Quantification of drugs of abuse in human blood by TurboFlow chromatography coupled to tandem mass spectrometry for use in clinical research
Aplikace | 2020 | Thermo Fisher ScientificInstrumentace
Liquidační chromatografie spojená s tandemovou hmotnostní spektrometrií umožňuje rychlou, přesnou a zároveň citlivou kvantifikaci širokého spektra drog ve vzorcích lidské krve. V klinickém výzkumu je tato metoda klíčová pro monitorování léčebných režimů, forenzní analýzy a hodnocení expozice pacientů.
Cílem práce bylo implementovat a validovat analytickou metodu pro stanovení 14 látek zneužívaných drog v lidské krvi na platformě Thermo Scientific Transcend TLX s online extrakcí TurboFlow a říditelnou detekcí na TSQ Quantis. Panel analyzovaných sloučenin zahrnuje alkaloidy, amphetaminy a opiáty.
Sestava předanalytické přípravy zahrnovala precipitaci proteinů ve vzorku krve přídavkem roztoku zinku a metanolu s interními standardy. Po centrifugaci se supernatant automaticky očistil na TurboFlow kolonce, následovalo oddělení na analytické biphenyl kolonce. Analýza probíhala v režimu SRM se dvěma přechody pro každý analyzát – kvantifikačním a konfirmačním.
Automatizovaná online extrakce snižuje složitost předanalytické přípravy a zkracuje časový cyklus, zatímco vysoká citlivost a opakovatelnost výsledků vyhovují požadavkům klinických a forenzních laboratoří. Metoda dokáže sledovat různorodý panel látek s minimálními úpravami vzorku.
Metoda může být rozšířena o další analyty a adaptována na platformy s vyšším průtokem vzorků. Perspektivně se očekává plná automatizace procesů, integrace s laboratorními informačními systémy a aplikace v personalizované medicíně a toxikologickém screeningu.
Popsaná metoda kombinuje rychlý online vzorkový preparativ, vysokou citlivost a reprodukovatelnost a splňuje náročné požadavky klinického výzkumu drog ve vzorcích lidské krve.
LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
ZaměřeníKlinická analýza
VýrobceThermo Fisher Scientific
Souhrn
Význam tématu
Liquidační chromatografie spojená s tandemovou hmotnostní spektrometrií umožňuje rychlou, přesnou a zároveň citlivou kvantifikaci širokého spektra drog ve vzorcích lidské krve. V klinickém výzkumu je tato metoda klíčová pro monitorování léčebných režimů, forenzní analýzy a hodnocení expozice pacientů.
Cíle a přehled studie
Cílem práce bylo implementovat a validovat analytickou metodu pro stanovení 14 látek zneužívaných drog v lidské krvi na platformě Thermo Scientific Transcend TLX s online extrakcí TurboFlow a říditelnou detekcí na TSQ Quantis. Panel analyzovaných sloučenin zahrnuje alkaloidy, amphetaminy a opiáty.
Použitá instrumentace
- Thermo Scientific Transcend TLX systém s online extrakcí TurboFlow Cyclone
- HPLC kolona Thermo Scientific Accucore biphenyl 50×2.1 mm, částice 2.6 μm, teplota 30 °C
- Mass spektrometr TSQ Quantis se zdrojem Heated Electrospray Ionization v pozitivním módu
- Software pro zpracování dat Thermo Scientific TraceFinder 4.1
Použitá metodika
Sestava předanalytické přípravy zahrnovala precipitaci proteinů ve vzorku krve přídavkem roztoku zinku a metanolu s interními standardy. Po centrifugaci se supernatant automaticky očistil na TurboFlow kolonce, následovalo oddělení na analytické biphenyl kolonce. Analýza probíhala v režimu SRM se dvěma přechody pro každý analyzát – kvantifikačním a konfirmačním.
Hlavní výsledky a diskuse
- Linearity v rozsahu 2.5 až 100 ng/mL s korelačním koeficientem R2 > 0.99
- Limit kvantifikace (LOQ) v rozmezí 0.01–1 ng/mL v závislosti na látce
- Významné zvýšení citlivosti až 5× oproti konvenčnímu LC-only přístupu
- Intra-assay a inter-assay přesnost (%CV) vždy pod 8 %
- Přesnost (% bias) mezi nominální a změřenou hodnotou v rozmezí -1 až +7 %
- Žádné významné carryover, celkový analytický cyklus pod 5 minut
Přínosy a praktické využití metody
Automatizovaná online extrakce snižuje složitost předanalytické přípravy a zkracuje časový cyklus, zatímco vysoká citlivost a opakovatelnost výsledků vyhovují požadavkům klinických a forenzních laboratoří. Metoda dokáže sledovat různorodý panel látek s minimálními úpravami vzorku.
