Analysis of Amino Acids in Foods Using Automatic Pretreatment Function of Integrated HPLC

Význam tématu

Potraviny obsahují řadu aminokyselin, které ovlivňují nutriční hodnotu a chuť výrobků. Měření obsahu jednotlivých aminokyselin je klíčové při hodnocení kvality potravin a výzkumu funkčních složek. Automatizovaná předkolonová derivatizace integrovaná do HPLC zvyšuje selektivitu, citlivost a reprodukovatelnost analýzy.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem článku je představit metodu analýzy 22 aminokyselin v potravinových vzorcích pomocí HPLC systému LC-2050C s automatickou funkcí předkolonové derivatizace. Ukázány jsou protokoly přípravy vzorků a chromatogramy získané u 14 typů reálných vzorků zahrnujících hydrolyzované produkty i volné aminokyseliny.

Použitá metodika a instrumentace

• HPLC systém LC-2050C se zabudovanou automatickou přípravou vzorku
• Kolona Shim-pack XR-ODSII (100 mm × 3,0 mm, 2,2 μm)
• Detekce fluorescenčním detektorem RF-20Axs s kanály Ex 350 Em 450 a Ex 266 Em 305
• Reagencie pro derivatizaci prekolonou: MPA/OPA a FMOC
• Mobilní fáze: A acetátový pufr pH 6, B voda acetonitril 10:90, C acetátový pufr pH 5 s EDTA
• Gradientní eluce nízkotlakým programem, průtok 1,0 mL/min, teplota kolony 40 °C, injekční objem 1 μL
• Příprava vzorků: hydrochloridová hydrolýza pro proteinové aminokyseliny, ultrafiltrace pro odstranění proteinů, ředění HCl pufrem

Hlavní výsledky a diskuse

Proteinogenní aminokyseliny byly separovány do 20 minut s rozlišením všech 22 analyzovaných komponent. Standardní vzorky prokázaly vysokou citlivost a selektivitu metody. Analýza reálných potravinových vzorků ukázala spolehlivost i v komplexních matricích jako rýže, sójový extrakt, ryby, vejce, zelenina, nápoje a kokosové mléko. Diskutovány jsou možné překryvy píku tryptofanu a GABA a vliv matrix na derivatizační reakci řešený ultrafiltrací.

Přínosy a praktické využití metody

• Zvýšená selektivita díky prekolonové derivatizaci
• Vysoká citlivost a nízké detekční limity
• Rychlá analýza proteinogenních aminokyselin do 20 minut
• Kompletní automatizace přípravy vzorku a chromatografické analýzy
• Možnost rutinního nasazení v laboratořích QA/QC, výživového výzkumu a potravinářských aplikacích

Budoucí trendy a možnosti využití

Neustálý rozvoj bude směřovat k integraci s hmotnostní spektrometrií pro rozšíření detekčního rozsahu a kvality dat. Online a mikrofluidní derivatizace zvýší propustnost analýzy. Metoda lze adaptovat pro nekovalentní metabolity a rozšířenou metabolomiku. Důležitá je také miniaturizace systémů a optimalizace pro vysokopropustné screeningy.

Závěr

Integrovaná systémová předkolonová derivatizace HPLC LC-2050C představuje robustní řešení pro rychlou a citlivou analýzu aminokyselin v potravinových matricích. Automatizace zajišťuje vysokou reprodukovatelnost a efektivitu metody vhodné pro vědecké studie i rutinní kontrolu kvality.

Reference

Aplikace News L529A Shimadzu Corporation Mar 2025