Analysis of Favipiravir in Human Plasma Using Fully Automated Sample Preparation LC/MS/MS System

Význam tématu

Favipiravir je nová perspektivní látka působící jako inhibitor RNA-dependentní RNA polymerázy, využívaná při léčbě virových onemocnění, jako je influenza. Precizní a spolehlivá analýza jeho koncentrace v lidské plasmě je klíčová pro farmakokinetické studie, monitorování expozice a optimalizaci dávek pro bezpečné a účinné podávání.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem popsané studie bylo vyvinout a validovat plně automatizovaný pracovní postup pro přípravu vzorků a kvantitativní analýzu favipiraviru v lidské plasmě pomocí LC-MS/MS. Meta­donotem bylo snížení variability mezi operátory, zrychlení analýzy a minimalizace expozice laboratorního personálu.

Použitá metodika a instrumentace

Pro extrakci a čištění vzorků plazmy byl použit plně automatizovaný modul CLAM™, napojený na LC/MS/MS systém.

• Přístroje: Nexera™ X2 UHPLC, LCMS-8060 MS/MS (Shimadzu).
• Automatizace: CLAM™ pro deproteinizaci, míchání a filtraci vzorků.
• Kolona: Shim-pack Scepter™ C18-120, 50×2,1 mm, 1,9 µm.
• Mobilní fáze: A – 0,05 % kyselina mravenčí ve vodě; B – 0,05 % kyselina mravenčí v acetonitrilu.
• Gradient: 5 % B (0–0,30 min), 30 % B (0,35 min), 90 % B (1,50–2,50 min), návrat na 5 % B (2,60–4,00 min).
• MRM přechody favipiraviru: kvantifikátor m/z 157,70→85,10; kvalifikátor 157,70→113,20. Interní standard: [13C,15N]-favipiravir (159,70→85,10; 159,70→113,20).

Hlavní výsledky a diskuse

Stanovení favipiraviru v rozsahu 1–100 µg/mL prokázalo vynikající linearitu (R2 = 0,9987). Precision (%RSD) se pohybovala mezi 1,0 % a 5,6 %, accuracy mezi 95 % a 105 %.
Opakovatelnost (intra-denní) pro QC úrovně 3, 50 a 90 µg/mL vykázala %RSD 1,6–3,0 % a accuracy 94–97 %. Mezi-denní reprodukovatelnost měřená ve třídenním sledu měla %RSD 0,2–7,6 % a accuracy 88–99 %. Doba cyklu od zahájení přípravy do výsledků LC-MS/MS byla 6,5 minuty na vzorek, což značně zvyšuje propustnost laboratoře.

Přínosy a praktické využití metody

Implementace plně automatizované extrakce výrazně snižuje pracovní zatížení a riziko lidské chyby. Standardizované podmínky zvyšují reprodukovatelnost a minimalizují kontaminaci. Metoda je vhodná pro klinické a preklinické studie, terapeutický monitoring a farmakokinetické hodnocení favipiraviru i dalších nízkomolekulárních léčiv.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj může směřovat k rozšíření automatizované přípravy vzorků o další matrix, multiplexní analýze více sloučenin současně a integraci s on-line datovou analýzou. Miniaturizace a nasazení v rámci point-of-care zařízení může otevřít nové možnosti monitorování terapie přímo na místě péče.

Závěr

Studie potvrdila, že plně automatizovaná příprava vzorků v kombinaci s citlivou LC-MS/MS analýzou poskytuje rychlou, přesnou a vysoce reprodukovatelnou metodiku pro stanovení favipiraviru v lidské plasmě. Tento postup je vhodný pro náročné farmakokinetické studie a rutinní monitoring léčby.

Reference

Žádné formální literární odkazy nebyly v původním textu uvedeny.