MS1 . MALDI-MSI imaging odhalil migraci PFAS k okrajům skvrn vzorků během nanášení/sušení (obr. 3). Použití prstencové akviziční strategie pro norharman vedlo k získání spekter s vyšším poměrem signálu k šumu, jak se očekávalo. Vzorky připravené s matricí TMGN vykazovaly homogennější distribuci a práce pokračovala s touto matricí (5 mg/ml v 70% acetonitrilu).<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Obr_3_MALDI_MSI_bodove_zobrazeni_PFOS_a_PFOA_v_Norharmanu_and_TMGN_64d0d91704.jpg" alt="Shimadzu: Obr. 3 MALDI-MSI bodové zobrazení PFOS a PFOA v Norharmanu &amp; TMGN" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Obr_3_MALDI_MSI_bodove_zobrazeni_PFOS_a_PFOA_v_Norharmanu_and_TMGN_64d0d91704.jpg 245w," sizes="100vw" width="1547" height="401">Limity detekce byly stanoveny pro standardy PFOA, PFOS, PFHxA a PFBS na 5 ppb, 250 ppt, 200 ppt a 1 ppb (obr. 4).<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Obr_4_Reprezentativni_spektra_ukazujici_LOD_pro_PFOA_5_ppb_PFOS_250_ppt_PF_Hx_A_200_ppt_a_PFBS_1_ppb_82c72adca0.jpg" alt="Shimadzu: Obr. 4 Reprezentativní spektra ukazující LOD pro PFOA (5 ppb), PFOS (250 ppt), PFHxA (200 ppt) a PFBS (1 ppb)." srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Obr_4_Reprezentativni_spektra_ukazujici_LOD_pro_PFOA_5_ppb_PFOS_250_ppt_PF_Hx_A_200_ppt_a_PFBS_1_ppb_82c72adca0.jpg 245w," sizes="100vw" width="1697" height="735">Analýza vzorků balené vody byla vybrána jako reprezentativní pro vzorky obdržené v rámci testování PFAS. Malý počet vzorků vykazoval nízké hladiny možného PFAS přítomného ve vzorku (obr. 5).<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Obr_5_Reprezentativni_spektra_ukazujici_analyzu_balene_vody_spolu_se_smisenym_vzorkem_PFAS_obsahujicim_PFOS_50_ppb_PFOA_100_ppb_PFBS_50_ppb_a_PF_Hx_A_100_ppb_a_slepym_vzorkem_UHP_vody_2f82ecdcff.jpg" alt="Shimadzu: Obr. 5 Reprezentativní spektra ukazující analýzu balené vody spolu se smíšeným vzorkem PFAS obsahujícím PFOS (50 ppb), PFOA (100 ppb), PFBS (50 ppb) a PFHxA (100 ppb) a slepým vzorkem UHP vody." srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Obr_5_Reprezentativni_spektra_ukazujici_analyzu_balene_vody_spolu_se_smisenym_vzorkem_PFAS_obsahujicim_PFOS_50_ppb_PFOA_100_ppb_PFBS_50_ppb_a_PF_Hx_A_100_ppb_a_slepym_vzorkem_UHP_vody_2f82ecdcff.jpg 245w," sizes="100vw" width="2264" height="1109">Aby bylo možné demonstrovat, jak lze MALDI-TOF MS použít ve screeningovém pracovním postupu, bylo proveden imaging celého sklíčka, které prokázalo rychlou a jednoduchou metodu vizuální identifikace potenciálně problematických vzorků.Celkový imaging sklíčka (v rozestupech 250 µm) standardních vzorků (48 bodů) se smíšenými koncentracemi byl dokončeno za přibližně 12 minut. Vzorky se smíšenými koncentracemi byly naneseny na standardní sklíčko FlexiMass-SR48 se 48 jamkami a také na sklíčko FlexiFocus s 96 jamkami pro imaging.K vytvoření iontového obrazu sklíčka byl použit software IMAGEREVEAL MS (Shimadzu, Japonsko) s barevnou lištou intenzity červené a zelené barvy, která zobrazuje vzorky s vysokou koncentrací zeleně a vzorky s nízkou koncentrací červeně (viz obr. 7).<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Obr_7_Imaging_cele_MALDI_desticky_jako_nastroj_pro_rychly_screening_59ad5fe0a7.jpg" alt="Shimadzu: Obr. 7 Imaging celé MALDI destičky jako nástroj pro rychlý screening. V uvedených příkladech byly vzorky PFOS v koncentracích 0, 1, 20, 50, 100 a 200 ng/ml analyzovány po nanesení na a) 96jamkovou destičku nebo b) 48jamkovou destičku." srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Obr_7_Imaging_cele_MALDI_desticky_jako_nastroj_pro_rychly_screening_59ad5fe0a7.jpg 245w," sizes="100vw" width="1807" height="1069">Jako vhodná mezní hodnota pro identifikaci problematických vzorků PFOS byla zvolena hodnota 100 ng/ml.&nbsp;Nastavení stupnice intenzity pro vzorky 100 ng/ml jako střední rozsah zobrazující směs červené a zelené barvy umožnilo snadnou identifikaci vzorků s vysokou koncentrací jako jasně zelené. (Viz obr. 7).<h4>Závěr</h4><ul><li>V zásadě jsme prokázali, že je možné použít hmotnostní spektrometrii MALDI-TOF k implementaci jednoduché metody předběžného screeningu vodných vzorků, aby se zabránilo rozsáhlé kontaminaci v laboratoři monitorující PFAS. Použitím pouhého 200 µl vzorku a minimální přípravy lze analyzovat celé sklíčko vzorků za méně než 15 minut</li><li>Spot imaging během vývoje metody zdůraznil rozdíly v homogenitě skvrn PFOS a PFOA, což naznačuje, že pro provedení semikvantitativní analýzy by bylo nutné použít více interních standardů.</li><li>Imaging celého sklíčka může poskytnout rychlé výsledky pro více vzorků v rozsahu koncentrací PFAS v jediné analýze s jednoduchou vizuální identifikací potenciálně problematických vzorků.</li><li>Vzhledem k povaze metody MALDI-TOF tyto výsledky nepotvrzují přítomnost PFAS, ale mohou být použity jako orientační výsledek pro úpravu dalších testovacích protokolů. K určení přítomnosti a koncentrace jakýchkoli PFAS je nutná potvrzující analýza LC-MS/MS.</li></ul>

