Včela medonosná (Apis mellifera L.) je hospodářsky velmi využívána, a to především za účelem opylování rostlin a zisku včelích produktů. Současný nárůst mortality včelstev vzbuzuje pozornost i u široké veřejnosti. Včely přitom nejsou ohroženy pouze zjevnými faktory, jako jsou nemoci (např. varoáza, akarapidóza, virus deformovaných křídel, mor včelího plodu) a škůdci (např. zavíječ voskový, včelomorka obecná). Důležitou roli zde sehrává i rozsáhlá urbanizace a industrializace. Včasná identifikace faktorů vedoucích k jejich úmrtí umožňuje rychlejší dekontaminace prostředí a s tím spojenou záchranu dalších živočichů či zábranu šíření znečištěných včelích produktů mezi obyvatelstvo.
Pesticidy ze skupiny organofosfátů a karbamátů patří mezi tzv. blokátory acetylcholinesterázy (AChE). AChE slouží k rozkladu neurotransmiteru acetylcholinu (ACh), kdy je vazebné místo AChE acetylováno za vzniku volného cholinu a následně hydrolyzováno za vzniku kyseliny octové. Při reakci enzymu s organofosfáty a karbamáty však dochází k tvorbě mnohem stabilnějšího, obtížně hydrolyzovatelného produktu, což vede k akumulaci ACh v synaptické štěrbině. Ta způsobuje vysokou a dlouhodobou stimulaci nervových buněk vedoucí k třesu, křečím, hyperaktivitě, ztrátě koordinace, paralýze a smrti.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/RADANAL_Vzorky_mrtvych_tel_vcel_pro_analyzu_pesticidu_b11cc3e536/RADANAL-Vzorky-mrtvych-tel-vcel-pro-analyzu-pesticidu.jpg" alt="RADANAL: Vzorky mrtvých těl včel pro analýzu pesticidů"/>
Představujeme analytickou metodu pro monitorování organofosfátů na bázi UPLC-MS/MS. Acefát, dimethoát, diazinon, chlorfenvinfos, chlorpyriphos byly chromatograficky odděleny pomocí chromatografické kolony Ascentis Expres C18 (5 cm x 2,1 mm, 2μm, Supelco Analytical) s předkolonou Ascentis® Expres C18 (0,5 cm x 2,1 mm, 2 μm, Supelco Analytical) a gradientovou elucí mobilních fází vodného roztoku mravenčanu amonného a roztoku mravenčanu amonného v acetonitrilu. Pro hmotnostní spektrometrickou detekci ionizace elektrosprejem a byl použit režim selektivního monitorování reakce (SRM). Jednotlivé kroky vyvinuté metody byly optimalizovány. Všechno data byla statisticky vyhodnocena.
<h3>PŘÍPRAVA VZORKU - QUEChERS metoda</h3>
<ul>
<li>Rozdrcení mrtvého těla včely</li>
<li>Přidání extrakčního činidla acetonitril:hexan (7:2)</li>
<li>Třepání - 6 minut, 600 ot./min</li>
<li>Vysolení - přidání pufrovacíchsolí: (200 mg MgSO₄, 50 mg NaCl, 25 mg C₆H₆Na₂O₇•1,5 H₂O, 50 mg C₆H₅Na₃O₇•2 H₂O)</li>
<li>Třepání - 5 minut, 600 ot./min</li>
<li>Odstředění - 5 minut, 10 000 ot./min</li>
<li>Odebrání vrstvy acetonitrilu nad sedimentem biologické matrice</li>
<li>Přidání 60 mg sorbentu C18/PSA k vrstvě acetonitrilu</li>
<li>Třepání - 2 minut, 600 ot./min</li>
<li>Odstředění - 5 minut, 11 000 ot./min</li>
