A Simple LC-MS/MS Method for Simultaneous Analysis of 35 Anti-psychotics in Human Plasma for Clinical Research

Význam tématu

Antipsychotika jsou široce nasazována v kombinované léčbě psychiatrických poruch, což zvyšuje riziko farmakokinetických a farmakodynamických interakcí. Spolehlivá a citlivá analýza koncentrací těchto látek v plazmě je nezbytná pro klinický výzkum a optimalizaci dávkování.

Cíle a přehled studie

Studie představuje jednoduchou a robustní LC-MS/MS metodu pro simultánní stanovení 35 antipsychotik v lidské plazmě. Cílem bylo dosáhnout rychlé, cenově efektivní a vysoce přesné analýzy v jednom chromatografickém běhu s dobou injekce pod pět minut.

Použitá metodika

• Příprava vzorku: 50 µl plazmy, 100 µl precipitace bílkovin (70:30 MeOH:0,1 M ZnSO₄), vortex, centrifugace 18 000 g, 5 min.
• Ředění supernatantu 1:1 vodou, míchání 3 min při 850 rpm.
• Kvantifikace založená na více reakcích sledování (MRM) s použitím stabilně značených interních standardů.
• Korekce pomocí vnitřních standardů pro minimalizaci matricových vlivů.

Použitá instrumentace

• ACQUITY UPLC I-Class System s FL Sample Manager
• XSelect HSS C18 SB XP kolona (2,1 × 30 mm, 2,5 µm, 100 Å)
• Xevo TQ-S micro Triple Quadrupole Mass Spectrometer, ESI+ režim
• Softwarové nástroje MassLynx a TargetLynx pro zpracování dat

Hlavní výsledky a diskuse

• Lineární rozsah pro jednotlivé analyty pokrýval rozmezí od jednotek do tisíců ng/ml s r² > 0,99.
• Funkční citlivost (LLMI) zaručuje ≤20 % CV a ≤15 % bias při nejnižších koncentracích.
• Celková přesnost (n = 25) ≤8,7 % CV, opakovatelnost (n = 5) ≤7,4 % CV.
• Obnovení signálu po extrakci 85–115 %, celkové výtěžky 52–97 %.
• Normalizované matricové efekty v rozmezí 0,88–1,14 díky interním standardům.
• Žádný významný carry-over (<25 % plochy kalibrátoru 1) a stabilita 72 h v autosampleru (±15 % změna koncentrace).

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí rychlou analýzu více látek najednou, nízkou spotřebu vzorku (50 µl), jednoduchou přípravu a vysokou reprodukovatelnost, což ji předurčuje pro farmakokinetické a interakční studie v klinickém výzkumu.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření panelu o nové psychofarmaka a jejich metabolity.
• Automatizace přípravy vzorku pro vysokopropustné laboratoře.
• Integrace dat do systémů pro personalizovanou medicínu.
• Adaptace metodiky na jiné biologické matrice (tkáň, moč).

Závěr

Popsaná LC-MS/MS metoda poskytuje citlivé a spolehlivé stanovení 35 antipsychotik v lidské plazmě během jedné analýzy pod pět minut. Vysoká přesnost, nízké matricové efekty a jednoduchá příprava ji činí ideální pro klinický výzkum léčiv.

Reference

1. Wijesinghe R: A review of pharmacokinetic and pharmacodynamic interactions with antipsychotics. Ment Health Clin 2016, 6(1):21–27.