Využití MALDI pro předběžný screening PFAS ve vzorcích životního prostředí

Společnost Agilent Technologies představila na výroční konferenci <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://gcms.labrulez.com/events/679">ASMS 2025</a> sérii odborných posterů zaměřených na aplikace LC/QQQ systémů v oblasti farmaceutické analýzy, environmentální chemie, potravinářství a klinického výzkumu. Deset vybraných studií demonstruje pokročilé možnosti přístrojů řady <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/833">Agilent 6495D</a> a <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/626">6475 LC/TQ </a>v kombinaci s automatizovanou přípravou vzorků, novými metodami kvantifikace i využitím umělé inteligence. Mezi prezentovanými tématy nechybí stanovení nitrosaminových nečistot v léčivech, screening PFAS v séru, analýza mykotoxinů v čaji Pu-erh či cílená proteomika z nízkoobjemových vzorků. Všechny postery podtrhují široký aplikační potenciál moderní LC-MS/MS instrumentace v reálné laboratorní praxi.<h5>1. Analysis of N-nitroso-nebivolol, Nitroso Drug Substance Related impurity in Nebivolol 20 mg tablet formulation using LC-MS/MS system</h5><ul><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/ps_ndsri_n_nitroso_nebivolol_6475a_lctq_asms_2025_thp_726_en_agilent_3c2171ee57.pdf">PDF ke stažení ZDE</a></li><li>Na systému Agilent 1290 Infinity III s detektorem 6495D LC/TQ byla vyvinuta citlivá MRM metoda pro stanovení nečistoty N-nitroso-nebivolol v tabletách. Metoda dosahuje LOQ 5 pg/mL s vysokou přesností a spolehlivostí pro kontrolu nitrosaminových nečistot dle regulací.</li></ul><h5>2. Analysis of Carcinogenic Nitrosamines at Ultra-trace Levels Among Terbinafine Using LC/TQ</h5><ul><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/ps_ndsri_terbinafine_6495d_mutagenic_impurity_asms_2025_thp_727_en_agilent_31a3bd7685.pdf">PDF ke stažení ZDE</a></li><li>Studie využívá Agilent 1290 UHPLC a 6495D LC/TQ pro stanovení tří nitrosaminových nečistot (NTA, NTD, NDT) v tabletách terbinafinu. Metoda dosahuje LOQ 0,25 ng/mL a vykazuje 96–108% výtěžnost s vysokou reprodukovatelností, což umožňuje spolehlivou kontrolu pod limitem 0,007 ppm.</li></ul><h5>3. Investigation of a Deep Learning-Assisted Workflow for the Analysis of Per-And Polyfluoroalkyl Substances in Environmental Matrices</h5><ul><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/ps_ai_peak_integration_pfas_quantification_asms_2025_mp_041_en_agilent_f1859f39c3.pdf">PDF ke stažení ZDE</a></li><li>Pro zefektivnění LC-MS/MS analýzy PFAS byla vyvinuta deep learning pipeline, která minimalizuje potřebu ruční integrace píků. Pracovní postup byl ověřen s využitím Agilent 1290 Infinity III LC a detektoru 6495D LC/TQ podle směrnic EPA 1633.</li></ul><h5>4. Comprehensive workflow for Automated Sample Cleanup and Sensitive Quantitation of Glucagon-like peptide-1 (GLP-1) Analogs from Plasma</h5><ul><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/ps_assaymap_bravo_6495d_glp1_asms_2025_thp_595_en_agilent_1c3d5dcdda.pdf">PDF ke stažení ZDE</a></li><li>Poster představuje robustní LC-MS/MS metodu s využitím kolonek AssayMAP RP-S pro automatizovanou purifikaci a kvantifikaci semaglutidu. Metoda využívá Agilent <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/468">1290 Infinity II Bio LC </a>a 6495D LC/TQ, přičemž dosahuje LOQ 0,2 ng/mL a vynikající reprodukovatelnosti.