<li>Supernatantová filtrace - nylon, 0,22 μm</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/RADANAL_Priprava_vzorku_vcel_pro_analyzu_pesticidu_pomoci_LCMSMS_QUE_Ch_ERS_metoda_aa2f7264ce/RADANAL-Priprava-vzorku-vcel-pro-analyzu-pesticidu-pomoci-LCMSMS-QUEChERS-metoda.jpg" alt="RADANAL: Příprava vzorků včel pro analýzu pesticidů pomocí LC/MS/MS - QUEChERS metoda"/>
<h3>UPLC-MS/MS</h3>
Vysokoúčinný kapalinový chromatograf <a href="https://lcms.cz/library?search=ultimate%203000&amp;mainauthorItems=3&amp;instrumentationItems=27">UltiMate 3000 Binary RSLC</a> ve spojení s hmotnostním spektrometrem s trojitým kvadrupólem <a href="https://lcms.cz/library?search=quantum%20access%20max&amp;mainauthorItems=3&amp;instrumentationItems=31-32-35">TSQ Quantum Access Max</a>, vybaveného ionizací elektrosprejem H-ESI (Thermo Fisher Scientific, USA) 
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/RADANAL_Chromatograficky_zaznam_8848cbaeb2/RADANAL-Chromatograficky-zaznam.jpg" alt="RADANAL: Chromatografický záznam"/>
Kolona: Ascentis Expres C18 (5 cm x 2,1 mm, 2 μm, Supelco Analytical) s ochrannou kolonou Ascentis® Expres C18 (0,5 cm x 2,1 mm, 2 μm, analytické Supelco) 
Mobilní fáze A: 25 µM vodný roztok mravenčanu amonného 
Mobilní fáze B: 25 µM roztok mravenčanu amonného v acetonitrilu 
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/RADANAL_Hmotnostni_spektrum_Diazinon_150b7d0002/RADANAL-Hmotnostni-spektrum-Diazinon.jpg" alt="RADANAL: Hmotnostní spektrum Diazinon"/>
<h5>Parametry MS:</h5>
<ul>
<li>Doba cyklu: 0,5 s </li>
<li>Tlak kolizního plynu: 1,5 mTorr Teplota kapiláry: 325 ° C </li>
<li>Teplota odpařovací jednotky: 300 ° C </li>
<li>Tlak sušícího plynu: 45 arb unites </li>
<li>Tlak čistícího plynu: 2 arb unites</li>
<li>Hodnota sprejového napětí: 3300 V</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/RADANAL_Tabulka_vysledku_analyzy_pesticidu_vzorku_vcel_pomoci_UPLC_MSMS_84878db14b/RADANAL-Tabulka-vysledku-analyzy-pesticidu-vzorku-vcel-pomoci-UPLC-MSMS.jpg" alt="RADANAL: Tabulka výsledků analýzy pesticidů vzorků včel pomocí UPLC-MS/MS"/>

Využití LC-MS pro ochranu opylovačů

Webináře

Aplikace

Akademie

Osobnosti

Plasty

Životní prostředí

Potraviny

Vody

Zdraví

Přednáška

Vědecký článek

Rozhovor

Toxikologie

Popularizace

Věda a výzkum

Software

Covid-19

Kariéra

Článek

Laboratoře

Různé

Produkt

Video

Poster

Nejbližší akce

Typ novinky

Zaměření

Je společnost zabývající se výzkumem a vývojem, prodejem a aplikační podporou chromatografických metod včetně chromatografického spotřebního materiálu. Společnost je organizátorem mezinárodní konference INDC a konference VITATOX.

RADANAL

Moderní elektroanalytické metody (Cena Metrohm 2026)

ALS Kurz Analýzou HYDRAULICKÝCH a TURBÍNOVÝCH olejů k větší efektivitě výroby

Praktický kurz ŠKOLA HPLC

Big Scale, Big Wins: Prep Chromatography Explained

High-throughput stability screening strategies for antibody formulation

PFAS in Food & Food Contact Material