Analysis of Water-Soluble Vitamins on an Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-OH5 Column

Význam tématu

Analýza vodou rozpustných vitaminů je klíčová pro kontrolu kvality potravin, farmaceutické přípravky a výzkum výživy. Rychlá a spolehlivá metoda umožňuje sledování obsahu vitaminů B a C v různých matricích, zajišťuje dodržení legislativních norem a podporuje sekvenční vysokoprocesní zátěž v laboratorních provozech.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo vyvinout a demonstrovat rychlou UHPLC metodu pro rozlišení osmi vodou rozpustných vitaminů (B1, B2, B3, B6, B9, B10, B12 a C) pomocí Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-OH5 kolony. Studie ukazuje schopnost dosáhnout baseline separace všech sloučenin během čtyř minut za použití gradientu amonného octanu a acetonitrilu.

Použitá metodika a instrumentace

Metodika:

• Kolona: Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-OH5, 2.1 × 100 mm, 2.7 µm
• Mobilní fáze A: 100 mmol/l amonný octan se 0,5 % octové kyseliny
• Mobilní fáze B: acetonitril
• Gradient: 87 % B po 0,5 min, pokles na 50 % B během 3,5 min, reekvilibrace
• Průtok: 0,5 ml/min, teplota kolony 40 °C, objem injekce 1 µl
• Detekce: diodový array detektor při 260 nm, 80 Hz
• Příprava vzorků: jednotlivé standardy vitaminů rozpuštěné v acetonitrilu, vodě nebo DMSO podle rozpustnosti

Použitá instrumentace:

• Agilent 1290 Infinity Binary Pump G4220A se solventmixerem
• Agilent 1290 Infinity autosampler G4226A s ohřevem
• Agilent 1290 Infinity Thermostatted Column Compartment G1316C
• Diodový array detektor Agilent 1290 Infinity DAD G4212A
• Řídicí software Agilent OpenLAB CDS ChemStation Edition

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla baseline separace všech osmi vitaminů za čtyři minuty. Kritický pár B2/B10 vykázal rozlišení 2,7. Srovnání s alternativními HILIC fázemi Poroshell 120 HILIC-Z a HILIC odhalilo, že HILIC-OH5 poskytuje nejlepší kompromis mezi rozlišením a tvarem píku. Ostatní fáze vyžadovaly dodatečné úpravy metodiky pro vyhovující separaci.

Přínosy a praktické využití metody

• Výrazné zkrácení analytického času pro vysokokapacitní laboratoře
• Udržení vysoké účinnosti a rozlišení pro pečlivou kontrolu kvality
• Univerzální uplatnění v potravinářství, farmaceutické výrobě a výživovém výzkumu

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření použití superficially porous částic v dalších polárních analytických úlohách, nasazení v kombinaci s hmotnostní spektrometrií a vývoj nových HILIC chemických modifikací pro daleko širší spektrum aplikací v omice, metabolomice i environmentální analytice.

Závěr

Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-OH5 kolona nabízí rychlou a efektivní separaci vodou rozpustných vitaminů s vysokým rozlišením a příznivým tvarem píku. Metoda představuje atraktivní řešení pro rutinní a výzkumné laboratoře hledající optimalizaci doby analýzy a kvality výsledků.

Reference

1. Gratzfield-Hugsen A.; Naegele E. Maximizing efficiency using Agilent InfinityLab Poroshell 120 Columns, Agilent Technologies Application Note 5990-5602EN, 2016