Vícemodální HPLC fáze v nabídce společnosti HPST (záznam přednášky)

Multimodální kapalinová chromatografie založená na kombinaci dvou a více interakčních módů v jedné koloně je univerzální metodou pro separaci obtížně stanovitelných látek pomocí klasické HPLC.

V nabídce společnosti HPST bychom Vám rádi představili:

• Imtakt – Scherzo C18 mixed-mode kolony, které využívají současnou separaci na reverzní fázi v kombinaci s výměnou aniontů a kationtů a normální fází
• SEPAX HP-SCX a SAX využívající iontovou výměnu s hydrofobní interakcí
• SIELC řady PRIMESEP, jejichž jednotlivé typy analogicky kopírují použití činidel pro párování iontů. Jsou tak dostupné v modifikacích stacionární fáze s různou silou iontových skupin pro katexový režim (Primesep A, Primesep 100, Primesep 200) a pro režim aniontové výměny (Primesep B). Primesep SWITCHTM navíc umožňuje přepínat retenci neutrálních a ionizovatelných sloučenin změnou pH mobilní fáze

Vícemodální kapalinová chromatografie

Metoda využívající dva a více různých mechanismů k současnému dělení látek různé povahy v jednom procesu a na jedné koloně.

Výhody:

• Podle struktury: na bázi oxidu křemičitého, na polymerní bázi, hybridní a monolitické
• Současná separace polárních i nepolárních analytů
• Bez použití činidel iontových párů: výhodné pro následné analýzy MS
• Nejčastěji kombinace RPLC, HILIC a IEC

Vícemodální fáze IMTAKT

Reverzní fáze + Měnič aniontů (anex) + Měnič kationtů (katex)

• Současná separace kationtů i aniontů
• ODS (octadecyl silica , C18) + měnič iontů (+ anion + kation ligand)
• 3 druhy s odlišnou kapacitou iontové výměny
• Kompatibilní s LC MS bez použití párových činidel
• 3 µm částice, 13 nm póry

HPST: Vícemodální fáze IMTAKT - Reverzní fáze + Měnič aniontů (anex) + Měnič kationtů (katex)

Scherzo C18 – SS-C18, SM-C18, SW-C18

Separační mód / Stacionární fáze / Vlastnosti

• Reverzní fáze / Oktadecyl / Zvýšení podílu organického rozpouštědla snižuje retenci
• Výměna aniontů / Kation / Zvýšení iontové síly (c soli nebo kyseliny) snižuje retenci kyselých sloučenin. Obecně snížení pH zvyšuje retenci
• Výměna kationtů / Anion / Zvýšení koncentrace soli snižuje retenci bazických sloučenin, SM-C18 zadržuje více se vzrůstajících pH, SS-C18 a SW-C18 při nižším pH
• Normální fáze / Anion-Kation / Polární látky, které nemohou být zadrženy 100% vodným eluentem, mohou být zachyceny použitím > 50% organickým rozpouštědlem pomocí elektrostatických sil

HPST: HPLC kolony Imtakt Scherzo C18 – SS-C18, SM-C18, SW-C18

• Všechny zadržují bázické (1) i kyselé látky (2)

• SS-C18 > SM-C18 > SW-C18

• Retenci ovlivňuje disociace sloučenin, pH mobilní fáze – switched retention

• Neutrální sloučeniny mají stejnou retenci

• Kolona:** Scherzo SS-C18, Scherzo SM-C18, Scherzo SW-C18

• ID kolony:** 1 mm, 1.5 mm, 2 mm, 3 mm, 4.6 mm, 6 mm, 10 mm

• Délka kolony (mm):** 10, 20, 30, 50, 75, 100, 150, 250, 500

• Předkolona:** Držák kolonky předkolonka

HPST: Vícemodální HPLC kolony Imtakt Scherzo C18 – SS-C18, SM-C18, SW-C18

Příprava mobilní fáze pro Scherzo C18

Izokratická eluce

• Voda/ACN/HCOOH = x/y/0.1 - Kyselé pH eluentu
• 50 mM octan amonný/ACN = x/y ( x + y = 100) - Neutrální pH eluentu