</li></ul><h5>5. Faster Than the Speed of Life: A Rapid Screening Method for Select PFAS Compounds in Serum by RapidFire-MS</h5><ul><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/ps_rapidfire_ms_pfas_serum_asms_2025_wp_243_en_agilent_c8b56f4dd5.pdf">PDF ke stažení ZDE</a></li><li>Tato rychlá screeningová metoda kombinuje Agilent <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/170">RapidFire 400</a> s detektorem 6495D LC/TQ pro analýzu PFAS v séru. Čištění pomocí Captiva EMR-Lipid snižuje maticové vlivy a zvyšuje citlivost, což umožňuje LOQ ≤0,1 ppb při 12sekundovém cyklu na vzorek.</li></ul><h5>6. Large Panel Targeted Proteomics for Low-amount Samples Using an Enhanced Nanoflow 6495D LC/TQ System</h5><ul><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/ps_assaymap_bravo_6495d_protein_quantification_asms_2025_thp_682_en_agilent_fa5ea724a6.pdf">PDF ke stažení ZDE</a></li><li>Vyvinutý nanoflow LC-MS/MS postup pro cílenou proteomiku malých množství vzorku využívá <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/741">Evosep One</a>, ionizační zdroj Newomics UniESI 2.0 a detektor Agilent 6495D LC/TQ. Byla vytvořena a ověřena dMRM metoda pro 1000 proteinů bez použití SIL standardů.</li></ul><h5>7. Using Agilent Hybrid Multisamplerwith Triple Quadrupole Mass Spectrometer to Solve Solvent Effect in PFCAs and its Precursor FTOHs Analysis</h5><ul><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/ps_hybrid_multisampler_pfca_ftoh_analysis_asms_2025_mp_549_en_agilent_ed3cdcab06.pdf">PDF ke stažení ZDE</a></li><li>Tato studie představuje metodu pro simultánní stanovení 50 PFAS látek, včetně PFCAs a FTOHs, pomocí systému Agilent 1290 UHPLC a detektoru 6475 LC/TQ. Hybridní multisampler s režimem Feed Injection účinně eliminuje solventní efekt způsobený metanolem, čímž zlepšuje tvar píků a citlivost bez nutnosti snižování injekčního objemu.</li></ul><h5>8. Innovation Development of Multidimensional Holographic Analysis Technology of the Multi-Mycotoxin in Pu’erTea Sample Analysis</h5><ul><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/ps_lc_tq_multi_mycotoxin_puer_tea_asms_2025_wp_379_en_agilent_3ab74d5e42.pdf">PDF ke stažení ZDE</a></li><li>Pomocí technologie Multidimensional Holographic Analysis Technology (MHAT) byla vyvinuta plně automatizovaná LC-MS/MS metoda pro stanovení 11 mykotoxinů v čaji Pu-erh. Metoda využívá Agilent 1290 UHPLC a detektor 6495 LC/TQ s vícerozměrnou separací a automatickým vyhodnocením v <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/23">softwaru MassHunter</a>.</li></ul><h5>9. Sensitive Quantitation of Glucagon-like peptide-1 (GLP-1) Analog Tirzepatidein Plasma Using Automated LC-MS/MS workflow</h5><ul><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/ps_6495d_glp1_sample_prep_asms_2025_mp_229_en_agilent_29bbf963e6.pdf">PDF ke stažení ZDE</a></li><li>Tento automatizovaný postup využívající platformu AssayMAP Bravo a RP-S kolonky umožňuje citlivé stanovení tirzepatidu v plazmě. Metoda využívá Agilent 1290 Infinity II Bio LC ve spojení se systémem 6495D LC/TQ a dosahuje dynamického rozsahu 0,05–1000 ng/mL.</li></ul><h5>10. Screening of Vitamin B9 and B12 in Rice at Fortification Level</h5><ul><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/ps_6475_lc_tq_bond_elut_jr_vit_b9_b12_rice_asms_2025_wp_166_en_agilent_4f355a7384.pdf">PDF ke stažení ZDE</a></li><li>Tato studie popisuje citlivou LC-MS/MS metodu pro stanovení kyseliny listové (B9) a kyanokobalaminu (B12) ve fortifikované rýži s využitím enzymatické extrakce a SPE kolonek Bond Elut Jr. Analýza probíhala na systému Agilent 1290 UHPLC spojeném s detektorem 6475 LC/TQ. &nbsp;</li></ul>

