Simultaneous Quantitation of 43 Drugs in Human Urine with a “Dilute-and-Shoot” LC-MS/MS Method

Význam tématu

Analýza drog v moči je klíčová pro forenzní toxikologii, klinickou diagnostiku i kontrolu dodržování léčebných režimů. Metoda "dilute-and-shoot" v kombinaci s LC-MS/MS umožňuje rychlé, citlivé a simultánní stanovení rozsáhlého panelu látek bez složité předúpravy vzorku.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout jednoduchou, vysoce výkonnou UHPLC-MS/MS metodu pro simultánní kvantifikaci 43 látek zneužívajících látek a analgetik v lidské moči. Studie zahrnovala opioidy, amfetaminy, benzodiazepiny, kokain, buprenorfin, methadon a jejich metabolity. Prioritami byly vysoká propustnost, citlivost a reprodukovatelnost.

Použitá instrumentace

• UHPLC systém: Thermo Scientific Accela 1250 pumpa s Accela Open autosampler
• Analytická kolona: Thermo Scientific Accucore PFP, 50×2,1 mm, 2,6 µm
• Hmotnostní spektrometr: Thermo Scientific TSQ Quantum Access MAX
• Ionizace: HESI-II v pozitivním režimu
• Detekce: režim SRM, dvě přechodové reakce (kvantifikátor a kvalifikátor) na každou složku

Hlavní výsledky a diskuse

Matrixové efekty byly minimální, absolutní výtěžky se pohybovaly mezi 80 a 120 % pro většinu látek. Nižší hranice kvantifikace (LLOQ) dosahovaly 2–20 ng/mL (tramadol 50 ng/mL). Kalibrační křivky v rozsahu 2–1000 ng/mL vykázaly linearitu (R2 > 0,99). Přesnost a správnost při LLOQ byla v rozmezí 89,9–118,4 % s CV do 19,5 %. Mezi QC body 20 a 200 ng/mL dosahovalo CV 1,1–10,9 %. Nebyl pozorován významný carryover.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí vysokou propustnost díky minimální přípravě vzorku (hydrolýza, centrifugace, 20× zředění), umožňuje sledovat široké spektrum drog jedním měřením a splňuje požadavky forenzní i klinické praxe na citlivost a spolehlivost.

Budoucí trendy a možnosti využití

Možnosti rozšíření zahrnují automatizovanou přípravu vzorků, rozšíření panelu o nové psychoaktivní látky, nasazení vysokorozlišovací MS pro potvrzovací analýzu a integraci metody do velkokapacitních služeb toxikologického screeningu.

Závěr

Vyvinutá UHPLC-MS/MS metoda "dilute-and-shoot" pro simultánní kvantifikaci 43 drog v moči prokázala výborné analytické parametry: nízké LLOQ, široký lineární rozsah, minimální matrixové vlivy i spolehlivou přesnost a správnost. Je vhodná pro forenzní a klinickou toxikologii, kde je vyžadována rychlost a robustnost analýzy.