Obecná SPE metoda dle retenčního mechanismu

Každý SPE mechanismus/fáze má obecný soubor doporučených rozpouštědel, se kterými lze extrakci provést. Použijte rozpouštědla/podmínky pH uvedené níže, objemy stanovené v sekci Metod a Výběr objemu sorbentu.

SPE metoda pro reverzní fázi

Sorbent - SDB-L, C18, C8, PH, CN, X, XL

• Vlastnosti analytu: Nízká až střední polarita (nebo nepolární) Hydrofóbní neutralizovaný/nenabitý - Léčiva, pesticidy, herbicidy
• Vzorek/Matrix: Vodné, ředěné pufrem - Biologicé roztoky, voda
• Přípravný krok
  • Solvace – polární organická rozpouštědla - Metanol
  • Ekvilibrace – vodné, pufry - Voda nebo pufr
• Promývací krok: Vodné pufry s 5 až 50 % polární organickou příměsí - Metanol:Voda (5:95)
• Eluční krok: Polární nebo nepolární organická rozpouštědla s nebo bez vody, pufru a/nebo silné kyseliny či zásady - Metanol:Acetontril (50:50)

SPE metoda pro normální fázi

Sorbent - Silica, Florisil®, NH₂, CN

• Vlastnosti analytu: Sloučeniny střední až vysoké polarity (neutralizované/nenabité) – Pesticidy
• Vzorek/Matrix: Nepolární organická rozpouštědla nebo středně polární organická rozpouštědla – Hexan, chloroform, petrolether, toluen nebo methylenchlorid
• Přípravný krok
  • Solvatace – polární organická rozpouštědla (volitelné) – Metanol (volitelné)
  • Ekvilibrace – rozpouštědlo vzorku/matrice – Hexan nebo chloroform
• Promývací krok: Nepolární organická rozpouštědla s nízkou koncentrací (1 až 5 %) organického rozpouštědla střední až nízké polarity – Hexan s 1 % THF, ethylacetát, aceton, acetonitril nebo IPA
• Eluční krok: Nepolární organická rozpouštědla obsahující vyšší koncentraci (5 až 50 %) středně až vysoce polárních organických rozpouštědel – Hexan s 10 % THF, ethylacetát, aceton, acetonitril nebo IPA

SPE metoda pro silný iontoměnič

Sorbet: Aniontová výměna: Screen-A, SAX, X-A, X-AW, XL-A, XL-AW
Kationtová výměna: Screen-C, SCX, X-C, X-CW, XL-C, XL-CW

• Vlastnosti analytu: Ionizované/nabité látky – Aniontová výměna: Kyselý analyt
• Kationtová výměna: Bazický analyt
• Vzorek/Matrix: Vodný; Pufry s nízkou iontovou silou (> 30 mM), pH upraveno – Biologické tekutiny s pufrem
• Přípravný krok 
  • Kondicionace – polární organická rozpouštědla – Metanol
  • Ekvilibrace – pufry s nízkou iontovou silou, pH upraveno – 25 mM Tris-OAc, pH 7
• Promývací krok: Vodné pufry s nízkou koncentrací solí s nebo bez organického rozpouštědla 
  • Aniontová výměna 
    • Pufr pH 7: Metanol (50:50)
  • Kationtová výměna
    • Pufr pH 6
    • 1M kyselina octová
    • Metanol
• Eluční krok
  • Neutralizujte náboj na slabém aniontu nebo kationtu
  • Zvyšte iontovou sílu a koncentraci protiiontů
  • Přidejte silný vytěsňovač protiiontů 
    • Aniontová výměna – Hexan:ethylacetát (75:25) + 1 % ledová kyselina octová
    • Kationtová výměna – Methanol + 5 % NH₃

POZNÁMKA: Toto jsou obecné výchozí podmínky. Pro další pomoc se prosím obraťte na svého technického poradce Phenomenex.