Přehled posterů Agilent Technologies z ASMS 2025 zaměřených na LC/QQQ

Přehled posterů Agilent ASMS 2025 zaměřených na LC/TOF

Na konferenci <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/events/679">ASMS 2025 </a>představila společnost Agilent Technologies osm posterů, které zdůrazňovaly všestrannost, robustnost a inovativnost jejích LC/MS systémů pro farmaceutické a analytické aplikace. Tyto postery pokrývaly širokou škálu témat – od profilování glykosylace monoklonálních protilátek a sledování nečistot v agonistech GLP-1 až po udržitelnou analýzu oligonukleotidů s minimálním použitím PFAS.Několik posterů představilo hmotnostní detektory s jedním kvadrupólem <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/1961">Agilent Pro iQ a Pro iQ Plus</a>, které demonstrovaly své schopnosti v oblasti kvantifikace peptidů, monitorování nečistot a dlouhodobé robustnosti v reálných vzorcích. K řešení výzev v oblasti kontroly kvality, analýzy nečistot a udržitelnosti metod byly použity pokročilé techniky, jako jsou <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/library?instrumentationItems=39-31-43&amp;mainauthorItems=10">2D-LC/MS</a>, microflow chromatografie a spektrální dekonvoluce.V níže uvedených souhrnech najdete klíčové informace z každého posteru.<h5>1. What information can a single quadrupole mass spectrometer provide for biopharmaceutical characterization of monoclonal antibodies?</h5><ul><li>PDF ke stažení <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/ps_infinitylab_pro_iq_plus_glycosylation_asms_2025_mp_018_en_agilent_7c70f65a51.pdf">ZDE</a></li><li>Tento poster zdůrazňuje použití systému <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/1961">Agilent InfinityLab Pro iQ Plus LC/MS</a> pro profilování glykosylace monoklonálních protilátek (<a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/library?search=mAb">mAbs</a>). Demonstruje schopnost systému přesně detekovat glykoformy na úrovni intaktních a podjednotek s vynikající spektrální kvalitou a rozšířeným hmotnostním rozsahem, což jej činí vhodným pro rutinní QA/QC v biofarmaceutickém průmyslu.</li></ul><h5>2. Accurate Mass Full Spectral Monitoring and Analysis of Both the Analyte and Reference Standard with Ion Chromatography - Mass Spectrometry</h5><ul><li>PDF ke stažení <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/ps_ion_chromatography_iq_asms_2025_thp_091_en_agilent_4a1cf5e515.pdf">ZDE</a></li><li>Kombinací <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/572">Metrohm IC</a> s <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/162">Agilent iQ MS</a> a dekonvolucí MassWorks dosahuje tato metoda přesného hmotnostního a spektrálního rozlišení analytů a značených interních standardů. Systém rozlišuje koeluující ionty, jako jsou HSO₄⁻ a ClO₄⁻, s přesností pod mDa, čímž IC-MS zpřístupňuje komplexní analýzu matric.</li></ul><h5>3. Dynamically Adjusted Instrument Settling Delay Prior to Data Acquisition</h5><ul><li>PDF ke stažení <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/ps_pro_iq_business_intelligence_asms_2025_tp_059_en_agilent_87c279d687.pdf">ZDE</a></li><li>Tato studie představuje nový algoritmus pro optimalizaci zpoždění mezi měřeními v MS s jedním kvadrupólem na základě chování iontů v reálném čase. Snižuje zbytečné prostoje a zároveň zajišťuje integritu dat při různých parametrech sběru, jako jsou m/z, napětí a polarita, což umožňuje rychlejší a chytřejší sběr dat.