Analysis of Nitroimidazoles in Egg Using Agilent Captiva EMR—Lipid and LC/MS/MS

Význam tématu

Analýza stopových reziduí nitroimidazolových antibiotik v potravinách živočišného původu je klíčová pro zajištění bezpečnosti potravin a dodržování legislativních limitů. Nitroimidazoly, dříve používané jako růstové promotory a léčiva ve veterinární medicíně, byly v mnoha zemích zakázány kvůli potenciálnímu zdravotnímu riziku. Spolehlivé a efektivní čisticí procedury spolu s citlivou detekcí jsou nezbytné pro validaci přítomnosti těchto látek v komplexních matricích, jako jsou vejce.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem článku je představit jednoduchou a robustní analytickou metodu pro stanovení čtyř nitroimidazolů (metronidazol, dimetridazol, ronidazol, ipronidazol) a jejich hydroxy-metabolitů ve vaječné matrici. Metoda kombinuje QuEChERS extrakci s novou technologií Captiva EMR—Lipid pro selektivní odstranění lipidů a pigmentů, následovanou kvantifikací pomocí LC/MS/MS.

Použitá metodika a instrumentace

Postup extrakce a čištění vzorku:

• Homogenizace 5 g vaječného vzorku, přídavek kyseliny mravenčí v ACN pro efektivní precipitaci bílkovin.
• QuEChERS extrakce s Na2SO4 a NaCl, centrifugace a odběr organické fáze.
• Čištění filtrací přes Captiva EMR—Lipid kartridž (3 mL), pass-through eluce pod gravitací a vakuem.

Instrumentace:

• Agilent 1290 Infinity LC s Poroshell 120 EC-C18 kolonkou (3,0×100 mm, 2,7 µm).
• Agilent 6495B Triple Quadrupole MS s Jet Stream ESI.
• GC/MS (Agilent 9000 GC + 7000 Triple Quad) pro hodnocení účinnosti odstraňování matrice.
• Další vybavení: SPEX Geno/Grinder, Eppendorf centrifuga, Agilent Vac Elut manifold.

Hlavní výsledky a diskuse

Linearity metody vykazovala koeficient R2 mezi 0,993 a 0,995 v rozsahu 0,1–100 ng/g. Preciznost (RSD) byla nižší než 6 % a přesnost se pohybovala mezi 85,6 a 118,3 % na třech úrovních QC (1, 5, 10 ng/g). GC/MS full scan ukázal, že EMR—Lipid odstraňuje až 76 % složek matrice, výrazně snižuje obsah lipidů a pigmentů a minimalizuje rušivé signály v LC/MS analýze.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí rychlý workflow s minimálním počtem kroků, eliminaci vícenásobných pH úprav a složitého SPE. Captiva EMR—Lipid zjednodušuje čištění vzorků zachovávající vysokou návratnost analytů. Vhodné použití pro rutinní monitoring reziduí veterinárních léčiv v potravinách, kontrolu jakosti a výzkumné studie.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj by mohl zahrnovat automatizaci čištění vzorků a rozšíření na další skupiny polarických sloučenin. Integrace high-throughput platforem a doplnění o HRMS systémy umožní širší screening neznámých metabolitů a kontaminant.

Závěr

Použití QuEChERS extrakce v kombinaci s Captiva EMR—Lipid a LC/MS/MS poskytuje robustní, přesnou a citlivou analýzu nitroimidazolů a jejich metabolitů ve vejcích. Metoda splňuje požadavky na legislativní kontroly a nabízí efektivní řešení pro rutinní laboratorní analýzy.

Reference

1. Council Regulation (EEC) No. 2377/90 Establishment of MRLs of Veterinary Medicinal Products in Foodstuffs of Animal Origin, Official Journal of the European Communities L224, 1990.
2. Cronly M. et al. Rapid confirmatory method for determination of 11 nitroimidazoles in egg by LC-MS/MS. J. Chromatogr. A 2009, 1216, 8101–8109.
3. Granja R. et al. Determination and confirmation of metronidazole, dimetridazole, ronidazole and their metabolites in bovine muscle by LC-MS/MS. Food Addit. Contam. A 2013, 30, 970–976.
4. Mitrowska K., Posyniak A., Zmudzki J. Multiresidue method for determination of nitroimidazoles and their metabolites in poultry matrices by isotope dilution LC-MS. Talanta 2010, 81, 1273–1280.