Analysis of organic acids on an Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z column

Význam tématu

Polarické organické kyseliny, jako jsou kyselina citrónová, mléčná nebo jablečná, hrají klíčovou roli v potravinářské a nápojové analýze, metabolomice a QA/QC procesech. Jejich spolehlivá separace a detekce umožňuje sledování kvality, stability a fermentačních procesů.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo demonstrovat rychlou a efektivní separaci deseti organických kyselin pomocí Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z kolony o rozměrech 2.1×100 mm a částicích 2.7 µm. Studie popisuje základní nastavení LC, metodiku přípravy vzorků a dosažené chromatografické výsledky při isokratické eluci.

Použitá metodika a instrumentace

• LC systém: Agilent 1290 Infinity LC s nízkou disperzí, Binary Pump G4220A, Autosampler G4226A, Termostatovaná kolona G1316C, Diode Array Detector G4212A
• Software: Agilent OpenLAB CDS ChemStation Edition C.01.05
• Kolona: InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z, 2.1×100 mm, 2.7 µm
• Mobilní fáze: isokratická směs 30 mM fosfátového pufru s 0.075 % kyseliny fosforečné (pH ~6.7) (30 % obj.) a acetonitrilu (70 % obj.), předsmíšená, 0.5 mL/min
• Podmínky: injekční objem 0.1 µL, teplota kolony 30 °C, detekce při 214 nm, 80 Hz
• Příprava vzorku: standardy 10 kyselin připravené v poměru CH3CN/H2O (2:1), koncentrace 6.6–8.7 mg/mL

Hlavní výsledky a diskuse

Všechny testované organické kyseliny byly baseline separovány během čtyř minut s vynikajícím rozlišením a tvarem píků. Fosfátový pufr umožnil nízkou hladinu šumu při detekci DAD, i když vyžadoval pečlivé předsmíchání kvůli riziku precipitačních sraženin. HILIC-Z fáze prokázala schopnost rozlišit polární analyty s vysokou účinností a stabilitou až do pH 12 a 80 °C.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlé a reprodukovatelné analýzy organických kyselin
• Vysoká účinnost separace umožňuje zvýšení propustnosti laboratorních analýz
• Široké možnosti aplikace v potravinářství, farmacii, metabolomice a QA/QC

Budoucí trendy a možnosti využití

Metodu lze rozšířit použitím alternativních pufrů (formátových, acetátových) spojených s MS, ELSD nebo RID detektory. Dalšími směry jsou aplikace na složité biologické matrice, hyphenované techniky (LC–MS/MS) a rozvoj nových stacionárních fází pro ještě širší škálu polárních sloučenin.

Závěr

InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z kolona nabízí rychlou, robustní a vysoce efektivní metodu pro separaci organických kyselin, vhodnou pro široké spektrum analytických aplikací vyžadujících vysokou propustnost a spolehlivost.

Reference

• Anne Mack. Analysis of organic acids on an Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z column. Agilent Technologies Application Note 5991-8985EN, January 2018.