</li></ul><h5>4. A Simple Cost-Effective Determination of Histamines in Gentamicin by HPLC/MS</h5><ul><li>PDF ke stažení <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/ps_pro_iq_histamines_gentamicin_asms_2025_wp_082_en_agilent_22cbb5fa48.pdf">ZDE</a></li><li>Pomocí systému Agilent Pro iQ Plus LC/MS umožňuje tato metoda přesnou a cenově dostupnou detekci histaminů v antibiotických přípravcích gentamicinu. Bez nutnosti derivatizace a s vynikající linearitou nabízí robustní a přístupný screeningový přístup pro farmaceutická zařízení kontroly kvality.</li></ul><h5>5. Small-Footprint Capillary UHPLC/MS Technology Significantly Reducing Consumption of PFAS Containing Modifiers for Fast and High-Resolution Separation of Synthetic Oligonucleotides</h5><ul><li>PDF ke stažení <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/ps_pro_iq_plus_hfip_tea_asms_2025_mp_230_en_agilent_bf1dfa9cbb.pdf">ZDE</a></li><li>Tato práce představuje mikroflow metodu LC/MS využívající Axcend Focus LC a Agilent Pro iQ Plus, která snižuje spotřebu rozpouštědel HFIP a TEA o &gt;99,5 %. Metoda zachovává rozlišení a hmotnostní přesnost pro oligonukleotidové standardy a terapeutika, jako je Givosiran, a podporuje ekologické analytické pracovní postupy.</li></ul><h5>6. Monitoring Stability and Impurity Products of GLP-1 Agonists Using a Novel Single Quadrupole LC/MS</h5><ul><li>PDF ke stažení <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/ps_pro_iq_plus_impurity_profiling_glp_1_agonists_asms_2025_tp_644_en_agilent_d2753145cc.pdf">ZDE</a></li><li>Stabilita semaglutidu a tirzepatidu byla hodnocena za různých pH podmínek pomocí systému Pro iQ Plus. Nečistoty související s oxidací byly účinně detekovány s vysokou citlivostí, což podporuje dodržování regulačních požadavků na prahové hodnoty nečistot a dokazuje vhodnost systému pro kontrolu kvality peptidů.</li></ul><h5>7. Evaluation of System Robustness for a High Performance Small Form Factor LC/MS Single Quadrupole System</h5><ul><li>PDF ke stažení <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/ps_pro_iq_plus_robustness_asms_2025_mp_565_en_agilent_909f232894.pdf">ZDE</a></li><li>Tento poster představuje odolnost systému Agilent Pro iQ Plus při více než 800 injekcích plazmy. Navzdory složitosti vzorků systém poskytoval stabilní retenční časy a odezvu signálu s &lt;3 % RSD po korekci interním standardem, což potvrzuje jeho použitelnost pro rutinní testování s vysokou propustností.</li></ul><h5>8. Characterization of Synthetic Peptide Drug and Impurities using High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) and Liquid Chromatography/Mass Spectrometry (LC/MS)</h5><ul><li>PDF ke stažení <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/ps_2d_lcmsd_semaglutide_impurity_profiling_asms_2025_tp_629_en_agilent_d0ca885ecb.pdf">ZDE</a></li><li>Pomocí <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/1167">2D-LC</a>/MS charakterizuje tato studie API semaglutid a liraglutid a jejich nečistoty. Pracovní postup kombinuje separaci pomocí UV s podmínkami vhodnými pro MS, aby se potvrdila neporušenost hmot, agregáty a složení aminokyselin, a poskytuje tak komplexní řešení pro profilování peptidových léčiv.</li></ul>

