Meet Big Tuna: automated, versatile buffer exchange
Aplikace | 2019 | Unchained LabsInstrumentace
Automatizovaná výměna pufrů je zásadní pro zajištění konformační, chemické a koloidní stability proteinů při vývoji biofarmak. Ruční metody jsou často časově náročné, pracné a variabilní, což zpomaluje optimalizaci formulací.
Cílem této aplikace je představit systém Big Tuna pro zautomatizovanou ultrafiltrační/diafiltrační výměnu pufrů ve formátech Unfilter 96 a Unfilter 24. Studie demonstruje, jak platforma zvládá různé objemy vzorků a zároveň umožňuje následné koncentrační kroky.
Systém Big Tuna kombinuje tlakovou ultrafiltraci/diafiltraci s jemným orbitálním mícháním a kontinuálním měřením objemu ultrazvukovým senzorem. Klíčové komponenty:
Big Tuna významně redukuje ruční zásahy, zvyšuje reprodukovatelnost a umožňuje paralelní zpracování až 96 vzorků. Uživatelé mají plnou kontrolu nad procentem výměny, objemem odebraným v cyklu i konečnou koncentrací.
Očekává se integrace dalších analytických modulů pro sledování stability a agregace, rozšíření filtračních destiček pro různá pásma molekulové hmotnosti a plná robotizace workflow v moderních laboratořích. Aplikace v preklinickém vývoji, QA/QC a výrobě bioléčiv.
Platforma Big Tuna představuje efektivní řešení pro vysokopropustnou a přesnou automatizovanou výměnu pufrů a koncentraci proteinů, čímž zrychluje a zpřesňuje vývoj biologických léčiv.
Unchained Labs. Meet Big Tuna: automated, versatile buffer exchange. Rev B, 2019.
Příprava vzorků
ZaměřeníVýrobceUnchained Labs
Souhrn
Význam tématu
Automatizovaná výměna pufrů je zásadní pro zajištění konformační, chemické a koloidní stability proteinů při vývoji biofarmak. Ruční metody jsou často časově náročné, pracné a variabilní, což zpomaluje optimalizaci formulací.
Cíle a přehled studie / článku
Cílem této aplikace je představit systém Big Tuna pro zautomatizovanou ultrafiltrační/diafiltrační výměnu pufrů ve formátech Unfilter 96 a Unfilter 24. Studie demonstruje, jak platforma zvládá různé objemy vzorků a zároveň umožňuje následné koncentrační kroky.
Použitá metodika a instrumentace
Systém Big Tuna kombinuje tlakovou ultrafiltraci/diafiltraci s jemným orbitálním mícháním a kontinuálním měřením objemu ultrazvukovým senzorem. Klíčové komponenty:
- Big Tuna – automatizovaný modul regulace tlaku, míchání a objemu
- Filtrační destičky Unfilter 96 (100–450 μL) a Unfilter 24 (0,45–8 mL) s 10 kDa membránou
- Lunatic – spektrofotometr pro stanovení koncentrace proteinů (A280, E1% pro hIgG)
Hlavní výsledky a diskuse
- Unfilter 96: výměna human IgG (10,5 mg/mL) do PBS pH 6,8 dosáhla 96,3 % za 3 cykly (~2,6 h); finální koncentrace 10,4 ± 0,2 mg/mL a objem 457 ± 9 μL.
- Unfilter 96 + 3× koncentrace: dosažení cílové koncentrace ~29 mg/mL během 3,5 h; finální objem 146 ± 5 μL.
- Unfilter 24: výměna 8 mL (10,8 mg/mL) do PBS pH 6,8 dosáhla 97,7 % za 3 cykly (~4,3 h); finální objem 8001 ± 73 μL.
- Porovnání metod Filter & Refill vs. Dilute & Filter při vysoké koncentraci (~100 mg/mL) ukázalo zkrácení doby výměny z 24,6 h na 11,4 h při předchozí diluci vzorku.
Přínosy a praktické využití metody
Big Tuna významně redukuje ruční zásahy, zvyšuje reprodukovatelnost a umožňuje paralelní zpracování až 96 vzorků. Uživatelé mají plnou kontrolu nad procentem výměny, objemem odebraným v cyklu i konečnou koncentrací.
Budoucí trendy a možnosti využití
Očekává se integrace dalších analytických modulů pro sledování stability a agregace, rozšíření filtračních destiček pro různá pásma molekulové hmotnosti a plná robotizace workflow v moderních laboratořích. Aplikace v preklinickém vývoji, QA/QC a výrobě bioléčiv.
Závěr
Platforma Big Tuna představuje efektivní řešení pro vysokopropustnou a přesnou automatizovanou výměnu pufrů a koncentraci proteinů, čímž zrychluje a zpřesňuje vývoj biologických léčiv.
Reference
Unchained Labs. Meet Big Tuna: automated, versatile buffer exchange. Rev B, 2019.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
Podobná PDF
Fast track formulation pH screening with automated buffer exchange on Big Tuna
2019|Unchained Labs|Aplikace
Application Note Fast track formulation pH screening with automated buffer exchange on Big Tuna Introduction The critical process of screening formulation buffers to optimize stability is labor intensive and time consuming, which are often limiting factors in biologics development. The…
Klíčová slova
tuna, tunabig, bigbuffer, bufferexchange, exchangeformulation, formulationcycle, cyclevolume, volumeprotein, proteinlabs, labsfinal, finalscreening, screeningtrack, trackaverage, averagehai, hained
Automated platform buffer screening for multiple proteins on Big Tuna
2019|Unchained Labs|Aplikace
Application Note Automated platform buffer screening for multiple proteins on Big Tuna Introduction The critical process of screening formulation buffers to optimize stability is labor-intensive and time-consuming, which is often a limiting factor in biologics development. The conformational, chemical, and…
Klíčová slova
buffer, buffertuna, tunabig, bigmab, mabexchange, exchangeproteins, proteinsprotein, proteinplatform, platformfinal, finalstock, stockvolume, volumeconcentration, concentrationlabs, labsformulations, formulationstarget
Soup-up AAV & LNP sample prep with Big Tuna
2021|Unchained Labs|Aplikace
Application Note Soup-up AAV & LNP sample prep with Big Tuna Introduction Optimizing the production of delivery vehicles is a critical area of gene therapy development. Compared to monoclonal antibodies and other biologics, the characterization and formulation of delivery vectors…
Klíčová slova
aav, aavtuna, tunalnp, lnpfinal, finalbig, bigexchanged, exchangedexchange, exchangevolume, volumetarget, targetsoup, soupbuffer, buffercapsid, capsidinitial, initialempty, emptywell
Automated platform buffer screening for multiple proteins on Big Kahuna
2019|Unchained Labs|Aplikace
Application Note Automated platform buffer screening for multiple proteins on Big Kahuna Introduction The critical process of screening formulation buffers to optimize stability is labor-intensive and time-consuming, which is often a limiting factor in biologics development. The conformational, chemical, and…
Klíčová slova
kahuna, kahunabuffer, bufferbig, bigmab, mabexchange, exchangeprotein, proteinproteins, proteinsplatform, platformper, pervolume, volumefinal, finalexcipient, excipientformulations, formulationsinitial, initialscreening
