Tomorrow’s quantitation with the TSQ Fortis mass spectrometer: quantitation of phenylephrine hydrochloride for QA/QC laboratories

Význam tématu

Phenylephrin hydrochlorid je široce používané dekongestivum s významem v lékařských i průmyslových QA/QC procesech. Jeho kvantitativní stanovení v čisté vodě slouží nejen k ověření správného dávkování a čistoty finálních produktů, ale i k monitorování potenciálních kontaminant a zajištění dodržení regulačních norem.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem práce bylo vyvinout snadno implementovatelný, reprodukovatelný a citlivý kvantitační protokol pro stanovení fenylephrinu HCl v deionizované vodě. Pro ověření metodiky byly připraveny kalibrační standardy i QC vzorky a analyzovány na moderní LC-MS/MS platformě.

Použitá metodika a instrumentace

Pro přípravu vzorků bylo postupně zředěno 100 mg/L primární standardní roztok v Milli-Q vodě na šest kalibračních úrovní (1,0–0,004 mg/L) a tři QC úrovně (0,01; 0,002; 0,001 mg/L).

Analýza byla prováděna na:

• UHPLC: Thermo Scientific Vanquish Flex se sloupcem Hypersil GOLD 50 × 2,1 mm, 1,9 µm při 30 °C, injekční objem 2 µL
• Gradient: mobilní fáze B od 0 do 0,2 min 0 %, do 3 min 30 %, do 4–5 min 100 %, návrat do 0 % do 5,5–9,5 min, průtok 0,2 mL/min
• MS: Thermo Scientific TSQ Fortis s pozitivní HESI ionizací, spray 3500 V, ion transfer tube 300 °C, vaporizer 225 °C, cyklus 0,3 s, Q1/Q3 rozlišení 0,7 Da
• SRM přechody: 168,1→91,0 (CE 23 V), 168,1→150,0 (CE 10 V), dwell 149 ms, tubelens 55 V
• Software: Thermo Scientific TraceFinder 4.1 pro akvizici i zpracování dat

Hlavní výsledky a diskuse

Vytvořená kalibrační křivka vykázala v rozsahu 0,004–1 mg/L vynikající linearitu s R2 ≥ 0,9993 (váha 1/x). LLOQ při 4 µg/L dosáhl CV 4,7 %. Precision QC vzorků v pěti bězích se pohybovala mezi 2,2–5,4 % (QC A 10 µg/L CV 2,19 %, QC B 2 µg/L CV 4,76 %, QC C 1 µg/L CV 5,42 %). Chromatogramy potvrdily čistotu a nezanedbatelnou šumovou hladinu meziprovozní fáze.

Přínosy a praktické využití metody

• Robustní workflow vhodné pro rutinní QA/QC laboratoře
• Vysoká citlivost a selektivita pro nízké koncentrace fenylephrinu
• Rychlá analýza (<10 min) s minimem chemikálií a spotřebního materiálu
• Přenositelnost metody do biologických matric

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření této metody na komplexnější biologické a environmentální vzorky, automatizace přípravy vzorků robotickými stanicemi a integrace s pokročilými softwarovými nástroji pro vyšší průchodnost a datovou bezpečnost. Další možnosti představují multianalytní stanovení a miniaturizace metodiky.

Závěr

Popisovaný LC-MS/MS protokol pro stanovení fenylephrinu HCl v čisté vodě splňuje požadavky na přesnost, reprodukovatelnost i cenu na vzorek. Metoda je snadno přenosná do dalších matric a poskytuje vysokou kvalitu dat, která podporuje rozhodování v QA/QC procesech.

Reference

1. El-Hawry MB et al. Hand Book of Pharmacology. Cairo, The Scientific Book Center 1985
2. Al-Shaalan NH. Determination of phenylephrine hydrochloride and chlorpheniramine maleate in binary mixture using chemometric-assisted spectrophotometric and high-performance liquid chromatographic-UV methods. Journal of Saudi Chemical Society 2010;14(1):7