Determination of Glucosamine in Chondroitin Sulfate-Containing Dietary Supplements Using HPAE-PAD

Význam tématu

Glukosamin a chondroitin sulfát jsou klíčové složky doplňků pro zdraví kloubů. Přesné kvantifikace glukosaminu v matricích obsahujících silně polyaniontový chondroitin sulfát jsou nezbytné pro dodržení deklarovaného obsahu a kvality přípravků.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo rozšířit dosavadní metody (Application Note 197) a vyvinout robustní HPAE-PAD postup pro stanovení glukosaminu v doplňcích stravy obsahujících chondroitin sulfát, včetně hodnocení přesnosti, preciznosti, robustnosti a možnosti sledování stability glukosaminu.

Použitá instrumentace

• Dionex ICS-3000 RFIC-EG systém
• CarboPac PA20 kolona, 3×150 mm
• Eluent Generation Cartridge EGC II KOH
• Continuously Regenerated Anion Trap Column
• DC detector s PAD a Au pracující elektrodou
• AS autosampler a vakuová degasační jednotka

Použitá metodika

Vzorky (tablety, kapsle, nápoje, prášky) byly rozpuštěny v deionizované vodě, ultrazvukem dispergovány, odstředěny a naředěny tak, aby glukosamin dosáhl ~10 µM. Chromatografické podmínky: izokratický 20 mM KOH, průtok 0,5 mL/min, injekce 10 µL, detekce pulsed amperometry PAD, doba analýzy 7,5 min.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda poskytuje čisté chromatogramy i v přítomnosti chondroitinu sulfátu. Lineárnost odpovědi pro glukosamin v rozsahu 2,1–38 µM (r2>0,9999). Precizita po 1030 injekcích: RSD retence <2 %, RSD plochy píku ~0,7 %. Obnova glukosaminu 98–109 %. Naměřené obsahy se pohybovaly mezi 98–119 % deklarované hodnoty. Detekovány stopové množství jiných sacharidů a derivátů kyseliny askorbové. Sledování stability odhalilo tvorbu degradačního produktu při RT i zvýšené teplotě.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí jednoduchou přípravu vzorku, vysokou propustnost (>100 vzorků/den), vynikající reprodukovatelnost a přesnost vhodnou pro QA/QC v průmyslové a regulační praxi.

Budoucí trendy a možnosti využití

Potenciál pro sledování dlouhodobé stability glukosaminu, rozšíření na jiné sacharidy a glykoly, detekci stopových látek, automatizaci analýzy a integraci s pokročilou datovou analýzou.

Závěr

HPAE-PAD s eluent generací poskytuje efektivní, robustní a vysoce propustný postup pro stanovení glukosaminu v doplňcích obsahujících chondroitin sulfát, s vynikajícími parametry přesnosti, preciznosti a linearity.

Reference

1. Dionex Corporation. Determination of Glucosamine in Dietary Supplements Using HPAE-PAD; Application Note 197, LPN 2001.
2. Dionex Corporation. Eluent Preparation for High-Performance Anion-Exchange Chromatography with Pulsed Amperometric Detection; Technical Note 71, LPN 1932-01, 2007.
3. Dionex Corporation. Determination of Oxalate in Urine by Ion Chromatography; Application Note 36, LPN 034797, 1992.
4. Jun M., Shao Y., Ho C.T., Koetter U., Lech S. Structural Identification of Nonvolatile Dimerization of Glucosamine. J. Agric. Food Chem. 2003, 51, 6340–6346.
5. Shu C.K. Degradation Products Formed from Glucosamine in Water. J. Agric. Food Chem. 1998, 46, 1129–1131.