Budoucí trendy a možnosti využití
Metoda může být rozšířena o další analyty a adaptována na platformy s vyšším průtokem vzorků. Perspektivně se očekává plná automatizace procesů, integrace s laboratorními informačními systémy a aplikace v personalizované medicíně a toxikologickém screeningu.
Závěr
Popsaná metoda kombinuje rychlý online vzorkový preparativ, vysokou citlivost a reprodukovatelnost a splňuje náročné požadavky klinického výzkumu drog ve vzorcích lidské krve.
Reference
- De Nardi C et al. Technical Note 73360, Thermo Fisher Scientific 2020
Podobná PDF
Simultaneous Quantitation of 43 Drugs in Human Urine with a “Dilute-and-Shoot” LC-MS/MS Method
2012|Thermo Fisher Scientific|Aplikace
Appli cat i on N ote 5 7 6 Simultaneous Quantitation of 43 Drugs in Human Urine with a “Dilute-and-Shoot” LC-MS/MS Method Xiang He and Marta Kozak, Thermo Fisher Scientific, San Jose, CA Key Words TSQ Quantum Access MAX, forensic…
Klíčová slova
carisprodol, carisprodolalprazolam, alprazolamhydrocodone, hydrocodonefentanyl, fentanylmorphine, morphineurine, urinebenzylpiperazine, benzylpiperazinemeperidine, meperidineoxymorphone, oxymorphoneeddp, eddppcp, pcphydromorphone, hydromorphonemidazolam, midazolammdea, mdeabenzoylecgonine
Comprehensive LC/MS Analysis of Opiates, Opioids, Benzodiazepines, Amphetamines, Illicits, and Metabolites in Urine
2017|Agilent Technologies|Aplikace
Comprehensive LC/MS Analysis of Opiates, Opioids, Benzodiazepines, Amphetamines, Illicits, and Metabolites in Urine Application Note Forensic Toxicology Abstract This application note demonstrates that the Agilent 6420 Triple Quadrupole LC/MS system can be used to simultaneously analyze a wide variety of…
Klíčová slova
positive, positiveunit, unityes, yesret, retdesmethyltramadol, desmethyltramadolhydrocodone, hydrocodonenaltrexone, naltrexonecodeine, codeinemorphine, morphinehydromorphone, hydromorphonecpd, cpdfrag, fragcarisoprodol, carisoprodolmethamphetamine, methamphetamineeddp
Clam- SPE on line- UHPLC-MS/MS : Fully automatic, simultaneous and quickly quantification of drugs of abuse in blood, plasma and urine
2018|Shimadzu|Postery
#19d Clam- SPE on line- UHPLC-MS/MS : Fully automatic, simultaneous and quickly quantification of drugs of abuse in blood, plasma and urine. Maria Rosaria Innarella (1), Doriane Toinon (2), Mickael Nicolas (3), Tiphaine Robin (4), Alban Huteau (2), Thierry Besnard…
Klíčová slova
repeatability, repeatabilitythc, thcaccuracy, accuracymethiopropamine, methiopropaminenorfenfluramine, norfenfluraminenorpseudoephedrine, norpseudoephedrinepholcodine, pholcodineanhydroecgonine, anhydroecgoninebdb, bdbnorephedrine, norephedrineethylmorphine, ethylmorphinembdb, mbdbmethylester, methylestermethcathinone, methcathinonenoroxycodone
Quantitation of drugs of abuse and their metabolites in urine using PaperSpray tandem mass spectrometry for clinical research and forensic toxicology
2020|Thermo Fisher Scientific|Aplikace
TECHNICAL NOTE 73467 Quantitation of drugs of abuse and their metabolites in urine using PaperSpray tandem mass spectrometry for clinical research and forensic toxicology Authors: Scott A. Borden1,2, Armin Saatchi1, Chris G. Gill1,2, Neloni R. Wijeratne3 Applied Environmental Research Laboratories…
Klíčová slova
cutoff, cutoffforensic, forensicverispray, verisprayalprazolam, alprazolamethylpentylone, ethylpentylonerun, runabuse, abusegrand, grandfluorofentanyl, fluorofentanylpaperspray, paperspraycarfentanil, carfentanilmethamphetamine, methamphetamineamphetamine, amphetaminedrugs, drugsfortis
