Chiral separation of methamphetamine and amphetamine on an Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-V column with detection by LC/MS

Význam tématu

Chirální analýza methamfetaminu a amfetaminu je zásadní pro forenzní, klinickou a farmaceutickou praxi. Rozlišení enantiomerů umožňuje přesné stanovení biologicky aktivních forem látek, zajišťuje spolehlivost výsledků v protidrogových testech a podporuje kontrolu léčiv a jejich metabolitů.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo demonstrovat schopnost kolon Poroshell 120 Chiral-V (2.1×150 mm, 2.7 µm) v kombinaci s LC/MS oddělit racemické směsi methamfetaminu a amfetaminu s vysokou rychlostí a dostatečným rozlišením (Rs ≥1,9) během 5 minut analýzy.

Použitá metodika a instrumentace

• Kapalinová chromatografie: Agilent 1290 Infinity LC s kolonou InfinityLab Poroshell 120 Chiral-V 2.1×150 mm, 2.7 µm
• Masová detekce: Agilent 6460 triple quadrupole LC/MS, ionizace ESI pozitivní, Agilent Jet Stream
• Mobilní fáze: methanol : octová kyselina : hydroxid amonný v poměru 1000 : 1 : 0,2 (isokraticky)
• Průtok: 0,25 mL/min, teplota: 20 °C (testováno i 30 °C a 40 °C), injekční objem: 0,2 µL
• MRM přechody: methamfetamin 150,1→91,1; 150,1→65,1; amfetamin 136,1→119,0; 136,1→91,0

Hlavní výsledky a diskuse

Baseline separace čtyř chirálních forem proběhla během 5 min (retence 2,39–3,94 min při 20 °C) s rozlišením Rs ≥1,9. Zvýšení teploty na 30 °C a 40 °C snížilo retenci a upravilo selektivitu: rychlejší průchod a zachovaná rozlišitelnost jednotlivých enantiomerů (tabulka 3). Nižší viskozita mobilní fáze při vyšší teplotě umožnila zkrácení analýzy bez kompromisu v přesnosti kvantifikace.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí rychlou, přímou detekci bez derivatizace a vysokou citlivost, což je výhodné pro forenzní toxikologii, dopingové kontroly, klinické monitorování léčiv a QA/QC v průmyslových laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může zahrnovat optimalizaci chiralních stacionárních fází, zkrácení kolon, automatizaci workflow a kombinaci s ultra-rychlou kapalinovou chromatografií či superkritickou fluidní chromatografií pro vyšší propustnost vzorků.

Závěr

Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-V kolona ve spojení s LC/MS prokázala efektivní a rychlé rozlišení methamfetaminu a amfetaminu, splňující požadavky na vysoké rozlišení a krátký čas analýzy bez nutnosti chemické úpravy vzorku.

Reference

1. Gratzfeld-Huesgen A., Naegele E. Maximizing efficiency using Agilent Poroshell 120 Columns. Agilent Technologies Application Note 5990-5602EN, 2016.
2. Meyer V.R. Practical High Performance Liquid Chromatography, 4th ed., Wiley, 2004, p. 34.
3. European Patent: Method for the production of selegiline hydrochloride. Retrieved 2015-10-04.
4. Kalász H. et al. Metabolism of selegiline [(-)-deprenyl]. Current Medicinal Chemistry 2014; 21(13):1522–1530.
5. Magyar Kálmán M. The pharmacology of selegiline. International Review of Neurobiology 2011; 100:65–84.
6. Cody J.D. Metabolic precursors to amphetamine and methamphetamine. Forensic Science Review 1993; 5(2):109–127.
7. Cody J.T. Precursor medications as a source of methamphetamine and/or amphetamine positive drug testing results. Journal of Occupational and Environmental Medicine 2002; 44(5):435–450.