ACQUITY™ UPLC™ I-Class SM-FL/Xevo™ TQ Absolute System: Analytical Performance for Free Testosterone

Význam tématu

Analýza volného testosteronu v séru je klíčová pro diagnostiku a monitorování endokrinních poruch, reprodukčních stavů a metabolických onemocnění. Přesné stanovení koncentrace tohoto hormonu umožňuje lékařům i výzkumníkům přijímat informovaná rozhodnutí o léčbě a sledovat účinnost terapeutických postupů.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem prezentované studie bylo ověřit analytický výkon systému Waters ACQUITY UPLC I-Class SM-FL/Xevo TQ Absolute IVD pro kvantifikaci volného testosteronu v lidském séru. Součástí byla výkonnostní charakterizace metody z hlediska linearity, citlivosti, přesnosti a opakovatelnosti.

Použitá metodika a instrumentace

• Přístrojové vybavení: ACQUITY UPLC I-Class SM-FL spojené s hmotnostním spektrometrem Xevo TQ Absolute, řízené softwarem MassLynx v4.2 a zpracování dat aplikací TargetLynx XS.
• Příprava vzorku: 200 µl séra podstoupilo vyváženou dialýzu, extrakci methyl-terc.butyl etherem a následnou kapalně–kapalnou extrakci.
• Chromatografické podmínky: kolona ACQUITY UPLC BEH C18 (1,7 µm, 2,1×100 mm), mobilní fáze A – 0,2 mM fluorid amonný ve vodě, B – 0,2 mM fluorid amonný v methanolu, průtok 0,30 ml/min, gradient od 50 % B do 98 % B s časovou programací pro rychlou separaci a obnovu kolony.
• Hmotnostní spektrometrie: režim MRM, ESI pozitivitní ionizace, rozlišení 0,75 FWHM na MS1 a MS2.

Hlavní výsledky a diskuse

• Linearita metody: rozsah stanovení definovaný lineární regresí s koeficientem r2 > 0,995.
• Citlivost: dolní hranice kvantifikace (LLOQ) stanovena při poměru S/N > 10 a %RSD ≤ 20 %, opakovaná měření (n=50) potvrdila robustní citlivost.
• Přesnost a opakovatelnost: celková přesnost QC vzorků prováděných pětkrát (n=25) vykázala %RSD v přijatelném rozmezí; externí kvalita (EQA) porovnáním s ALTM hodnotou (n=45) ukázala minimální bias.
• Chromatogramy prokázaly jasnou separaci píku volného testosteronu bez interferencí, což potvrzuje selektivitu a čistotu měření.

Přínosy a praktické využití metody

Implementace popsané UPLC-MS/MS metody přináší laboratorím a klinikám řadu výhod: vysoká citlivost i selektivita, rychlý cyklus analýzy (<5 minut), reprodukovatelné výsledky a možnost automatizace přípravy vzorků. Metoda je vhodná pro rutinní diagnostiku i výzkumné studie vyžadující přesné stanovení steroídních hormonů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozvoj UPLC-MS/MS přístrojů s vyšším rozlišením, rychlejšími dávkovacími systémy a pokročilými softwarovými nástroji pro zpracování dat umožní:

• Paralelní analýzu širšího spektra hormonů v jednom běhu.
• Integrovanou automatizaci přípravy vzorků a zkrácení doby analýzy.
• Využití umělé inteligence pro prediktivní kontrolu kvality a interpretaci výsledků.

Závěr

Testovaný systém Waters ACQUITY UPLC I-Class SM-FL/Xevo TQ Absolute prokázal vynikající analytické parametry při stanovení volného testosteronu v séru. Metoda nabízí vysokou citlivost, přesnost a robustnost potřebnou pro klinické i výzkumné aplikace.

Reference

Žádné literární reference nebyly uvedeny v původním dokumentu.