Determination of PFAS in Tissue Using QuEChERSExtraction Followed by Noval Enhanced Matrix Removal Mixed-mode Passthrough Cleanup with LC-MS/MS Detection

Význam tématu

Perfluorované látky (PFAS) představují perzistentní a bioakumulativní znečištění, které může dosahovat vysokých koncentrací v živočišných tkáních. Analýza PFAS v biologických matricích, zejména ve tkáních ryb, je klíčová pro environmentální monitoring a plnění regulačních požadavků.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo zavést a validovat zjednodušenou metodu extrakce PFAS z tkání pomocí QuEChERS následované novou pasážovou čistící technikou EMR mixed-mode. Metoda byla optimalizována pro detekci 40 cílových PFAS sloučenin podle požadavků EPA metody 1633.

Použitá metodika a instrumentace

Postup přípravy vzorku:

• Odměření 5 g homogenizované tkáně
• Přidání vody a třepání
• Extrahování 10 mL acetonitrilu s 1 % kyseliny octové a přídavkem QuEChERS EN soli
• Homogenizace a odstředění
• Přenos supernatantu do EMR PFAS Food II cartridgí pro pasážové čištění
• Eluce pod gravitačním tlakem s dokončením při 10 psi
• Vortex a odebrání alikvoty pro analýzu

Instrumentace:

1. LC: Agilent 1290 Infinity II se sloupcem ZORBAX Eclipse Plus C18 (2,1×100 mm, 1,8 µm) a delay column InfinityLab PFC
2. MS: Agilent 6495D QQQ v režimu dMRM, negativní ionizace, suchý plyn (200 °C, 18 L/min), plášťový plyn (300 °C, 11 L/min)

Hlavní výsledky a diskuse

Zavedená metoda zkrátila dobu přípravy z 20–24 hodin u konvenční SPE na 3–4 hodiny. Sandwiched injekční program zlepšil chromatografickou separaci a snížil matrix efekty. Srovnávací studie ukázala vyšší procento zpětného zisku (>70–120 %) a lepší opakovatelnost (RSD <15 %) v různých tkáňových matricích.

Přínosy a praktické využití metody

• Výrazné zkrácení analytického workflow a úspora organických rozpouštědel
• Efektivní odstranění lipidového a proteinového pozadí
• Splnění akceptačních kritérií EPA 1633 pro 40 PFAS
• Vhodné pro rutinní monitoring PFAS ve vodním a potravním řetězci

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření analýzy na další druhy tkání a biota
• Automatizace přípravy vzorků pro vysokopropustné analýzy
• Integrace s HRMS pro neznámé PFAS a degradanty
• Rozšiřování cílového seznamu a kombinace s dalšími technikami separace

Závěr

Popsaná metoda QuEChERS + EMR mixed-mode nabízí robustní, rychlé a citlivé stanovení PFAS v biologických tkáních, splňuje požadavky EPA 1633 a zvyšuje laboratorní produktivitu při kvalitní ochraně životního prostředí.

Reference

1. U.S. Environmental Protection Agency. Method 1633, Revision A: Analysis of Per- and Polyfluoroalkyl Substances (PFAS) in Aqueous, Solid, Biosolids, and Tissue Samples by LC-MS/MS. EPA 820-R-24-007, December 2024
2. Zhao L., Parry E. Determination of PFAS in Tissue Using QuEChERS Extraction Followed by Novel Enhanced Matrix Removal Mixed-mode Passthrough Cleanup with LC-MS/MS Detection. Poster ASMS 2025, WP 136, Agilent Technologies, USA, May 2025