Gradientová eluce

Gradient s kyselinou a organickým rozpouštědlem

• A) voda/HCOOH = 100/0.1
• B) voda/ACN/HCOOH = 30/70/0.5

Gradient se solí a organickým rozpouštědlem

• A) 10mM octan amonný
• B) 100mM octan amonný/ACN = 30/70

Gradient s pH, iontovou silou a organickým rozpouštědlem

• A) voda/HCOOH = 100/0.1
• B) 100mM mravenčan amonný/ACN = 30/70

Aplikace SS-C18 – nitrosaminy, 4-methylimidazol v Coca-cole, amezinium methysulfát

Aplikace SM-C18 – HALS, antikoagulační léčiva, aminokyseliny a peptidy

Aplikace SW-C18 – antibiotika, neuropeptidy, antipsychotika

Vícemodální fáze SIELC

Kyselé

Kolony se záporně nabitými funkčními skupinami díky vloženému aniontovému párovacímu činidlu.

• Primesep A – nejsilnější kyselá fáze.
• Primesep 100 – silná kyselá fáze.
• Primesep 200 – středně kyselá fáze.

Zásadité

Kolony s kladně nabitými funkčními skupinami.

• Primesep B - silně bazické kolony pro použití s roztoky TFA, kyseliny fosforečné nebo chloristé v MF.
• Primesep B2 - slabě bazická kolona pro roztok pufrovaný octanem amonným.

HPST: Vícemodální HPLC fáze SIELC

Komplexní

Kolony s jedinečnou bezkonkurenční selektivitou.

• Primesep C - kombinované vlastnosti reverzní fáze a komplexu pro interakci s aminy, sulfoniovými, fosfoniovými a kovovými ionty.

Fenylové

Tři interakce v rámci jedné kolony: reverzní fáze / pí-pí / silná kationtová výměna

• Primesep P - vhodná pro separaci strukturních izomerů aromatických sloučenin.

Kationtově-výměnný typ kolony / Cca 50% ionizovaných kyselých skupin při přechodovém pH / Separace bazických sloučenin

• Primesep 500 / pH = 5.0 / Silné kyseliny, dibáze, polybáze
• Primesep C / pH = 3.5 / Silné kyseliny, dibáze
• Primesep 200 / pH = 2.0 / Silné kyseliny, dibáze
• Primesep P / pH = 1.0 / Slabé a střední aromatické báze
• Primesep 100 / pH = 1.0 / Slabé a střední báze, AA, kovy
• Primesep A / Ionizované v jakémkoliv pH / Slabé báze, AA, kovy

SIELC Primesep A

Primesep A

• ID: 22 mm, 10 mm, 4.6 mm, 3.2 mm, 2.1 mm, 1 mm, 0.5 mm, 0.25 mm

• Délka: 250 mm, 150 mm, 100 mm, 50 mm, 25 mm, 10 mm

• Částice: 10 μm, 5 μm

• Póry: 100 A

• Taurin

• Carbofuran

Primesep 100

• ID: 22 mm, 10 mm, 4.6 mm, 3.2 mm, 2.1 mm, 1 mm, 0.5 mm, 0.25 mm

• Délka: 250 mm, 150 mm, 100 mm, 50 mm, 25 mm, 10 mm

• Částice: 10 μm, 5 μm, 3 μm, 2.7 μm (pevné jádro)

