Analysis of notoginseng using C18 chemistries on superficially porous particle columns

Význam tématu

Analýza triterpenových saponinů v notoginsengu je klíčová pro zajištění kvality a účinnosti tohoto tradičního bylinného přípravku. Rychlá a spolehlivá kvantifikace hlavních ginsenosidů umožňuje dodržet farmakopejní normy, podpořit důvěru spotřebitelů a optimalizovat výrobní procesy.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo přenést dlouhodobě používanou farmakopejní metodu HPLC pro stanovení notoginsenosidu R1 a ginsenosidů Rg1, Re, Rb1 a Rd na moderní UHPLC systém s využitím superficially porous particle (SPP) kolon Agilent InfinityLab Poroshell. Hlavním úkolem bylo:

• Porovnání tří C18 fází (HPH-C18, Poroshell 120 EC-C18, Poroshell 120 SB-C18).
• Optimalizace délky a velikosti částic kolony s cílem zkrátit analýzu a snížit spotřebu organických rozpouštědel.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda vycházela z gradientní eluce ve vodě–acetonitrilovém systému při 203 nm. Původní kolona InfinityLab Poroshell HPH-C18 (4,6×250 mm, 4 µm) byla porovnána s kratší verzí (3,0×100 mm, 2,7 µm). Instrumentace zahrnovala:

• Agilent 1290 Infinity II pumpu, multisampler, MCT a DAD detektor.
• InfinityLab Poroshell kolonové systémy: HPH-C18, 120 EC-C18 a 120 SB-C18.
• Agilent OpenLab CDS pro sběr a vyhodnocení dat.
• Další laboratorní spotřební materiál: PTFE filtry, kalibrační standardy, objemové sklo.

Hlavní výsledky a diskuse

Při použití krátké kolony HPH-C18 (3,0×100 mm, 2,7 µm) došlo k:

• Zkrácení doby analýzy z 80 na 24 minut (úspora času až 70 %).
• Snížení spotřeby organického rozpouštědla o více než 80 %.
• Udržení srovnatelného rozlišení pěti hlavních saponinů (Rs 2,3 ≈ 2,3).

Porovnání tří C18 fází prokázalo, že HPH-C18 zajišťuje lepší retenci a selektivitu pro minoritní komponenty, které na EC-C18 a SB-C18 koelutovaly.

Přínosy a praktické využití metody

Nově optimalizovaná UHPLC metoda nabízí:

• Vyšší laboratorní propustnost díky kratším analýzám.
• Nižší provozní náklady díky úspoře rozpouštědel.
• Zvýšenou citlivost a reprodukovatelnost separace.
• Přímou kompatibilitu s farmakopejními standardy.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se růst zájmu o SPP technologie v dalších oblastech přírodních produktů a farmaceutik. Další rozvoj může zahrnovat:

• Integraci s vysokorychlostní hmotnostní spektrometrií (UHPLC-MS).
• Minikolonové konfigurace pro špičkovou efektivitu a zelenou chemii.
• Automatizaci přípravy vzorků a online čištění (online SPE-UHPLC).
• Machine learning pro optimalizaci metod a predikci retence.

Závěr

Studie prokázala, že krátká kolona Agilent InfinityLab Poroshell HPH-C18 (3,0×100 mm, 2,7 µm) zachovává vysoké rozlišení saponinů v notoginsengu při významném zkrácení analýzy a snížení spotřeby rozpouštědel. Metoda je plně kompatibilní s požadavky Čínské farmakopeje a nabízí významné časové a ekonomické úspory.

Reference

• Total Notoginseng Saponins, China Pharmacopoeia 2015, 514.