Shim-pack Arata LC column

Význam tématu

Analytická separace zásaditých sloučenin je často komplikována nežádoucími interakcemi se silanoly povrchu křemičitého gelu, což vede k neostrým píkům, dlouhému času ekvilibrace a variabilním retenčním časům. Shim-pack Arata C18 kolony přinášejí novou chemii povrchu se selektivní blokací interakcí se silanoly a zajišťují výjimečnou symetrii píků pro zásadité i kyselé látky současně.

Cíle a přehled studie / článku

Hlavním cílem bylo ověřit chromatografické vlastnosti Shim-pack Arata C18 kolony a porovnat je s běžnými ODS a hybridními kolonami v analýze směsí základních a kyselých léčiv, testu čistoty, přenosu metod, reprodukovatelnosti šarží a analýze peptidů za různých podmínek mobilní fáze.

Použitá metodika a instrumentace

• LC systémy Shimadzu Nexera X2 (SPD-20A semi-micro, M30A STD cell)
• Kolony: Shim-pack Arata C18 (2.2 µm a 5 µm, různé dimenze), Hybrid C18, Core shell C18, Shim-pack XR-ODSⅡ
• Mobilní fáze: 0.1 % HCOOH nebo H3PO4 ve vodě a acetonitrilu; gradientní a izokratické režimy
• Detekce UV na 214–226 nm, teplota kolony 40 °C, objem injekce 1–5 µL

Hlavní výsledky a diskuse

• Pro směs čtyř zásaditých a pěti kyselých léčiv při 0.1 % formiové kyselině Arata C18 vykázala nejlepší symetrii píků oproti hybridním i standardním ODS kolonám.
• Rychlá ekvilibrace a stabilní retenční časy (<0,3 % variace) i v mobilní fázi s nízkou iontovou silou (0.1 % H3PO4), kde běžné ODS postupně mění retenci.
• Bezešvý přenos metod mezi HPLC a UHPLC (5 µm → 2,2 µm) s 4×kratším časem analýzy a 5×nižší spotřebou rozpouštědla při zachování selektivity.
• Vynikající reprodukce mezi šaržemi, potvrzená QC testy na standardních zásaditých a kyselých sloučeninách.
• Zlepšená analýza peptidů: výborný tvar píků i při 0.1 % formiové kyselině, stabilní plocha a retence již po 30 min ekvilibrace; výrazně vyšší zotavení peptidů a počet detekovaných komponent ve srovnání s core shell kolonami.

Přínosy a praktické využití metody

• Možnost simultánní analýzy zásaditých a kyselých sloučenin bez iontově párovacích činidel, ideální pro LC/MS aplikace.
• Zrychlení vývoje a validace QC metod v potravinářství, farmaceutickém výzkumu a průmyslové analytice díky rychlé ekvilibraci.
• Spolehlivé testy čistoty léčiv (impurity profiling) s konzistentní retencí stopových nečistot.
• Jednoduchý přenos metod mezi různými dimenzemi a systémy bez ztráty selektivity.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření využití v LC/MS bioanalýze terapeutických proteinů a peptidů s nízkou kyselinovou koncentrací mobilní fáze pro vyšší citlivost.
• Další vývoj bezešvých přechodů mezi platformami (HPLC, UHPLC, kapilární LC) a modularizace metod.
• Vyšší aplikace pro třídy analyzátů citlivých na silanolové interakce (nukleotidy, oligonukleotidy).
• Integrace s pokročilými detekčními systémy a automatizovanými workflow ve výzkumu i kontrole kvality.

Závěr

Shim-pack Arata C18 kolony přinášejí revoluční potlačení nežádoucích silanolových interakcí, což vede k výjimečné symetrii píků, rychlé ekvilibraci, vysoké reprodukovatelnosti a snadnému přenosu metod. Jsou vhodné pro široké spektrum aplikací od QA/QC farmaceutických látek až po bioanalytickou kvantifikaci peptidů a terapeutických protilátek.

Reference

• Shimadzu Corporation: Application Note C190-E238, First Edition May 2019