Two dimensional chromatography: LC-GC online coupling of an Agilent 1260 Infinity LC and an Agilent 7890A GC

Význam tématu

On-line spojením kapalinové a plynové chromatografie lze efektivně analyzovat složité vzorky s minimální ztrátou a kontaminací. LC část slouží pro selektivní čisticí krok, frakciaci a prekoncentraci analytů, GC část pak nabízí vysoké rozlišení a citlivou detekci.

Cíle a přehled studie / článku

Technický přehled popisuje konstrukci a ověření online spojení Agilent 1260 Infinity LC s Agilent 7890A GC přes 2pozicový/6portový přepínací ventil a multimode inlet (MMI) v režimu solvent vent. Testovanou ukázkou byla směs cholesterylových mastných esterů, přičemž cílem bylo srovnání chromatogramů LC-GC versus standardní GC se split injekcí.

Použitá metodika a instrumentace

Ultrarychlá LC kolona Eurospher-100Si (250×2 mm, 5 µm) pracovala s eluční směsí n-hexan/tert-butylmetylether (96:4) při 0,200 ml/min. Vzorková frakce 200 µl byla přesměrována 2pozicovým/6portovým ventilem do MMI agilent 7890A. Režim solvent vent odstraňoval rozpouštědlo při 50 °C a ventovacím toku 1000 ml/min. Poté PTV inlet zahřátý 900 °C/min na 350 °C přenesl analyty na GC kolonu Restek Rtx-200MS (30 m×250 µm×0,1 µm) při programovaném tlaku H2 nosiče. Detekce FID při 360 °C doplňoval makeup plyn.

Hlavní výsledky a diskuse

Srovnání chromatogramů ukázalo obdobný profil cholesterylových esterů pro on-line LC-GC i samostatný GC se split injekcí. Optimalizace ventovacích a přenosových parametrů byla klíčová pro maximální citlivost a minimalizaci degradace. Mezi testovanými vložkami pro MMI podložku nejlépe vyhověla Agilent 5183-4647 z hlediska reprodukovatelnosti a citlivosti.

Přínosy a praktické využití metody

• Automatizace a uzavřený systém snižují riziko kontaminace a ztráty vzorku.
• Selektivní frakcionace LC předchází interferencím v GC analýze.
• Vysoká opakovatelnost a spolehlivost analýzy sterylových esterů v potravinářských matricích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Metoda lze rozšířit na stanovení sterylových esterů v rostlinných olejích, margarínech či funkčních potravinách. Další vývoj směřuje k integraci s hmotnostní spektrometrií, optimalizaci PTV programů a ventilových přechodů pro širší spektrum termálně citlivých látek.

Závěr

Prokázalo se, že on-line spojení Agilent 1260 Infinity LC a 7890A GC s využitím solvent vent režimu a programovatelného MMI přináší spolehlivou, citlivou a automatizovanou analýzu cholesterylových esterů. Přístup otevírá možnosti pro komplexní potravinářské a lipidové analýzy.

Reference

1. K. Grob, M. Lanfranchi, C. Mariani, Evaluation of olive oils through the fatty alcohols, the sterols and their esters by coupled LC-GC. J. Am. Oil Chem. Soc. 1990, 67(10), 626–634.
2. W. Kamm, F. Dionisi, L. B. Fay, C. Hischenhuber, H. G. Schmarr, K. H. Engel, Analysis of steryl esters in cocoa butter by on-line liquid chromatography-gas chromatography. J. Chromatogr. A 2001, 918(2), 341–349.
3. A. Miller, T. Frenzel, H. G. Schmarr, K. H. Engel, Coupled liquid chromatography-gas chromatography for the rapid analysis of g-oryzanol in rice lipids. J. Chromatogr. A 2003, 985(1–2), 403–410.
4. P. Dugo, G. Dugo, L. Mondello, On-line coupled LC-GC: theory and applications. LC-GC Eur. 2003, 16(12a), 35–43.
5. T. Hyoetylaeinen, M. L. Riekkola, On-line coupled liquid chromatography-gas chromatography. J. Chromatogr. A 2003, 1000(1–2), 357–384.
6. T. Hyoetylaeinen, M. L. Riekkola, Perspectives of on-line coupled liquid chromatography-gas chromatography. Anal. Bioanal. Chem. 2004, 378(8), 1936–1938.