Method Development for Forced Degradation of Small Molecule GLP-1 Agonist Orforglipron

Význam tématu

Glucagon-like peptide 1 receptor agonist orforglipron představuje první orálně podávaný nemalopolypeptidový GLP-1 RA s potenciálem pro léčbu obezity a diabetu typu 2. Pro farmaceutické laboratoře je klíčové zajistit stabilitu a čistotu API, což vyžaduje systematické studium degradačních drah a impurit pomocí vysoce výkonné kapalinové chromatografie a LC-MS.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout rychlou a spolehlivou LC-MS metodu pro identifikaci a kvantifikaci degradačních produktů orforglipronu. Metoda vycházela ze Systematického screeningového protokolu (SSP) zahrnujícího tři kroky: pH scouting, solvent screening a optimalizaci.

Použitá metodika a instrumentace

Pro přípravu vzorků byla připravena 1 mg/ml roztok API, který byl stresován kyselinou, zásadou a peroxidem při 70 °C. Chromatografie byla prováděna na systému ACQUITY Premier H-Class spojeném s PDA detektorem a QDa mass detektorem. Pro screening byly použity kolony ACQUITY Premier BEH C18, CSH Phenyl-Hexyl, BEH C8 a Atlantis BEH C18 AX s mobilní fází voda/acetonitril obsahující 0,1% formové kyseliny. Data byla zpracována v Empower CDS.

Hlavní výsledky a diskuse

pH scouting ukázal lepší retenci orforglipronu při nízkém pH. Ze screeningových kolon poskytla nejlepší separaci a tvar piku BEH C18 kolona s acetonitrilem. Optimalizace zahrnující prodloužení délky kolony na 100 mm, zvýšení teploty a zjemnění gradientu vedly k rozlišení přilehlých impurit s USP rozlišením >2 a tailing faktorem kolem 1,1. Test spektrální čistoty potvrdil absenci koelucečních složek v piku API.

Přínosy a praktické využití metody

Vyvinutá metoda splňuje požadavky USP 621 pro rozlišení a symetrii piku, umožňuje rychlou identifikaci degradačních produktů a je vhodná pro rutinní QC a stabilitní studie v rámci vývoje orforglipronu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rostoucí využití systematických screeningových protokolů pro rychlý vývoj stabilitně indikačních metod v farmaceutickém sektoru. Orforglipron jako orální GLP-1 RA může zlepšit dostupnost terapie obezity a diabetu. Rychlé LC-MS metody usnadní monitorování kvality nových léčiv.

Závěr

Byla efektivně vyvinuta a verifikována LC-MS metoda pro forced degradation orforglipronu, která poskytuje vynikající rozlišení, tvar piku a splňuje USP standardy. Systematický screeningový přístup zkracuje čas vývoje a podporuje datově řízená rozhodnutí při volbě chromatografických podmínek.

Reference

1. Runge S, Wulff BS, Madsen K, Brauner-Osborne H, Knudsen LB. Different domains of the glucagon and glucagon-like peptide-1 receptors provide the critical determinants of ligand selectivity. British Journal of Pharmacology. 2003;138(5):787–794.
2. Ronveaux CC, Tomé D, Raybould HE. Glucagon-Like Peptide 1 Interacts with Ghrelin and Leptin to Regulate Glucose Metabolism and Food Intake through Vagal Afferent Neuron Signaling. The Journal of Nutrition. 2015;145(4):672–680.
3. Wharton S et al. Daily Oral GLP-1 Receptor Agonist Orforglipron for Adults with Obesity. The New England Journal of Medicine. 2023;389(10).
4. Zelesky T et al. Pharmaceutical Forced Degradation (Stress Testing) Endpoints: A Scientific Rationale and Industry Perspective. Journal of Pharmaceutical Sciences. 2023;112(12).
5. Hong P, McConville PA. A Complete Solution to Perform a Systematic Screening Protocol for LC Method Development. Waters White Paper. 2018.
6. Iraneta P et al. A Review of Waters Hybrid Particle Technology Part 3: Charged Surface Hybrid Technology and Its Use in Liquid Chromatography. Waters White Paper. 2024.
7. Walter TH et al. A New Mixed-Mode Reversed-Phase/Anion-Exchange Stationary Phase Based on Hybrid Particles. Waters Application Note. 2020.