Analysis of Lutein and Zeaxanthin

Význam tématu

Karotenoidy lutein a zeaxanthin jsou klíčové látky v potravinářském i nutričním výzkumu díky svým antioxidačním vlastnostem a významu pro zdraví očí. Přesná a rychlá analytika těchto xantofylů je nezbytná pro kontrolu kvality potravin, doplňků stravy i farmaceutických přípravků.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem aplikace je představit robustní metodiku HPLC pro separaci a kvantifikaci luteinu a zeaxanthinu s využitím kolon Shim-pack XR-ODS. Studie demonstruje optimalizovaný chromatografický postup, který zkracuje dobu analýzy a zajišťuje vysokou účinnost separace.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda je založena na reverzní fázi s gradientním elucí:

• Kolona: Shim-pack XR-ODS, 75 mm × 3,0 mm I.D., částice 2,2 µm
• Mobilní fáze A: Methanol/Tetrahydrofuran/Voda (45:30:25, v/v/v)
• Mobilní fáze B: Tetrahydrofuran
• Gradient: 0 % B (0–4,50 min) → 100 % B (4,51–5,50 min) → 0 % B (5,51–7,50 min)
• Průtok: 0,8 mL/min
• Teplota kolony: 50 °C
• Objem injekce: 2 µL
• Detekce: UV-VIS při 450 nm

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda poskytuje baseline separaci luteinu a zeaxanthinu během 7,5 minuty. Špičky jsou ostré a symetrické, s vynikajícím rozlišením (>1,5). Linearity kalibrační křivek přesahuje hodnotu R² = 0,999, což dokládá vysokou přesnost a opakovatelnost analýzy. Repeteabilita retence i ploch špiček je pod 1 % RSD.

Přínosy a praktické využití metody

Průlomová rychlost analýzy a vysoká účinnost separace umožňují nasazení v rutinní kontrole potravin, doplňků stravy i farmaceutických vzorků. Metoda šetří čas i spotřebu organických rozpouštědel a minimalizuje nároky na údržbu chromatografu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může směřovat k integraci s hmotnostní detekcí (LC–MS), automatizaci přípravy vzorků či miniaturizaci kolony pro vysokokapacitní screening. Kombinace s biologickými testy antioxidant­ního potenciálu rozšíří aplikační spektrum.

Závěr

Popsaná HPLC metoda na bázi Shim-pack XR-ODS nabízí spolehlivý, rychlý a citlivý postup pro analýzu luteinu a zeaxanthinu. Vysoká reprodukovatelnost i jednoduchá údržba chromatografické sestavy ji předurčují pro široké průmyslové i výzkumné nasazení.

Reference

• Shimadzu Corporation. ERAS-1000-0523: Analysis of Lutein and Zeaxanthin, First Edition Sep. 2023.