Přehled posterů Agilent ASMS 2025 zaměřených na LC/SQ

Webináře

Aplikace

Akademie

Osobnosti

Plasty

Životní prostředí

Potraviny

Vody

Zdraví

Přednáška

Vědecký článek

Rozhovor

Toxikologie

Popularizace

Věda a výzkum

Software

Covid-19

Kariéra

Poster

Článek

Laboratoře

Různé

Produkt

Video

Nejbližší akce

Typ novinky

Zaměření

Je autorizovaným distributorem společnosti Agilent Technologies pro Českou republiku v oblastech chromatografie (GC, HPLC, UHPLC, kapilární elektroforéza) a hmotnostní spektrometrie (GC/MS, LC/MS, CE/MS), disolučních aparátů, molekulární (UV-Vis, UV-Vis-NIR, fluorescence, FTIR analyzátory a mikroskopy) a atomové spektroskopie (ICP-OES, ICP-MS, AAS), a v neposlední řadě také v oblasti molekulární biologie a genomiky (analýza nukleových kyselin a proteinů, microarray skenery a skla, PCR & RT-PCR, qPCR, řešení pro NGS, reagencie pro mutagenezi a klonování, sondy FISH a další).

Altium International

Naším posláním je šířit informace o produktech firmy Shimadzu v oblasti instrumentálních analytických přístrojů, přístrojů pro testování materiálů a speciálních přístrojů pro life science, jejich prodej a následně - instalace, zaškolení, záruční a pozáruční servis, ověřování a validace a aplikační podpora.

SHIMADZU Handels GmbH - organizační složka

Watrex Praha je přední český výrobce a distributor systémů a příslušenství zejména pro kapalinovou chromatografii. Distribuujeme produkty mnoha chemických firem a máme vlastní řadu systémů za rozumnou cenu.

Watrex Praha

Moderní elektroanalytické metody (Cena Metrohm 2026)

ALS Kurz Analýzou HYDRAULICKÝCH a TURBÍNOVÝCH olejů k větší efektivitě výroby

Praktický kurz ŠKOLA HPLC

Big Scale, Big Wins: Prep Chromatography Explained

High-throughput stability screening strategies for antibody formulation

PFAS in Food & Food Contact Material