• Póry: 100 A

• Oseltamivir

• Amoxicillin/Cephalexin

HPST - HPLC kolony SIELC Primesep A.jpg

Primesep 200

• ID: 22 mm, 10 mm, 4.6 mm, 3.2 mm, 2.1 mm, 1 mm, 0.5 mm, 0.25 mm

• Délka: 250 mm, 150 mm, 100 mm, 50 mm, 25 mm, 10 mm

• Částice: 10 μm, 5 μm

• Póry: 100 A

• Perindopril

• Metoprolol

Primesep 500

• ID: 22 mm, 10 mm, 4.6 mm, 3.2 mm, 2.1 mm, 1 mm, 0.5 mm, 0.25 mm

• Délka: 250 mm, 150 mm, 100 mm, 50 mm, 25 mm, 10 mm

• Částice: 10 μm, 5 μm

• Póry: 100 A

• Alkysulfonové kyseliny

• Glukosamin

SIELC Primesep B

Primesep B

• ID: 22 mm, 10 mm, 4.6 mm, 3.2 mm, 2.1 mm, 1 mm, 0.5 mm, 0.25 mm

• Délka: 250 mm, 150 mm, 100 mm, 50 mm, 25 mm, 10 mm

• Částice: 10 μm, 5 μm

• Póry: 100 A

• β-OH-β-methybutyrové kyseliny

• Akrylové kyseliny

Primesep B2

• ID: 22 mm, 10 mm, 4.6 mm, 3.2 mm, 2.1 mm, 1 mm, 0.5 mm, 0.25 mm

• Délka: 250 mm, 150 mm, 100 mm, 50 mm, 25 mm, 10 mm

• Částice: 10 μm, 5 μm

• Póry: 100 A

• Alachlor

• Carbofuran

HPST: HPLC kolony SIELC Primesep B

Primesep AB

• ID: 22 mm, 10 mm, 4.6 mm, 3.2 mm, 2.1 mm, 1 mm, 0.5 mm, 0.25 mm

• Délka: 250 mm, 150 mm, 100 mm, 50 mm, 25 mm, 10 mm

• Částice: 10 μm, 5 μm, 3 μm, 2.7 μm (pevné jádro)

• Póry: 100 A

• Jodid

• Escitalopram

Primesep SB

• ID: 22 mm, 10 mm, 4.6 mm, 3.2 mm, 2.1 mm, 1 mm

• Délka: 250 mm, 150 mm, 100 mm, 50 mm, 25 mm, 10 mm

• Částice: 10 μm, 5 μm

• Póry: 100 A

• Epinefrin a Epinefrin sulfonát

• Paraquat a Diquat

SIELC Primesep C, D, N a P

Primesep C

• ID: 22 mm, 10 mm, 4.6 mm, 3.2 mm, 2.1 mm, 1 mm, 0.5 mm, 0.25 mm

• Délka: 250 mm, 150 mm, 100 mm, 50mm, 25 mm, 10 mm

• Částice: 10 μm, 5 μm

• Póry: 100 A

• Desmosin

• Taurolidin

Primesep D

• ID: 22 mm, 10 mm, 4.6 mm, 3.2 mm, 2.1 mm, 1 mm, 0.5 mm, 0.25 mm

• Délka: 250 mm, 150 mm, 100 mm, 50 mm, 25 mm, 10 mm

• Částice: 10 μm, 5 μm

• Póry: 100 A

• Josamycin, Marbofloxacin, Norfloxacin

HPST - HPLC kolony SIELC Primesep C, D, N a P.jpg

Primesep N

• ID: 22 mm, 10 mm, 4.6 mm, 3.2 mm, 2.1 mm, 1 mm

• Délka: 250 mm, 150 mm, 100 mm, 50 mm, 25 mm, 10 mm

• Částice: 10 μm, 5 μm

• Póry: 300 A, 100 A

• GABA

• Ritonavir, Ribavirin

Primesep P

• ID: 22 mm, 10 mm, 4.6 mm, 3.2 mm, 2.1 mm, 1 mm, 0.5 mm, 0.25 mm

• Délka: 250 mm, 150 mm, 100 mm, 50 mm, 25 mm, 10 mm

• Částice: 10 μm, 5 μm

• Póry: 100 A

• Aromatické boronové kyseliny

Vícemodální fáze SEPAX

HP-SCX

• kationtové/bazické sloučeniny a sloučeniny obsahující dusík
• pH stabilita 1.5 – 8
• rozšíření z tradiční SCX (separace kationtových a dusíkatých sloučenin) na slabé kationtové a neutrální organické molekuly
• separace analytů aminů a polyaminů (alkaloidy, peptidy, kodein a přísady proti kašli a nachlazení)

HP-SAX (II)

• separace různých organických sloučenin - aromatické nebo alifatické karboxylové kyseliny, kyseliny sulfonové a biologické vzorky nukleotidů a cukrů
• pH stabilita 1.5 – 8
• Pesticidy, herbicidy, farmaceutika obecně