Analysis of Biogenic Amines in Wine Using the Agilent 1290 Infinity II LC and Ultivo Triple Quadrupole LC/MS

Význam tématu

Cíle a přehled studie

• Ukázat proveditelnost přímé analýzy biogenních aminů ve víně bez chemické derivatizace.
• Demonstrovat využití Agilent 1290 Infinity II LC a Ultivo LC/TQ/MS pro citlivé, selektivní a rychlé stanovení.
• Vyhodnotit výkonové parametry metody, vč. linearity, mezí detekce, přesnosti a maticových efektů.

Použitá metodika a instrumentace

• Kapalná chromatografie: Agilent 1290 Infinity II s flexibilní pumpou, vzorkovačem s 40 µL hlavou a multicolumn termostatem.
• Chromatografická kolona: InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 (2.1 × 50 mm, 2.7 µm).
• Iontová párná chromatografie s heptafluorbutyrovou kyselinou pro zlepšení retence a oddělení aminů.
• Hmotnostní spektrometrie: Agilent Ultivo LC/TQ s iontovým zdrojem Jet Stream v režimu pozitivní ionizace a dynamic MRM.
• Software: Agilent MassHunter Workstation (data acquisice, optimalizace ESI parametrů a kvantifikace).

Hlavní výsledky a diskuse

• Oddělení 15 biogenních aminů během 7 min s gradientem 2–30 % organické fáze umožňuje nízkou spotřebu rozpouštědel.
• Linearity kalibračních křivek R² ≥ 0.984, meze detekce v rozmezí 0.5–2 ng/mL.
• Přesnost area < 1 %, opakovatelnost retence < 0.24 % pro většinu sloučenin.
• V červeném víně Tempranillo jsou maticové efekty nízké (< 15 %), výjimkou je agmatin a norepinefrin s potlačením signálu okolo 50 %.
• Nejvyšší koncentrace zjištěné ve vzorku: putrescin 11.8 mg/L, histamin 2.5 mg/L, tyramin 2.06 mg/L, pod toxickými práhy EFSA.

Přínosy a praktické využití metody

• Zrušení derivatizace zkracuje dobu přípravy vzorku a snižuje náklady.
• Nízký tlak (< 400 bar) umožňuje použití základních LC systémů.
• Vysoká propustnost a automatizace vhodná pro rutinní kontroly kvality ve vinařstvích i potravinářských laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Závěr

Reference

1. Scientific Opinion on Risk Based Control of Biogenic Amine Formation in Fermented Foods. EFSA Journal 2011, 9(10), 2393.
2. Sentellas S; Núñez O; Saurina J. Recent Advances in the Determination of Biogenic Amines in Food Samples by (U)HPLC. J Agric Food Chem 2016, 64(41), 7667–7678.
3. Kaufmann A; Maden K. Easy and Fast Method for the Determination of Biogenic Amines in Fish and Fish Products with Liquid Chromatography Coupled to Orbitrap Tandem Mass Spectrometry. J AOAC Int 2018, 101(2), 336–341.
4. Häkkinen MR. Polyamine Analysis by LC-MS. Methods Mol Biol 2011, 720, 505–518.
5. Landete JM et al. Biogenic Amines in Wines from Three Spanish Regions. J Agric Food Chem 2005, 53(4), 1119–1124.