Configuring the NanoLC™ 425 System for Both Nanoflow and Microflow LC-MS Workflows

Význam tématu

Liquid chromatography v nanoflow a mikroflow režimech je klíčová pro proteomiku a metabolomiku, kde je zapotřebí kombinace vysoké citlivosti a průchodnosti vzorků. Flexibilita jednoho LC systému, který umožňuje rychlé přepínání mezi nanoflow a microflow, zvyšuje produktivitu laboratoře a snižuje náklady na údržbu a spotřební materiál.

Cíle a přehled studie / článku

Autoři předkládají návod k nastavení systému NanoLC™ 425 tak, aby podporoval oba režimy průtoku – nanoflow (0,1–1 µl/min) i microflow (1–10 µl/min). Obsahuje popis potřebných modulů, tubingu, ventilů a postup přepojení mezi režimy bez nutnosti rozsáhlého přestavování systému.

Použitá metodika a instrumentace

Pro konfiguraci se využívá duální gradientní systém se dvěma kanály:

• Kanál 1: nanoflow modul (0,1–1 µl/min).
• Kanál 2: microflow modul (1–10 µl/min).

Isokratické načítání vzorku obstarává speciální loadovací pumpa a autosamplery s trap a injekčními ventily. Přepojení mezi kanály vyžaduje výměnu tubingu podle režimu a zapojení správného portu ve ventilu.

Použitá instrumentace

• NanoLC™ 425 System s duálním gradientním modulem.
• Nanoflow gradientní modul (P/N 5018236).
• Low microflow gradientní modul (P/N 5018237).
• Isokratická loadovací pumpa a AS Trap/Inj Valve.
• MS detektor (libovolný kompatibilní ESI zdroj).

Hlavní výsledky a diskuse

Postup zajišťuje, že:

• Přepojení trvá několik minut bez nutnosti kompletního rozebrání vedení.
• Stejná autosamplerová část (injekční ventil) zůstává beze změny.
• Správné očištění nevyužívané gradientní cesty (5x purge) obnoví optimální podmínky.

Diagram zapojení (obr. 1) ukazuje porty 7–10 pro trap, port 8 pro analytickou kolonu a port 9 pro gradientní kanál. Klíčová je kompatibilita tubingu a minimální dead volume.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlé střídaní režimů vhodné pro laboratoře s různými analytickými potřebami.
• Úspora spotřebního materiálu díky sdíleným komponentám.
• Zachování vysoké reprodukovatelnosti retence a citlivosti v obou režimech.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další integrace automatizovaných přepínačů a pokročilého softwaru pro řízení přepojení. Rozšíření na vyšší průtokové režimy a kompatibilita s více typy MS zdrojů podpoří širší uplatnění v farmaceutickém výzkumu a klinické analýze.

Závěr

Konfigurace NanoLC™ 425 pro nanoflow i microflow LC-MS poskytuje flexibilní, rychlé a nákladově efektivní řešení pro širokou škálu omics aplikací. Dodržení doporučených postupů zajistí optimální výkon a dlouhodobou stabilitu systému.

Reference

1. Achieving Very High Reproducibility for Quantitative Proteomics with Nanoflow LC/MS - NanoLC™ 400 Series System. SCIEX Technical Note RUO-MKT-02-5755-A.
2. SWATH Performance Kit - sciex.com/products/standards-and-reagents/swath-acquisition-performance-kit.