Jaký byl odborný seminář HPLC a kvadrupólové LC/MS od Shimadzu na PřF UK

Chtěli bychom se s vámi podělit o shrnutí 2. ročníku odborného edukačního semináře LCMS SHIMADZU na PřF UK](https://lcms.cz/events/435), který byl plný zajímavých diskuzí, praktických cvičení v laboratořích a užitečných informací.

Během třech dnů jsme se společně tématicky zaměřili na HPLC a LC/MS systémy na bázi kvadrupolů a probírali jsme klíčové koncepty, teorii a praxi v této oblasti. Prezentace kolegů z PřF UK byly plné cenných informací a věříme, že Vás inspirovaly i k hlubšímu zamyšlení nad principy a procesy v oblasti těchto analytických technik.

Diskuze a cvičení, které probíhaly během semináře, byly živé a plné zajímavých otázek a názorů a doufáme, že jste si odnesli nové poznatky a inspiraci, kterou budete moci využít ve své kařdodenní činnosti.

Shimadzu: Úvod do HPLC (Petr Kozlík, PřF UK)

Pokud máte další otázky ohledně semináře, materiálů, dalších školení nebo kurzů, neváhejte nás kontaktovat.

Zároveň bychom Vás tímto velmi rádi již nyní pozvali na chystaný hardwarový seminář, který bude zaměřen na téma: základní uživatelská údržba a správná praxe s HPLC systémy. Bude se tedy jednat o více detailní a proktický seminář určený především SHIMADZU uživatelům.

Pokud o tento seminář již nyní jevíte zájem, neváhejte nám napsat a prozatím Vás nezávazně zapíšeme do našeho seznamu úřastníků. Plánovaný termín tohoto semináře je leden/únor 2024.

Děkujeme za váš zájem a těšíme se na další spolupráci a další podobné události.

Za celý Shimadzu tým,

Mgr. Ondrej Hillmich (Business specialist, [email protected] , +420 734 246 627)

Shimadzu: Workshop (Petr Kozlík a Tomáš Křížek, PřF UK)

Co jste se mohli naučit v teoretické části?

Úvod do HPLC

• Petr Kozlík (PřF UK)

• Chromatografie

  • MICHAIL SEMJOVIČ CVĚT
  • Arne Wilhelm Kaurin Tiselius
  • Archer John Porter Martin a Richard Laurence Millington Synge
  • Csaba Horváth

• Chromatogram

• Rozlišení píků

• Symetrie píků

• Teorie chromatografického patra

• Výškový ekvivalent teoretického patra

• Van Deemterova rovnice

• Mimokolonové příspěvky k rozšiřování zón

• HPLC vs. UHPLC

• Isokratická a gradientová eluce

Shimadzu: Úvod do HPLC (Petr Kozlík, PřF UK)

Separační systémy LC a stacionární fáze dostupné na trhu

• Petr Kozlík (PřF UK)

• Systém s normálními fázemi (NP-HPLC)

• Systém s reverzními fázemi (RP-HPLC)

• Iontově výměnná chromatografie

• Iontově párová chromatografie

• Hydrofilní interakční kapalinová chromatografie ((HILIC))

• Hydrofóbní interakční kapalinová chromatografie

• Micelární kapalinová chromatografie

• Afinitní chromatografie

• Molekulová vylučovací chromatografie

• Chirální chromatografie

Shimadzu - Separační systémy LC a stacionární fáze dostupné na trhu (Petr Kozlík, PřF UK).jpg

Praktické aspekty HPLC a vývoj HPLC metody

• Petr Kozlík (PřF UK)

• Udržet HPLC systém v dobrém stavu

• Minimalizace finančních nákladu na opravu HPLC

• Ušetřit čas při řešení problému

• Porozumění činnosti HPLC

• Vývoj chromatografické metody

  • Definování cíle metody
  • Informace o vzorku
  • Výběr vhodného detektoru
  • Výběr LC metody
  • Prvotní experimenty se standardy
  • Reálné vzorky; úprava vzorku
  • Finální optimalizace a řešení problémů
  • Validace metody

Shimadzu: Praktické aspekty HPLC a vývoj HPLC metody (Petr Kozlík, PřF UK)

„Troubleshooting“ a trendy v HPLC

• Petr Kozlík (PřF UK)

• Zvýšení účinnosti a selektivity separace

• Rychlá separace

• Zelená chemie

• Citlivost

Běžně se vyskytující problémy

• Problém s tlakem – nižší, vyšší, kolísající
• Problém se základní linií – šum, drift, cyklický průběh
• Problémy retenčního času – fluktuace retenčního času
• Problém s chromatografickým píkem – žádný pík, dvojitý pík, nesymetrický pík
• Problém s chromatogramem – negativní píky, jíný počet píků

Shimadzu: Troubleshooting a trendy v HPLC (Petr Kozlík, PřF UK)

Spojení LC-MS (úvod do MS – ionizační zdroje, analyzátory)

• Petr Kozlík (PřF UK)

• Ionty v MS

• Rozlišení MS

• Kalibrace instrumentu

• Iontový zdroj

  • Elektronová ionizace (EI)
  • Ionizace za atmosférického tlaku
  • Chemická za atmosférického tlaku (APCI)

Hmotnostní analyzátory

• Kvadrupólový analyzátor
• Průletový analyzátor
• Iontová past
• Magnetický sektorový analyzátor
• Orbitrap
• Iontová cyklotronová resonance

Shimadzu: Jak hledat ty správné informace od Shimadzu - Portály LabRulez - Největší on-line zdroj informací v oblasti analytické chemie (Ivo Novotný, LabRulez)

LC-QqQ

• Petr Kozlík (PřF UK)

• Full scan

• SIM

• Sken produktových iontů

• Sken prekurzorových iontů

• Sken neutrálních ztrát

• SRM

• Volba LC-MS (QqQ) podmínek

• Kvantifikace pomoci LC-QqQ

• Nalezení vhodných MRM přechodů

• LC/MS rady a tipy

• Kontaminace a snížení odezvy analytů

Shimadzu:- SICRIT iontový zdroj – Nová dimenze v LCMS (Jan Buček, Plasmion)